Caracterização do perfil antigênico do vírus da doença infecciosa

51º Congresso Brasileiro de Genética
Resumos do 51º Congresso Brasileiro de Genética • 7 a 10 de setembro de 2005
Hotel Monte Real • Águas de Lindóia • São Paulo • Brasil
www.sbg.org.br - ISBN 85-89109-05-4
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Palavras-chave: Gumboro, IBDV, Phage display
Capparelli, FE; Almeida, JF; Capaneli, AC; Cardoso, R; Freschi, APP; Gatti, RR; Prudêncio, CR; Souza, GRL; Santos, PS; Goulart, LR
Laboratório de Genética Molecular, Instituto de Genética e Bioquímica, Universidade Federal de Uberlândia
Caracterização do perfil antigênico do
vírus da doença infecciosa da Bursa
de fabrício por meio da tecnologia
de apresentação de antígenos
recombinantes em fagos
A doença de Gumboro provoca danos expressivos à produção de aves comerciais pela imunossupressão
dos animais. É causada por um vírus pertencente à família Birnaviridae, do gênero Avibirnavirus. Seu
material genético constituído de RNA codifica uma poliproteína VP2-3-4 e as proteínas VP5 e VP1.
Neste estudo, imunizações foram realizadas em galos SPF com vacinas comerciais específicas para a
doença de Gumboro. O soro dos animais foi purificado em coluna HiTrap para purificação de IgY e
concentrado por diálise. As IgY purificadas foram utilizadas na realização dos ciclos de seleção contra
bibliotecas de fagos com peptídeos randômicos, linear (PhD-12, 12 resíduos) e conformacional (PhD-7C,
sete resíduos). As colônias do quarto ciclo de seleção foram amplificadas em placas Deepwell, e os fagos
submetidos a testes ELISA. Clones imunorreativos para IBDV foram seqüenciados e submetidos à
análises de bioinformática utilizando como parâmetro o genoma da cepa vvIBDV européia UK661.
Foram descritos 8 clones distintos entre si. Entre eles destacaram-se dois motivos de relevância
QXXXF e FXS. Esses motivos se repetiram em regiões mapeadas da poliproteína VP2-3-4 e também
da proteína VP1. Na poliproteína, um motivo QQ (Gln) corresponde a um mesmo motivo que confere
alta antigenicidade à Staphylococcus aureus. O presente estudo não obteve seqüências de epítopos
conformacionais (com sete resíduos) de IBDV. Os peptídeos isolados apresentaram homologias com a
região hipervariável da VP2, com uma região correspondente a um sitio de clivagem entre VP3-VP4,
com uma região do domínio de auto-interação da VP5, com a região da VP1, Lys13Thr, que pode ser
responsável pela atenuação na virulência de cepas IBDV e com uma outra mutação na proteína VP2
(S330R), que também pode estar relacionada com avirulência. Os motivos protéicos virais identificados
e confirmados com o isolamento de peptídeos altamente imunogênicos pela técnica de phage display
podem servir como antígenos tanto para na produção de novas vacinas como para o diagnóstico da
Doença Infecciosa da Bursa de Fabrício.
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