ÁREA: CV (X) CHS’A ( ) ECET ( ) CARACTERIZAÇÃO DE AMOSTRAS CLÍNICAS POSITIVAS PARA GIARDIA DUODENALIS PROVENIENTES DE MANIPULADORES DE ALIMENTOS DE RESTAURANTES DO MUNÍCIPIO DE PARNAÍBA, PIAUÍ. Nelciane de Sousa Fernandes (Bolsista PIBIC/CNPq), Ana Carolina Fonseca Lindoso Melo (Orientadora/ Depto Biomedicina-UFPI) Introdução Nos países em desenvolvimento, como o Brasil, a prevalência de doenças parasitárias se dá pelas más condições sanitárias, fato que expõe grande parte da população a estes fatores de risco. Sendo assim, a incidência de parasitoses torna-se uma problemática de saúde pública, exigindo ações governamentais de alto custo (ANDREAZZI et al 2007). Ainda em decorrência do desenvolvimento urbano, tornou-se mais frequente o consumo de alimentos em ambientes comerciais, como restaurantes e padarias. Este processo possui como reflexo a contaminação de alimentos e a transmissão de enteroparasitas para os consumidores devido à má higienização e manuseio incorreto dos instrumentos de trabalho. (ANDREAZZI et al 2007). Assim sendo, esta pesquisa objetivou detectar a contaminação parasitária de manipuladores de alimentos em restaurantes do município, bem como coletar e caracterizar amostras clínicas positivas para Giardia duodenalis a fim de determinar sua importância na cadeia epidemiológica da giardíase. Metodologia O experimento ocorreu na zona urbana da cidade de Parnaíba, situada no extremo norte do Piauí. A coleta de material foi realizada em 151 manipuladores de alimentos, independente da idade, sexo, renda e escolaridade, selecionados de maneira randômica. Os manipuladores de alimentos foram convidados a realizar exame parasitológico de fezes. As análises parasitológicas foram realizadas nas amostras acondicionadas em pote plástico com tampa, devidamente identificados através dos métodos de Hoffman, Pons e Janer (sedimentação espontânea). Para caracterização morfológica, as amostras foram processadas segundo método de Faust (Rey, 2001). Destas amostras foram selecionadas 15 amostras positivas para Giardia duodenalis. Posteriormente, foi realizada a purificação dos cistos em gradiente de sacarose O DNA foi extraído das amostras fecais por utilização do Kit ZR Fungal/Bacterial DNA MiniPrep – Zymo Research. O procedimento é simples e foi executado de acordo com o protocolo do fabricante. (Bonhomme et al., 2011). O projeto é aprovado pelo Comitê de Ética em Pesquisa da Universidade Federal do Piauí com CAAE (Certificado de Apresentação para Apreciação Ética): 0014.0.045.000-09. Cada participante assinou um termo de consentimento autorizando a utilização do material coletado para fins de pesquisa. Resultados e Discussão Foram coletadas 151 amostras fecais dos manipuladores de alimentos. Dos entrevistados, 55% são do gênero feminino e 45% do gênero masculino. Das amostras fecais analisadas, 53% apresentaram-se contaminadas por algum tipo de enteroparasitas. Estes indivíduos podem apresentar desde uma diarreia até uma prisão de ventre, bem como náuseas, dor de cabeça afetando a sua qualidade de vida (HAGEL et al.,2011). Estudos relacionados à ocorrência de enteroparasitoses em manipuladores de alimentos em escolas demonstraram um índice de positividade de 12% para agentes contaminantes microbiológicos indicando o risco de infecção dos consumidores de alimentos em geral em adquirir algumas parasitoses (SOUSA et al.,2008). As protozooses mostraram-se mais prevalentes que as helmintíases, com um percentual 83%. Entre os parasitas encontrados houve uma maior prevalência de Entamoeba coli (29%), seguida por Endolimax nana (28%). Apesar destes parasitas não serem patogênicos o dado é relevante já que