Disciplina de Bioquímica ( DB-105 ) Aula Teórica 12/04/2002 Tópico 7 - Enzimologia I -Enzimas: a) Conceito b) Poder Catalítico; c) Especificidade; d) Classificação; e) Catalisadores Biológicos II - Cinética Enzimática: a) Concentração da Enzima b) Concentração do Substrato c) Km d) pH e) Temperatura f) Quantificação g) Especificidade III - Inibição Enzimática: a) Reversível - Competitiva - Não Competitiva - Incompetitiva b) Irreversível c) Aplicação IV - Regulação da Atividade Enzimática: a) Zimogênio b) Modificação Covalente c) Inibição pelo Produto Final d) Interação Alostérica e) Subunidade Modificadora V - Composição: a) Haloenzima b) Apoenzima: cofatores e coenzimas ( grupamento prostético ) VI - Poder Catalítico: A reação é acelerada da ordem de milhões de vezes. VII - Especificidade: a) Absoluta b) Alta, média e baixa VIII - Classificação: a) Oxidoredutases b) Transferases c) Hidrolases d) Liases e) Isomerases f) Ligases XIX - Como as enzimas trabalham ? a) Sítio ativo: catalítico e de posicionamento b) Diminuição da energia de ativação/ Equilíbrio da reação c) Energia de Ligação -1- X - Cinética Enzimática: a) v 0 b) Vmáx (S) K m (S ) K 1 1 1 m v0 v máx v máx (S) c) Km d) pH “ótimo” e) temperatura “ótima” f) Estereoespecificidade XI - Inibição Enzimática: a) Competitiva b) Não-Competitiva c) Incompetitiva d) Irreversível e) Aplicação XII - Regulação da Atividade Enzimática XIII - Enzimas Regulatórias ( “ Marca-Passo ” ) XIV - Mecanismo de Ação da Quimiotripsina: “ Ballet Químico ” a) Entrada do substrato no sítio ativo b) Encaixe do radical aromático no sítio de posicionamento e de ligação peptídica no sítio catalítico c) Ataque nucleofílico do radical R da Ser195 da carbonila com cooperação dos grupos R dos a.a. His57 e Asp102 d) Rearranjo eletrônico com quebra da ligação peptídica e) Saída de parte do substrato do sítio ativo permanecendo a outra parte ligada covalentemente à Ser195 f) Ataque nucleofílico da água na carbonila g) Rearranjo eletrônico com hidrólise da ligação entre enzima-substrato h) Saída da outra parte do substrato do sítio ativo da enzima i) Regeneração da enzima e transformação do substrato em P. -2-