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50º Congresso Brasileiro de Genética
Resumos do 50º Congresso Brasileiro de Genética • 7 a 10 de setembro de 2004
Costão do Santinho • Florianópolis • Santa Catarina • Brasil
www.sbg.org.br - ISBN 85-89109-04-6
[email protected]
Palavras-chave: Phage display, Neuwiedase, toxina, Imunidade Cruzada
Cardoso, R; Prudêncio, CR; Souza, GLR; Goulart, LR; Hamaguchi A; Homsi Brandeburgo MI
Instituto de Genética e Bioquímica, Laboratório de Química de Proteínas e Produtos Naturais, Laboratório de Genética Molecular,
Universidade Federal de Uberlândia.
Isolamento e caracterização
de peptídeos sintéticos em phage
display pela interação com anticorpos
policlonais anti-neuwiedase da peçonha
de Bothrops neuwiedi pauloensis
Neuwiedase (Neu) é uma metaloproteinase fracamente hemorrágica componente da peçonha de Bothrops neuwiedi
pauloensis (jararaca pintada). No presente trabalho, utilizou-se um soro de anticorpos policlonais contra Neu,
capazes de neutralizar os efeitos hemorrágicos da peçonha bruta de Bothrops neuwiedi pauloensis. Estes anticorpos
foram utilizados para selecionar peptídeos imunorreativos de uma biblioteca de peptídeos sintéticos com 12
aminoácidos, expressos na superfície do capsídeo viral de bacteriófagos (“Phage display”). O processo consiste
basicamente em vários ciclos de seleção (“Biopanning”). Após três ciclos de “Biopanning” foram obtidos 86
clones de fagos, destes 53 foram seqüenciados, resultando em 48 seqüências peptídicas diferentes. No total,
35 destas seqüências apresentaram imunorreatividade positiva através do ensaio de “Colony Blotting”, onde
foram utilizados os anticorpos policlonais anti-Neuwiedase. Provavelmente, não foi possível determinar todos
os epítopos da toxina, porém, o sitio 40NTVNGFFRSMN51 da Neu foi o local onde houve o maior número
de alinhamentos, indicando este sítio como um provável epítopo. Os motivos NLGM e KYN presentes na
Neu e nos clones Bn13 e Bn22, respectivamente, ocorrem também nas metaloproteinases não hemorrágicas
LHF-II, fibrolase e lebetase da peçonha da serpente Lachesis muta muta e ACLPREF de Agkistrodon contortrix
laticinctus, Adamalysina-II de Crotalus adamanteus, Atroxase, Atrolysina-C e Ht-b de C. atrox. Estes motivos
também estão presentes nas metaloproteinases hemorrágicas BOJUMET I, BOJUMET II e BOJUMET III
de Bothrops jararacuçu, além da toxina ativadora de protrombina Berythractivase de Bothrops erythromelas. A
toxina Bap 1 de Bothrops asper possui os motivos TKYN e NXXFRS comuns com a Neu e os peptídeos Bn
22 e Bn 13 respectivamente. Estes peptídeos selecionados podem apresentar um potencial uso na produção
de soro antiofídico ou até mesmo como antígenos vacinais.
Apoio financeiro: FAPEMIG – UFU – CNPq – CAPES
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