edineli coelho

ESTUDO DA UTILIZAÇÃO DA 4-PIRIDILMETILQUITOSANA-Cu E QUITOSANA-Cu
NA SEPARAÇÃO E PURIFICAÇÃO DE PROTEÍNAS EM DIFERENTES MÉTODOS DE
ADSORÇÃO
Edineli C. COELHO e Kelly F. SANTOS
Orientador: Clóvis Antonio Rodrigues
Defesa: Novembro de 2002
Resumo
Estudo da eficiência de diferentes métodos de adsorção na separação e purificação de proteínas,
utilizando como suporte a QTS-Cu e 4PMQ-Cu, em diferentes condições de pH e força iônica.
Foram realizados experimentos em soluções de proteína modelo, albumina sérica bovina (ASB),
através do método dinâmico (MD), em seguida pesquisou-se o método dinâmico e leito suspenso
(MLS), para avaliar a utilização dos adsorventes na adsorção de proteínas modelos, ASB e
ovalbumina (OVA), e proteínas da clara do ovo. Com o objetivo de escolher o método mais
eficiente referente à capacidade de pré-concentração e eficiência na separação e purificação de
proteínas, em diferentes condições experimentais. No MD foi utilizado uma coluna de vidro com
0,5 cm diâmetro, contendo 0,2g de polímero e solução de 0,05 mg/mL de amostra, a velocidade de
fluxo foi mantido constante. No MLS, 0,2g de polímero ficou em contato com uma solução
contendo amostra de ASB e OVA padrão ou proteínas da clara, durante uma hora sob constante
agitação; esta suspensão foi transferida para uma coluna similar a anterior, com posterior eluição. A
quantidade de proteína foi determinada através do método de Brandford. Os valores encontrados, na
pré-concentração da ASB pelo MD nas diferentes condições experimentais, demonstraram que a
capacidade de adsorção para o MB é mais eficiente, em relação ao MD, tanto para QTS-Cu quanto
para 4PMQ-Cu. Já os valores da capacidade de adsorção de proteína para ASB e OVA, através do
MLS com QTS-Cu, em pH 5,0, e com 4PMQ-Cu foram maiores ao comparar com o MD e o
método de banho (MB). A capacidade de adsorção da ASB e da OVA padrão, através do MLS, foi
praticamente igual nos dois polímeros, em relação ao pH 5,0 ou 7,5. Porém, ao observar as
proteínas da clara do ovo, os valores da capacidade de adsorção foram maiores que os encontrados
para as albuminas padrões, principalmente em relação ao polímero 4PMQ-Cu, provavelmente pela
presença do espaçador.
Palavras-chave: adsorção de proteínas; QTS-Cu e 4PMQ-Cu; métodos de adsorção.
Apoio: PIBIC/CNPq