19/09/2013 1 BACTÉRIAS FITOPATOGÊNICAS prática
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19/09/2013 Bactérias fitopatogênicas Sintomas Teste de exsudação (corrida bacteriana) Reação de hiperssensibilidade BACTÉRIAS FITOPATOGÊNICAS prática Margarete Camargo UNESP-FCAV 2013 Meios de cultura Nutriente-ágar - morfologia e coloração de colônia Meio King B – fluorescência (algumas Pseudomonas) Meio com amido – hidrólise Métodos de coloração Técnicas biomoleculares MEIOS DE CULTURA HIDRÓLISE DE AMIDO Bactérias de corais das profundezas do Oceano Atlântico, cultivadas em nutriente -ágar (Photo credit: Christina Kellogg, USGS). Nutriente-ágar King - B MÉTODOS DE COLORAÇÃO - Exame microscópico das bactérias COLORAÇÃO DE GRAM corantes Christian Gram Gram positivas Gram negativas - Métodos de coloração: Cristal violeta + lugol + álcool + safranina 1. Indiretos ou negativos 3.bp.blogspot.com/.../s320/bacteria.jpg 2. Diretos – simples diferenciais – Coloração de Gram AZUL – Gram positiva ROSA – Gram negativa Parede celular 1 19/09/2013 Exercício 2. COLORAÇÃO DE GRAM *Preparar o esfregaço de bactérias 1. CRESCIMENTO BACTERIANO EM MEIOS DE CULTURA *Fazer a coloração de Gram *Observar ao microscópio ótico usando o óleo de imersão (objetiva 100X) Nutriente-ágar (NA) King-B (KB) – fluorescência Batata-dextrose-ágar (BDA) Completar o Quadro Bactérias: Bacillus Clavibacter Pseudomonas Xanthomonas Bactérias: Bacillus Clavibacter Pseudomonas Xanthomonas 3. MÉTODO DE RYU PARA REAÇÃO DE GRAM Bactérias gram-negativas formam um muco quando misturadas com KOH a 3% 2
