AHAI aspectos sorológicos_Maria do Carmo Valgueiro
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ANEMIAS HEMOLÍTICAS AUTO-IMUNES ASPECTOS SOROLÓGICOS Maria do Carmo Valgueiro Costa de Oliveira FUNDAÇÃO HEMOPE Resultado da produção de anticorpos contra constituintes do próprio organismo. - Quente - Frio - Induzida por drogas Parâmetros BIOQUÍMICOS Parâmetros CITOLÓGICOS Parâmetro IMUNOHEMATOLÓGICO INTERPRETAÇÃO dos parâmetros laboratoriais ↑ Reticulócitos, bilirrubina, DHL ↓ Haptoglobina, reticulócitos Teste direto da antiglobulina humana: 98% Teste Direto da Antiglobulina POSITIVO não significa necessariamente que o paciente apresenta hemólise (TDA) TDA positivo: Auto-anticorpos contra antígenos intrínsecos das hemácias Aloanticorpos fixados às hemácias Proteínas ou drogas adsorvidas às hemácias Anticorpos contra drogas ou produzidos pelos linfócitos transplantados Patologias Indivíduos sadios Outras drogas Metildopa IgG IgG + C3 QUENTE FRIO IgM IgM + C3 Caso 1 Anti-A 0 Anti-B Anti-A,B Anti-D Cont. Rh 0 00 ++++ 0 Hem. A Hem. B Hem. O ++++ ++++ 0 2 a 4% dos pacientes AHAI Quantidade insuficiente de moléculas de autoanticorpo fixadas às hemácias AHAI por anticorpos IgA Baixa afinidade do anticorpo IgG TDA 0 Caso 2 Anti-A Anti-B Anti-A,B Anti-D Cont. Rh ++++ ++++ ++++ ++++ ++++ Hem. A Hem. B Hem. O ++++ ++++ ++++ INTERFERÊNCIA DE AGLUTININAS FRIAS COM PROVÁVEL ATUAÇÃO DO COMPLEMENTO DIAGNÓSTICO AHAI por anticorpos frios Discrepância ABO Controle Rh positivo Teste direto da antiglobulina positivo Caso 2 Anti-A Anti-B Anti-A,B Anti-D Cont. Rh Hem. A Hem. B Hem. O ++++ ++++ ++++ ++++ ++++ ++++ ++++ ++++ Caso 3 Caso 3.1 Anti-A Anti-B Anti-A,B Anti-D Cont. Rh ++++ 0 ++++ ++++ ++++ Hem. A Hem. B Hem. O 0 ++++ 0 PAI 0 Caso 3.2 Anti-A ++++ Anti-B Anti-A,B Anti-D Cont. Rh 0 ++++ ++++ ++++ Hem. A Hem. B Hem. O PAI ++++ ++++ ++++ +++ PRESENÇA DE ANTICORPOS IgG FIXADOS ÀS HEMÁCIAS, COM OU SEM INTERFERÊNCIA DO COMPLEMENTO DIAGNÓSTICO AHAI por anticorpos quentes Controle Rh positivo Teste direto da antiglobulina positivo Caso 3.1 Anti-A Anti-B Anti-A,B Anti-D Cont. Rh Hem. A Hem. B Hem. O PAI ++++ 0 ++++ ++++ ++++ 0 ++++ 0 +++ Anti-A Anti-B Anti-A,B Anti-D Cont. Rh Hem. A Hem. B Hem. O PAI ++++ 0 ++++ ++++ ++++ ++++ ++++ +++ Caso 3.2 ++++ aloanticorpo + autoanticorpo TDA (− −) Eluir à 37ºC TDA (+ +) Classificação do autoanticorpo Dispersão DTT Caso 2 Anti-A Anti-B Anti-A,B Anti-D Cont. Rh ++++ ++++ ++++ ++++ ++++ Hem. A ++++ Hem. B Hem. O ++++ ++++ Adsorver auto-aglutininas frias do soro com hemácias autólogas não tratadas ou tratadas com ZZAP Pesquisar e identificar o aloanticorpo no soro absorvido Caso 2 Anti-A Anti-B Anti-A,B Anti-D Cont. Rh Hem. A Hem.B Hem. O ++++ ++++ ++++ ++++ ++++ ++++ ++++ ++++ TDA ( 0 ) Dispersar aglutininas com salina a TA Classificar o autoanticorpo em tubo ou gel Retipar com anti-D salino ou