estes podem indicar más condições de saneamento básico, já que podem ser transmitidos via fecal-oral (NORBERG et al, 2008). TABELA 1: Frequências e porcentagens referentes às espécies encontradas nos exames parasitológicos dos manipuladores de alimentos. Espécies Frequência Prevalência (%) Ascaris lumbricoides 8 8 Entamoeba histolytica/Entamoeba 8 8 Entamoeba coli 29 29 Ancilostomideo 6 6 Iodamoeba butschlii 3 3 Giardia duodenalis 15 15 Endolimax nana 28 28 Enterobius vermicularis 3 3 100 100 díspar TOTAL Giardia duodenalis teve prevalência de 15%, relativamente baixa. A ocorrência desta protozoose pode ser pequena ou ausente, pois os participantes apresentavam principalmente faixa etária de 20 a 30 anos. De acordo com a literatura, este parasita é encontrado principalmente em crianças com idade de zero a cinco anos, e os adultos apresentam certa imunidade, não ocorrendo tantas reinfecções (UCHÔA et al., 2001). Até o momento, foi possível realizar o isolamento de 15 amostras de Giardia duodenalis, esta técnica de isolamento é muito eficaz para identificação do patógeno, pois permite que o DNA do parasita seja isolado para posteriormente ser amplificado por meio da PCR, porém, não é muito utilizada devido seus altos custos ( BOUZID et al., 2008). O método da PCR permite que a pesquisa, futuramente, realize caracterização molecular do parasita, bem como, determine as assembleias que os manipuladores de alimentos albergam. Aproximadamente 65% dos manipuladores afirmam ter, a renda mensal familiar entre 2 a 3 salários mínimos. Esta é renda relativamente baixa quando comparada ao número de pessoas presentes nestas residências, fator este que influencia na suscetibilidade de infecções intestinais. (SOUZA et al., 2004).Quanto ao nível de escolaridade dos entrevistados, prevaleceu o ensino fundamental incompleto com 34%. No quesito higiene pessoal grande parte dos manipuladores (98%) demonstram possuir hábitos de higiene saudáveis. Porém isto não significa total isenção de contaminação, uma vez que a higienização pode ser feita de forma inadequada. (SOUZA et al., 2004) Conclusão: Os resultados demonstram que os manipuladores de alimentos apresentam enteroparasitoses. Observou-se também que estes manipuladores possuem baixo salário e baixo nível de escolaridade podendo levar a alta rotatividade dos funcionários nesses estabelecimentos o que dificulta a implementação de boas práticas de manipulação. Apoio: Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) Processo: 476396/2011-5 Referências: ANDREAZZI, M. A. R.; BARCELLOS, C.; HACON, S.Old indicators for new problems: the relations hip between sanitation and health. Revista Panamericanade Salud Pública, v. 22, n.3, p. 211-217, 2007 BONHOMME, J., LE GOFF, L., LEMÉE, V., GARGALA, G., BALLET, J.J., FAVENNEC, L. Limitations of tpi and bg genes sub-genotyping for characterization of human Giardia duodenalis isolates. Parasitology International, v.3, p.327-30, 2011. BOUZID, M.; STEVERDING, D.; TYLER, K. M. Detection and surveillance of waterborne protozoan parasites. Current opinion in biotechnology, v. 19, n. 3, p. 302-306, 2008. HAGEL, I. et al. Co-infection with Ascaris lumbricoides modulates protective immune responses against Giardia duodenalis in school Venezuelan rural children. Acta tropica, v. 117, n. 3, p. 189-195, 2011 SOUZA, R. R.; GERMANO, P. M. L.; GERMANO, M. I. S. Técnica da simulação aplicada ao treinamento de manipuladores de alimentos, como recurso para a segurança alimentar de refeições transportadas. Revista Higiene Alimentar, São Paulo, v. 18, n. 122, p. 21-25, 2004. Palavras-chave: Manipuladores de alimentos. Giardia duodenalis. Enteroparasitas