Coloração diferencial de Gram - Banco Internacional de Objetos

Coloração diferencial de Gram
Objectivos
Execução da técnica de coloração diferencial de Gram. Nesta técnica de coloração são usadas quatro soluções:
dois corantes, um mordente e um descorante.
Informação
É a coloração mais utilizada em bacteriologia. É uma coloração diferencial porque permite colocar as bactérias
em dois grupos: bactérias Gram positivo e bactérias Gram negativo. O comportamento diferente das bactérias
para reter o corante é, provavelmente devido a diferenças nas camadas superficiais da parede. Regra geral,
os microorganismos Gram (+) reagem de modo diferente dos Gram (-) contra muitos agentes físicos e
químicos.
Material
Cultura microbiana
Álcool
Lâminas e lamelas
Microscópio
Solução de cristal de violeta
Lugol
Solução de safranina
Ansa
Óleo de imersão
Caneta de acetato
Bico de Bunsen ou lamparina de álcool
Papel de limpeza
Tina de vidro
Procedimento experimental
1- Limpar a bancada com álcool e ligar o bico de bunsen.
2- Esterilizar a ansa à chama e tirar uma gota de cultura.
3- Fazer um esfregaço.
4- Cobrir a preparação com cristal de violeta e deixar actuar durante 1min.
5- Rejeitar o corante e lavar com lugol. Deixar actuar durante 1 min.
6- Descorar com álcool ou acetona iodada.
7- Lavar com água.
8- Cobrir o esfregaço com solução de safranina e deixar actuar durante 1 min.
9- Lavar com água.
10- Secar entre dois papeis de filtro.
11- Observar na lente de imersão.
Última Actualização: 2004/07/09