figuras da tese

DO 595 nm
1.50
1.25
1.00
0.75
LP
S
+
-L
PS
0.50
Tratamento
Figura 7. Determinação da viabilidade celular, por ensaio de MTT, do cultivo
de células dendríticas estimulados, ou não, com lipopolissacarídeo (LPS).
% de Fagocitose
100
75
50
25
o
37
37
o
C
Es
t
C
Sk
0o
C
60 o
C
N
eg
at
iv
o
0
Tratamentos
Figura 9. Taxa de fagocitose das esferas – FITC por células dendríticas
cultivadas em diferentes tratamentos.
Est – Estufa; Sk – Agitação.
CD normais
DsDIIred
PCDna 3.1/RHO
DO 595 nm
1.0
0.5
h
72
h
48
h
24
0
h
0.0
Tempo de cultivo
Figura 11. Determinação da viabilidade celular, por ensaio de MTT, de células
dendríticas transfectadas com DsDIIred ou pcDNA3.1/RHOct em diferentes
tempos de cultivo.
DO 595 nm
1.0
normal
effectene 1:25
effectene 1:12,5
effectene 1:10
0.5
0.0
24h de cultivo
Figura 12. Determinação da viabilidade celular, por ensaio de MTT, de células
dendríticas transfectadas com DsDIIred em diferentes concentrações do
reagente de transfecção effectene.
1
2
3
4
5
6
Figura 3. Clonagem do fragmento RHOct no vetor pcDNA 3.1+.
Observamos um gel de agarose 1% corado com brometo de etídeo contendo
padrão 100 pares de base (1); fragmento RHOct (2) purificado da digestão de
PCR2.1/RHOct com BamHI; plasmídeo pcDNA 3.1+ (3) digerido com BamHI;
produtos da amplificação por PCR do plasmídeo pcDNA 3.1/RHOct usando os
primers RHOctF e RHOctR (4), RHOctF e BGHR (5); produtos da digestão com
BamHI do plasmídeo pcDNA 3.1+/RHOct.
1
2
3
4
5
6
7
Figura 2. Clonagem do fragmento RHOct no vetor PCR2.1 topo.
Evidencia-se um gel de agarose 1% corado com brometo de etídeo;
Observamos o padrão de 100 pares de base (1), reações de PCR realizadas
com os plasmídeos pBlueScript/SmAST03 (2) e PCR2.1/RHOct (3-6) usando
os primers RHOctF e RHOctR (2 e 3), M13R e M13U (4), RHOctF e M13U (5),
RHOctR e M13R (6) e os produtos da digestão do plasmídeo PCR2.1/RHOct
com a enzima de restrição BamHI (7).
A
B
C
Figura 8. Fagocitose apresentada por células
dendríticas cultivadas na
presença de esferas de látex conjugadas a isotiocianato de fluoresceína
(FITC).
Observa-se, em microscopia de confocal, (A) Célula dendrítica
em luz
transmitida no aumento de ........ X. (B) Fluorescência das esferas – FITC em
consequência da incidência do laser a ........ nm. (C) Imagem sobreposta de A
e B, a fluorescência das esferas – FITC coincide com a região citoplasmática
da célula dendrítica.
A
B
C
Figura 10. Célula dendrítica cultivada após transfecção com plasmídeo
DsDIIred.
Observa-se, em microscopia de confocal, uma célula dendrítica (A) em luz
transmitida no aumento de ......X. (B) Fluorescência emitida pela proteína RFP
em consequência da incidência do laser a ....... nm. (C) Imagem sobreposta
de A e B, a fluorescência da RFP coincide com a região citoplasmática da
célula dendrítica.