Observação microscópica de organismos

E S C O L A
S E C U N D Á R I A
A N T Ó N I O
10º ANO
S É R G I O
MÓDULO 3 (três)
Ob s e rv a ç ã o m i c ro s c óp i c a d e or ga ni s m o s pr o c a ri o n t es
Observação microscópica, de bactérias responsáveis pelo fabrico de iogurte, por coloração simples
Introdução
O iogurte é um produto coagulado obtido através da fermentação láctica do leite, pela acção das
bactérias das espécies Lactobacillus bulgaricus e Streptococcus thermophilus. Os organismos do género
Lactobacillus apresentam células em forma de bastonete, enquanto os do género Streptococcus têm células
redondas ou ovóides, que podem ocorrer aos pares. Ambas as espécies apresentam, frequentemente,
cadeias longas e desenvolvem-se bem em meios ácidos.
No início do fabrico do iogurte, o pH do leite é mais favorável ao desenvolvimento de S.
thermophilus, que assegura o começo da fermentação láctica a partir da lactose. Este processo provoca a
acidificação progressiva do meio que favorece o desenvolvimento de L. bulgaricus, espécie que, por sua
vez, acelera o crescimento de S. thermophilus pois, atacando proteínas do leite (caseína), liberta
aminoácidos essenciais ao crescimento desta última bactéria.
Observa-se, assim, uma situação de simbiose entre estas duas espécies, que resulta na produção
de uma quantidade de ácido láctico superior ao que estas espécies produzem quando estão separadas.
MATERIAL
- Microscópio
- Lâminas
- Ansa de inoculação
- Tina de coloração (2 varetas de vidro colocadas
sobre um lavatório)
- Papel de filtro
- Papel de limpeza
- Álcool a 95%
- Água destilada
- Solução de violeta-de-genciana (solução de
violeta-de-cristal), solução de fucsina de Ziehl
ou solução de azul-de-metileno
- Óleo de imersão
- Xilol
- Iogurte natural
Nota: Para esta actividade as lâminas devem estar bem desengorduradas, pelo que se recomenda que as
mesmas sejam mantidas num recipiente, mergulhadas em álcool.
MÉTODOS
1 - Coloque uma gota de água destilada numa lâmina seca.
2 - Com uma ansa de inoculação, torne homogéneo o iogurte e retire uma gota. Espalhe-a na lâmina, sobre
a gota de água, fazendo um esfregaço (Fig. 1).
Figura 1 Técnica de esfregaço.
“A experiência é o nome que damos aos nossos erros” Wilde, Oscar
Observação microscópica, de bactérias responsáveis pelo fabrico de iogurte, por coloração simples
3 - Seque o esfregaço ao ar durante alguns minutos.
4 - Fixe o esfregaço, mergulhando a lâmina em álcool durante 5 minutos.
5 - Coloque a lâmina na tina de coloração, sobre as duas varetas de vidro, e inunde o esfregaço com o
corante. Deixe actuar o tempo conveniente de acordo com o corante que escolher (1 a 2 minutos para a
solução de azul-de-metileno; 20 a 60 segundos para a solução de violeta-de-genciana; 15 a 30 segundos
para a solução de fucsina).
6 - Remova o corante do esfregaço por imersão em água ou colocando a lâmina paralelamente ao fio de
água de uma torneira escassamente aberta.
7 - Retire cuidadosamente o excesso de água com papel de filtro.
8 - Seque ao ar a zona do esfregaço.
9 - Coloque a lâmina no microscópio e, sem colocar lamela, proceda à sua focagem com uma das
objectivas de menor ampliação.
10 - Coloque uma gota de óleo de imersão sobre o esfregaço e observe com a objectiva de 100x. Faça um
esquema legendado do que observa.
NOTA: Antes da lavagem do material de vidro, as preparações com microrganismos devem ser colocadas
em recipientes com hipoclorito de sódio (lixívia).
“A experiência é o nome que damos aos nossos erros” Wilde, Oscar