AHAI aspectos sorológicos_Maria do Carmo Valgueiro

ANEMIAS HEMOLÍTICAS
AUTO-IMUNES
ASPECTOS SOROLÓGICOS
Maria do Carmo Valgueiro Costa de Oliveira
FUNDAÇÃO HEMOPE
Resultado da produção
de anticorpos contra
constituintes do próprio
organismo.
- Quente
- Frio
- Induzida por drogas
Parâmetros
BIOQUÍMICOS
Parâmetros
CITOLÓGICOS
Parâmetro
IMUNOHEMATOLÓGICO
INTERPRETAÇÃO
dos parâmetros
laboratoriais
↑ Reticulócitos,
bilirrubina, DHL
↓ Haptoglobina,
reticulócitos
Teste direto da
antiglobulina humana:
98%
Teste Direto da Antiglobulina
POSITIVO não significa
necessariamente
que o paciente apresenta
hemólise
(TDA)
TDA positivo:
Auto-anticorpos contra antígenos
intrínsecos das hemácias
Aloanticorpos fixados
às hemácias
Proteínas ou drogas
adsorvidas às hemácias
Anticorpos contra
drogas ou produzidos
pelos linfócitos
transplantados
Patologias
Indivíduos sadios
Outras drogas
Metildopa
IgG
IgG + C3
QUENTE
FRIO
IgM
IgM + C3
Caso 1
Anti-A
0
Anti-B Anti-A,B Anti-D Cont. Rh
0
00
++++
0
Hem. A Hem. B Hem. O
++++ ++++
0
2 a 4%
dos pacientes AHAI
Quantidade insuficiente de moléculas
de autoanticorpo fixadas às hemácias
AHAI por anticorpos IgA
Baixa afinidade do anticorpo IgG
TDA
0
Caso 2
Anti-A
Anti-B
Anti-A,B
Anti-D
Cont. Rh
++++
++++
++++
++++
++++
Hem. A Hem. B Hem. O
++++
++++
++++
INTERFERÊNCIA DE AGLUTININAS FRIAS
COM PROVÁVEL ATUAÇÃO DO COMPLEMENTO
DIAGNÓSTICO
AHAI por anticorpos frios
Discrepância ABO
Controle Rh positivo
Teste direto da
antiglobulina positivo
Caso 2
Anti-A
Anti-B
Anti-A,B
Anti-D
Cont. Rh
Hem. A
Hem. B
Hem. O
++++
++++
++++
++++
++++
++++
++++
++++
Caso 3
Caso 3.1
Anti-A
Anti-B Anti-A,B Anti-D Cont. Rh
++++
0
++++ ++++
++++
Hem. A Hem. B Hem. O
0
++++
0
PAI
0
Caso 3.2
Anti-A
++++
Anti-B Anti-A,B Anti-D Cont. Rh
0
++++ ++++
++++
Hem. A Hem. B Hem. O
PAI
++++ ++++ ++++
+++
PRESENÇA DE ANTICORPOS IgG FIXADOS ÀS HEMÁCIAS,
COM OU SEM INTERFERÊNCIA DO COMPLEMENTO
DIAGNÓSTICO
AHAI por
anticorpos
quentes
Controle Rh positivo
Teste direto da
antiglobulina positivo
Caso 3.1
Anti-A
Anti-B
Anti-A,B
Anti-D
Cont. Rh
Hem. A
Hem. B
Hem. O
PAI
++++
0
++++
++++
++++
0
++++
0
+++
Anti-A
Anti-B
Anti-A,B
Anti-D
Cont. Rh
Hem. A
Hem. B
Hem. O
PAI
++++
0
++++
++++
++++
++++
++++
+++
Caso 3.2
++++
aloanticorpo
+ autoanticorpo
TDA (−
−)
Eluir à
37ºC
TDA (+
+)
Classificação
do autoanticorpo
Dispersão DTT
Caso 2
Anti-A
Anti-B
Anti-A,B
Anti-D
Cont. Rh
++++
++++
++++
++++
++++
Hem. A
++++
Hem. B
Hem. O
++++
++++
Adsorver auto-aglutininas frias do soro
com hemácias autólogas não tratadas
ou tratadas com ZZAP
Pesquisar e identificar o
aloanticorpo
no soro absorvido
Caso 2
Anti-A
Anti-B
Anti-A,B
Anti-D
Cont. Rh
Hem. A
Hem.B
Hem. O
++++
++++
++++
++++
++++
++++
++++
++++
TDA ( 0 )
Dispersar
aglutininas
com salina
a TA
Classificar o autoanticorpo
em tubo ou gel
Retipar com anti-D salino
ou monoclonal
TDA ( + )
Dissociar os autoanticorpos
quentes pela cloroquina
Eluir: alo ou auto-anticorpos?