monoclonal TDA ( + ) Dissociar os autoanticorpos quentes pela cloroquina Eluir: alo ou auto-anticorpos? Caso 3.1 Anti-A Anti-B Anti-A,B Anti-D Cont. Rh Hem. A Hem. B Hem. O PAI ++++ 0 ++++ ++++ ++++ 0 ++++ 0 0 Anti-A Anti-B Anti-A,B Anti-D Cont. Rh Hem. A Hem. B Hem. O PAI ++++ 0 ++++ ++++ ++++ ++++ ++++ ++++ +++ Caso 3.2 DISSOCIAÇÃO Vantagens Cloroquina Dissocia anticorpos IgG Fenotipagem Glicina ácida EDTA Adsorção Tratamento das hemácias Remove antígenos Bg DISSOCIAÇÃO Não dissocia complemento Cloroquina Pode desnaturar antígenos Rh Pode não remover totalmente o anticorpo Fenotipagem com reagentes proteicos Desvantagens Destruição dos antígenos do sistema Kell Glicina ácida EDTA Uso exclusivo: AGH IgG Danos irreversíveis à membrana, se exceder o tempo de incubação Adsorver autoanticorpos quentes → hemácias autólogas ou homólogas → enzimas, ZZAP, PEG Diluir soro 1/2 ou 1/5 0 0 identificação → de aloanticorpos Caso 3.1 Anti-A Anti-B Anti-A,B Anti-D Cont. Rh Hem. A Hem. B Hem. O PAI ++++ 0 ++++ ++++ ++++ 0 +++ 0 0 Anti-A Anti-B Anti-A,B Anti-D Cont. Rh Hem. A Hem.B Hem. O PAI ++++ 0 ++++ ++++ ++++ ++++ +++ ++++ +++ Caso 3.2 Técnica do pré-aquecimento Anemia hemolítica a frio Uso de AGH IgG Autoadsorção a frio autocontrole (+) sem história de transfusão recente Adsorção autóloga a quente (ZZAP ou PEG) Adsorção homóloga (ZZAP ou PEG) Diluição do soro Anemia hemolítica a quente Anemia hemolítica a quente autocontrole (+) com história de transfusão recente Eluição Adsorção autóloga a quente (ZZAP ou PEG) Adsorção homóloga (ZZAP ou PEG): remoção somente de auto-anticorpos ELUIÇÃO Fenotipagem Tratamento enzimas Adsorção Adsorção Investigação DHRN-ABO Pequenos volumes de hemácias Fenotipagem (exceto antígenos desnaturados) ÁCIDO CÍTRICO ÁCIDO A FRIO (Glicina HCL) Enfraquecimento dos antígenos do Sistema Kell Menos sensível para alo/auto-anticorpos quentes CALOR 56ºC Pobre para reconhecer outros alo/autoanticorpos LUI Pobre para reconhecer outros alo/autoanticorpos ZZAP Desnatura antígenos M, N, S, Fya, Fyb, K, s IDENTIFICAÇÃO DE AUTO-ANTICORPOS NO ELUATO ESPECIFICIDADE Anticorpos IgG Rh, anti-Lw, -U, -K, -Kpa, -Jsa, -Ge Anticorpos IgG (metildopa) Rh Negativo anti-drogas ADSORÇÃO VANTAGEM DESVANTAGENS Eliminação da interferência dos autoanticorpos Paciente recentemente transfundido ZZAP PEG SORO ADSORVIDO Teste: hemácias triagem I e II Negativo: anticorpo adsorvido Adsorção de aloanticorpos clinicamente significantes Positivo: novas adsorções DILUIÇÃO VANTAGEM Praticidade DESVANTAGENS Leger e Garratty 22% autoanticorpos não reativos 27% aloanticorpos significantes não identificados ZZAP Desnatura os antígenos dos sistemas MNS, Duffy, Kell R1R1 Jk(a- b+) Fy (a+ b-) S+ s- 1/1.400 doadores R1R1 Jk(a- b+) 1/33 doadores PEG Genotipagem do paciente Tempo Custo Realce de anticorpos fracos Fenotipagem do paciente DILUIÇÃO Obrigada
