Análise do Sistema Automatizado para Coloração de Gram

Artigo
Análise do Sistema Automatizado para Coloração de Gram
Desenvolvido pela Hemogram
Márcia Aparecida Pozo Pereira, Flavia Silva Palomo
Revisão e Aprovação: Eliete Aguiar de Miranda Frigatto, Antonia Maria Oliveira Machado
Universidade Federal de São Paulo – Unifesp
Resumo
Análise do sistema automatizado para coloração de
Gram desenvolvido pela Hemogram
A coloração de Gram é um dos mais importantes métodos de
coloração utilizados em laboratórios de microbiologia, sendo quase
sempre o primeiro passo para a caracterização de amostras das
bactérias. A automação deste sistema tem como objetivo a otimização do processo utilizando reagentes suficientes para corar o
esfregaço de cada lâmina, sem desperdício, e sem contaminação
ambiental, proporcionando melhores condições de segurança,
reduzindo o esforço ou a interferência humana. Sua autonomia é
de 60 lâminas por hora. Foi realizado o preparo de lâminas em
duplicatas (300 amostras) contendo cepas ATCC e diversos tipos de
amostras biológicas, com e sem flora bacteriana. As lâminas foram
submetidas à coloração pelo método automatizado SlideInk Gram
- Hemogram e pelo método manual de coloração de Gram, sendo
este usado como técnica padrão para a correlação das lâminas.
As lâminas foram analisadas por dois técnicos, considerando flora
bacteriana, formação de precipitado, tempo e gasto de reagentes.
Os resultados foram comparados. Houve concordância em 100%
das amostras contendo bacilos Gram negativos, cocobacilos Gram
negativos, cocos Gram positivos agrupados e leveduras; 90% dos
bacilos Gram positivos; 68% dos cocos Gram positivos aos pares
e em cadeia. A técnica automatizada mostrou melhores resultados,
menos formação de precipitado nas lâminas, menor gasto de reagentes e otimização do tempo. A técnica de Gram deve ser muito
bem avaliada e executada, dada sua importância clínica uma vez
que muitas das bactérias associadas a infecções são prontamente
observadas e caracterizadas como Gram positivas ou Gram negativas, pois esta informação permite ao clínico iniciar o tratamento
empírico mais adequado e precoce e monitorar a infecção até que
dados de cultura estejam disponíveis. A automação desta técnica
trará também para o laboratório de microbiologia padronização,
precisão e menor emissão de resíduos.
Palavras-chave: Gram positivo, Gram negativo, bactérias,
coloração de Gram
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Summary
Analyses of automated method for Gram stain
developed by Hemogram
The Gram stain is one o the most important staining methods
used in microbiology laboratories, being almost always the first
step for the characterization o samples of bacteria. The automation of this system aims to optimize the process using sufficient
reagents to stain each glass microscope slide, with no waste
and no environmental contamination, providing better security
and reducing the effort or human interference. Their autonomy
is 60 slides per hour. Duplicated slides were prepared of 300
samples, containing various types of biological samples, with
and without bacterial flora, and ATCC strains. The microscope
slides were stained using the automated method SlideInk Gram
- Hemogram and the manual method of Gram stain. The manual
method was used as a standard technique for the correlation
of the results. The slides were analyzed by two technicians,
considering bacterial flora, precipitate, time and expense of
reagents. The results were compared. There was agreement on
of the samples containing 100% Gram Negative Bacilli, Coccobacilli Gram Negative, Gram Positive Cocci Grouped and
Yeasts, 90% of Gram Positive Bacilli, 68% Gram Positive Cocci
in Pairs and Chain. The automated technique showed the best
results for the formation of precipitate on the slides, lower cost
of reagents and optimization time. Gram’s technique must be
carefully evaluated and implemented, given its clinical importance, since many of the bacteria associated with infections are
readily observed and characterized as Gram-positive or gram
negative bacteria. This information allows the clinician to start
empirical treatment and monitor the infection until the culture
results become available. The automation of this technique will
also bring to the microbiology laboratory standardization, accuracy and lower emissions of waste.
Keywords: Gram Stain, Gram Negative, Gram Positive,
bacterial
NewsLab - edição 102 - 2010