MET BEB 006_001 Método para determinação de ácido ascórbico

MAPA/SDA/CGAL
MET BEB/006/001
Lanagro-SP
Data efetiva: 05/07/13
Análises Físico-Químicas de Bebidas e Vinagres – BEB
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Método para determinação de ácido ascórbico
Responsável pela unidade
05/06/13
Aprovação: Maria de Fátima Martins Pinhel
Responsável substituta
01/04/13
Elaboração: Maria de Fátima Zanini Vieira
Maitê Megeto Costa
Analista
01/04/13
1.
Propósito
Determinação de ácido ascórbico em bebidas não alcoólicas.
2.
Escopo
Aplica-se a todos os analistas da unidade treinados neste MET e na IU do equipamento.
3.
Descrição e definições
Baseia-se na redução do 2,6-diclorofenolindofenol-sódio pelo ácido ascórbico. O 2,6diclorofenolindofenol-sódio em meio básico ou neutro é azul, em meio ácido é rosa e sua
forma reduzida é incolor. O ponto final de titulação é detectado pela viragem da solução
para cor rosa com todo o ácido ascórbico já consumido.
4.
Procedimentos
4.1
Material
4.1.1 Equipamentos
•
•
•
•
•
Balança analítica;
Agitador magnético;
Ar condicionado;
Freezer;
Geladeira.
4.1.2 Vidraria e outros materiais
•
•
•
•
•
•
Béquer de 50mL;
Pipeta volumétrica 10mL;
Bureta 10mL;
Erlenmeyer ou balão de fundo chato de 250mL;
Balão volumétrico 100mL e 1000mL;
Barra magnética.
4.1.3 Reagentes
•
•
•
•
Água destilada;
Ácido oxálico p.a.;
Ácido ascórbico p.a.;
2,6-diclorofenolindofenol-sódio p.a.
4.2
Soluções e seu preparo
•
Solução de ácido oxálico 1%
Pesar 10g de ácido oxálico p.a. e diluir em 1000mL de água destilada. Conservar a
solução em geladeira;
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•
Solução padrão de ácido ascórbico
Pesar 0,05g de ácido ascórbico p.a. e diluir em 100mL de solução de ácido oxálico a 1%.
Conservar a solução em geladeira;
•
Solução de 2,6-diclorofenolindofenol-sódio 0,2%
Pesar 0,2g de 2,6-diclorofenolindofenol-sódio p.a. e diluir em 100mL de água destilada.
Deixar agitando no agitador magnético por cerca de 10 minutos. Conservar a solução em
geladeira.
4.3
Preparo de amostras
•
•
Amostras de produtos congelados devem ser descongeladas até temperatura ambiente;
Amostras de sucos concentrados, quando necessário, devem ser diluídas conforme
recomendações do fabricante;
Para as demais bebidas não alcoólicas trabalhar diretamente com a amostra;
Todas as amostras devem estar à temperatura ambiente e ser homogeneizadas antes da
abertura do frasco.
•
•
4.4
Análise
4.4.1 Padrão
Realizar em triplicata e registrar no FORM BEB/031 – Ácido Ascórbico:
• Pipetar 10mL da solução padrão de ácido ascórbico em erlenmeyer ou balão de fundo
chato contendo 50mL de solução de ácido oxálico;
• Titular com solução de 2,6-diclorofenolindofenol-sódio até coloração rosa persistente
por 15 segundos.
4.4.2 Amostra
•
•
4.5
Pipetar ou pesar um volume conveniente de amostra e adicionar 50mL da solução de
ácido oxálico no erlenmeyer ou balão de fundo chato;
Titular com solução de 2,6-diclorofenolindofenol-sódio até coloração rosa persistente por
15 segundos.
Expressão dos resultados
O resultado será expresso em mg de ácido ascórbico por 100mL ou 100g da amostra,
pela fórmula:
Ácido ascórbico = 100 . n’
n.P
5
Onde:
n’: volume de 2,6-diclorofenolindofenol-sódio em mL gastos na titulação da amostra.
n: volume de 2,6-diclorofenolindofenol-sódio em mL gastos na padronização.
P: massa (g) ou volume (mL) da amostra usado na titulação.
n: é o volume em mL gasto para titulação em 1 mg de ácido ascórbico
5
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Nota: Solução Padrão Ácido Ascórbico
50mg-------100mL
5mg------- 10mL
Se 1mL de 2,6-diclorofenolindofenol-sódio reage com 1mg de ácido ascórbico
Para titular 5mg de ácido ascórbico é necessário 5mL de 2,6-diclorofenolindofenol
5.
Bibliografia
Instrução Normativa nº 24 de 08 de setembro de 2005. Estabelece o Manual de métodos
de
análises
de
bebidas
e
vinagres
do
MAPA.
Disponível
em:
<http//www.agricultura.gov.br/legislação-Sislegis>.
6.
Anexos
•
Não aplicável.
7.
Documentos complementares
•
FORM BEB/031 – Ácido Ascórbico.
8.
Histórico de alterações
ITEM
NA
RESUMO DAS ALTERAÇÕES
• Não aplicável.