Caso 3.1
Anti-A
Anti-B
Anti-A,B
Anti-D
Cont. Rh
Hem. A
Hem. B
Hem. O
PAI
++++
0
++++
++++
++++
0
++++
0
0
Anti-A
Anti-B
Anti-A,B
Anti-D
Cont. Rh
Hem. A
Hem. B
Hem. O
PAI
++++
0
++++
++++
++++
++++
++++
++++
+++
Caso 3.2
DISSOCIAÇÃO
Vantagens
Cloroquina
Dissocia anticorpos IgG
Fenotipagem
Glicina ácida
EDTA
Adsorção
Tratamento das hemácias
Remove antígenos Bg
DISSOCIAÇÃO
Não dissocia complemento
Cloroquina
Pode desnaturar antígenos Rh
Pode não remover totalmente o anticorpo
Fenotipagem com reagentes proteicos
Desvantagens
Destruição dos antígenos do sistema Kell
Glicina ácida
EDTA
Uso exclusivo: AGH IgG
Danos irreversíveis à membrana,
se exceder o tempo de incubação
Adsorver autoanticorpos quentes
→ hemácias autólogas ou homólogas
→ enzimas, ZZAP, PEG
Diluir soro 1/2 ou 1/5
0
0 identificação
→
de aloanticorpos
Caso 3.1
Anti-A
Anti-B
Anti-A,B
Anti-D
Cont. Rh
Hem. A
Hem. B
Hem. O
PAI
++++
0
++++
++++
++++
0
+++
0
0
Anti-A
Anti-B
Anti-A,B
Anti-D
Cont. Rh
Hem. A
Hem.B
Hem. O
PAI
++++
0
++++
++++
++++
++++
+++
++++
+++
Caso 3.2
Técnica do pré-aquecimento
Anemia hemolítica a frio
Uso de AGH IgG
Autoadsorção a frio
autocontrole (+)
sem história de
transfusão recente
Adsorção autóloga a
quente (ZZAP ou PEG)
Adsorção homóloga
(ZZAP ou PEG)
Diluição do soro
Anemia hemolítica a quente
Anemia hemolítica a quente
autocontrole (+)
com história de
transfusão recente
Eluição
Adsorção autóloga a quente
(ZZAP ou PEG)
Adsorção homóloga (ZZAP ou PEG):
remoção somente de auto-anticorpos
ELUIÇÃO
Fenotipagem
Tratamento enzimas
Adsorção
Adsorção
Investigação DHRN-ABO
Pequenos volumes
de hemácias
Fenotipagem (exceto
antígenos desnaturados)
ÁCIDO CÍTRICO
ÁCIDO A FRIO
(Glicina HCL)
Enfraquecimento
dos antígenos do
Sistema Kell
Menos sensível para
alo/auto-anticorpos
quentes
CALOR 56ºC
Pobre para reconhecer
outros alo/autoanticorpos
LUI
Pobre para reconhecer
outros alo/autoanticorpos
ZZAP
Desnatura antígenos
M, N, S, Fya, Fyb, K, s
IDENTIFICAÇÃO DE AUTO-ANTICORPOS NO
ELUATO
ESPECIFICIDADE
Anticorpos IgG
Rh, anti-Lw, -U, -K,
-Kpa, -Jsa, -Ge
Anticorpos IgG
(metildopa)
Rh
Negativo
anti-drogas
ADSORÇÃO
VANTAGEM
DESVANTAGENS
Eliminação
da interferência
dos autoanticorpos
Paciente
recentemente
transfundido
ZZAP
PEG
SORO ADSORVIDO
Teste: hemácias
triagem I e II
Negativo:
anticorpo adsorvido
Adsorção de
aloanticorpos
clinicamente
significantes
Positivo:
novas adsorções
DILUIÇÃO
VANTAGEM
Praticidade
DESVANTAGENS
Leger e Garratty
22% autoanticorpos não reativos
27% aloanticorpos significantes
não identificados
ZZAP
Desnatura os antígenos
dos sistemas MNS, Duffy, Kell
R1R1
Jk(a- b+)
Fy (a+ b-)
S+ s-
1/1.400
doadores
R1R1
Jk(a- b+)
1/33
doadores
PEG
Genotipagem
do paciente
Tempo
Custo
Realce de
anticorpos fracos
Fenotipagem
do paciente
DILUIÇÃO
Obrigada