Aplicação de método específico de quantificação de proteína na

Aplicação de método específico de quantificação de proteína na detecção rápida (2 a 3
minutos) de possíveis Fraudes no Leite
Engª Aline Cristina Nabuco *
Resumo
A Fraude no Leite é grave e causa preocupações aos órgãos oficiais (Saúde Pública e Ministério
da Agricultura) e às indústrias processadoras.
Em geral, os principais adulterantes encontrados são: soda cáustica, bicarbonato de sódio,
água oxigenada, soro de leite, ureia, etc.
A maior dificuldade enfrentada pelos laboratórios oficiais e por empresas está na ausência de
um método rápido e eficiente para a detecção de possíveis fraudes no leite.
Introdução
A prática da adulteração tem o objetivo de mascarar a diluição, que é feita, dentre outros
motivos, para o ganho de volume, pois as empresas pagam por litro recebido.
A adulteração, além do problema de saúde pública, causa grandes prejuízos às empresas
processadoras, pois comprometem a qualidade dos produtos e o rendimento operacional.
A fraude no leite é uma preocupação em geral, não só no Brasil, mas em diversos países no
mundo.
Anualmente, a IDF (Federação Internacional de Laticínios) e a ISO (Organização Internacional
para a Padronização) organizam as ¨Semanas Analíticas de Qualidade ¨ e o tema ¨Fraude no
Leite ¨ sempre está em destaque.
O Prof Dr. Marco Antônio Moreira Furtado (Juiz de Fora, MG) é especialista na área de
métodos analíticos em leite e derivados (foco: pesquisas de fraudes e análise de proteínas) e
tem marcado presença nos eventos da IDF. Ele defende a utilização de métodos rápidos que
possam detectar possíveis Fraudes e com isto desestimular os agentes fraudadores.
Em 2010, na reunião do IDF em Auckland, Nova Zelândia, a Dra Petra Lutter (Centro de
Pesquisas da Nestlé, Suiça) fez uma apresentação sobre a utilização de métodos específicos
para análise de proteínas e que podem ser eficientes na detecção de possíveis Fraudes no
Leite.
Nesta apresentação, ela destacou os benefícios do método colorimétrico / dye-binding (não
sensíveis ao nitrogênio não proteico, NNP), citando o Analisador SPRINT como método
(secundário) de referência e oficial para quantificação de proteínas (AOAC 930.29 / 930.33 e
967.12). Foram apresentadas análises de amostras com diversos adulterantes (simulações com
diferentes concentrações contendo: soro líquido neutralizado, proteína de soro, ácido
cianúrico, ureia, bicarbonato, etc). Em todas as simulações, o Analisador SPRINT forneceu o
resultado da análise com queda do resultado do % de proteínas com o aumento da
concentração do adulterante e foi sensível a todas as concentrações utilizadas.
Metodologia e resultados
O método colorimétrico (Dye-binding) é conhecido desde 1944. A partir de 1960 passou a ser
utilizado na França e na Holanda. Em 1967 foi inserido na metodologia oficial AOAC (967.12 /
930.33 e 930.29).
Em 2008, a CEM Corporation (www.cem.com) (www.superlab.com.br) redesenhou o método
colorimétrico dye-binding (com a tecnologia do corante iTAG) deixando-o prático,
automatizado e rápido (tempo de análise de 2 a 3 minutos) no Analisador SPRINT.
O Método oficial Kjeldahl, além de demorado, utiliza fator que faz a conversão da quantidade
de nitrogênio total (quantificado por titulação de amostra previamente digerida e destilada)
em proteína. Por este método, o aumento no teor de nitrogênio (incluindo NNP) gera aumento
no resultado calculado do % de proteínas. Sabendo disso, os fraudadores adicionam este tipo
de componente para que a diluição não seja descoberta por queda do % total de proteína. O
método específico elimina esse efeito do adulterante porque não contabiliza NNP no resultado
do % de proteína que fornece. Pode-se observar nas Tabelas 01 e 02 a comparação de testes
em amostras de leite integral e leite integral adulterado (adição proposital de 0,3% de
Melamina).
A Tabela 01 mostra resultados para amostras de Leite Integral: método oficial Kjeldahl (3,25%
proteína ± 0,017) e Analisador SPRINT (3,12% proteína ± 0,005).
A Tabela 02 mostra resultados para amostras de Leite Integral com adição de 0,3% de
Melamina (adulterante com NNP utilizado em possíveis fraudes) e sem adição de água.
Na amostra adulterada, a leitura pelo método oficial Kjeldahl (4,41% ± 0,6) indicou um
acréscimo de 36% na leitura do % de proteínas (de 3,25% para 4,41%). A leitura pelo
Analisador SPRINT (3,15% ± 0,01) permaneceu inalterada em relação aos resultados obtidos na
Tabela 01. Isso porque o método do equipamento Sprint é específico para proteína e não
detecta o NNP da Melamina adicionada.
Tabela 01
Tabela 02
O exemplo acima mostra que, na prática, a adição de melamina (0,3%) permite ao fraudador
um ganho em volume de 36%. Isso devido à adição de água para diluição, que é feita para que
o resultado de proteína medido por kjeldalh mantenha-se próximo de 3,25% (valor esperado
para amostras de leite).
Conclusão
O Analisador SPRINT (método colorimétrico / dye-binding /
específico para proteínas) é uma ferramenta eficaz e rápida
(análise em 2 a 3 minutos) para detectar possíveis Fraudes
ao Leite.
*Engª Aline Cristina Nabuco
[email protected] / 11-2126-2886