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50º Congresso Brasileiro de Genética
Resumos do 50º Congresso Brasileiro de Genética • 7 a 10 de setembro de 2004
Costão do Santinho • Florianópolis • Santa Catarina • Brasil
www.sbg.org.br - ISBN 85-89109-04-6
[email protected]
Palavras-Chave: DUF903, lipoproteína, mobilização
Bataus, LAM; Dourado, PL; Santos, LC; Lima, FC; Bandeira, LF; Coelho, ASG
Departamento de Ciências Fisiológicas, Universidade Federal de Goiás, Goiás.
Caracterização molecular
de um plasmídeo críptico
O objetivo deste trabalho foi caracterizar um plasmídeo extraído de uma bactéria endofítica isolada de Solanum
lycocarpum (Lobeira). A primeira etapa de caracterização foi obter um marcador de seleção que permitisse a
manipulação do plasmídeo em células de Escherichia coli. O gene de resistência à kanamicina, do plasmídeo
pUC4K, foi subclonado no único sítio Pst1 do plasmídeo, resultando no plasmídeo pLK39. O plasmídeo pLK39
apresenta aproximadamente 5,6 Kb, sendo 1,1 kb do gene de resistência à kanamicina e 4,5 kb do plasmídeo
críptico. Aproximadamente 3,6 kb do pLK39 já foram seqüenciados, analisados, resultando na obtenção de
dois contigs. O contig maior apresenta 2992 pb e o menor 610 pb. O Contig maior apresenta homologia
com os plasmídeos pSW200, pSW100, pK, pEC3, pUCD500 e pBERT. Esses plasmídeos foram extraídos
de bactérias Gram-negativas e apresentam como principal característica uma grande região de mobilização
contendo as proteínas MobA, MobB, MobC e MobD. Os genes que codificam essas proteínas estão justapostos.
Sendo que o gene mobA se sobrepõem aos genes mobB e mobC. No contig maior ainda são encontradas mais
3 possíveis proteínas. A ORF 5 codifica uma proteína de 143 aminoácidos, a qual apresenta homologia com
ORF IX de Salmonella enterica Berta. A ORF 6 codifica uma proteína com 140 aminoácidos, apresentando
homologia com a ORF VII de Salmonella enterica Berta, enquanto a ORF 7 codifica uma proteína 118 resíduos
de aminoácidos e não apresentou homologia com nenhuma proteína. Novos primers foram desenhados para
se obter a seqüência de nucleotídeos completa do pLK39. O contig menor apresenta homologia com uma
região do plasmídeo ColE1-like, isolado Enterobacter agglomerans. Nesse contig foi encontrada uma ORF com
77 resíduos de aminoácidos, que apresenta homologia com a família DUF903. Essa família de proteínas para
ser bastante conservada em procariotos, mas sua função ainda não é conhecida, mas elas são classificadas como
possíveis lipoproteínas.
Apoio: CNPq e FUNAPE - UFG
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