15 açúcares - Ministério da Agricultura

Ministério da Agricultura, Pecuária e Abastecimento – MAPA
Secretaria de Defesa Agropecuária – SDA
Coordenação Geral de Apoio Laboratorial - CGAL
Manual de Métodos de Análises de Bebidas e Vinagres
Não alcoólicos
AÇÚCARES
Método 15
1. MÉTODO
Cromatográfico
2. PRINCÍPIO
Baseia-se na separação e identificação de sacarose, glicose, frutose e outros açúcares presentes
na amostra através de cromatografia em papel.
3. MATERIAL
3.1 EQUIPAMENTOS
a) Balança semi-analítica
b) Secador de cabelo
c) Estufa
3.2 REAGENTES E SOLUÇÕES
a) Soluções aquosas a 2% de:
Sacarose
Glicose
Frutose
Maltose
b) Fase Móvel:
65 mL de n-propanol + 10 mL de acetado de etila + 25 mL de água destilada.
c) Revelador:
5 mL de anilina a 4% em álcool + 5 mL de difenilamina a 4% em metanol + 1 mL de ácido
fosfórico xaroposo.
3.3 VIDRARIA E OUTROS MATERIAIS
a) Papel Whatman nº 1 para cromatografia;
b) Micropipetas e pipeta ou tubo capilar;
c) Cuba cromatográfica;
d) Atomizador;
e) Balões volumétricos de 10 mL;
f) Funil;
g) Papel de filtro qualitativo
4. PROCEDIMENTO
A 6 cm da base do papel Whatman, aplicar padrões de sacarose, glicose, frutose, maltose ou
outro açúcar.
Preparar a amostra a 10% com água destilada e filtrar.
Aplicar 0,02 mL do filtrado e 0,02 mL de cada padrão, distanciados no mínimo de 3 cm.
Colocar a fase móvel e o papel numa barquinha e cromatografar descendentemente durante 12
horas. Retirar o papel e deixar secar ao ar. Revelar o cromatograma com a mistura reveladora.
Secar o papel em estufa a 100-105ºC até o aparecimento de manchas características quanto à cor
e também quanto aos respectivos Rf.
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Método 15
AÇÚCARES
5. CÁLCULO E EXPRESSÃO DO RESULTADO
Determina-se o Rf de cada padrão e de cada componente da amostra, conforme a fórmula:
Rf =
Dc
Ds
Onde:
Dc = Distância percorrida pelo componente da amostra ou padrão.
Ds = Distância percorrida pela fase móvel.
Correlacionar os Rf dos padrões com os Rf do componente da amostra para identificação do
açúcar.
REFERÊNCIA
INSTITUTO de tecnologia de alimentos. Manual técnico de análise química de alimentos.
Campinas, 1990.
*PEARSON, David. The Chemical Analysis of Foods. 6. ed. London: J. & A. Churchill,.
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