Crescimento Microbiano no Processo Fermentativo Everlon Cid Rigobelo Dorna de fermentação Dornas de fermentação Dornas em regime contínuo Fermentações Lática Acética Alcoólica Iogurte - lática Iogurte - lática Vinagre - acética Alcoólica - cerveja Alcoólica - cerveja Alcoólica - cerveja Alcoólica - vinho Alcoólica – pão Parâmetros bioquímicos Temperatura pH Tensão de O2 Água Pressão osmótica Parâmetros microbiológicos Taxa de crescimento Contagem de Células viáveis Massa de células Turbidimetria NMP Curva de Crescimento Fermentação lática Produto final o ácido láctico A partir da lactose do leite. ácido láctico pH Coagulação - desnaturação das proteínas do leite Formação do coalho usado na fabricação de iogurtes e queijos. Fermentação acética Produz o ácido acético, que causa o azedar do vinho ou dos sumos de fruta. Conseqüente transformação em vinagre. Fermentação alcóolica Produz etanol e dióxido de carbono. Etanol produtos utilizados pelo Homem. Na produção de vinho, cerveja e outras bebidas alcoólicas e do pão. Fermentação Glicose + 2ADP + 2Pi 2 etanol + 2CO2 + 2ATP + 2H2O Fermentação Respiração aeróbica 38 ATP/glicose Fementação 2 ATP/glicose+ álcool anaeróbica Enzimas São proteínas Polímeros de aminoácidos Quebram o substrato Específica – conformação induzida Proteína - tijolos Enzimas Enzima - substrato Piruvato descarboxilase Piruvato – descarboxilação Perde CO2 - C e O Formação de bolhas Tiamina pirofosfato Coenzima Mg2+ Ativa a descarboxilase Álcool desidrogenase Produzida por alguns microrganismos Fermentação alcoólica Saccharomyces cerevisae Açúcar Saccharomyces cerevisiae Saccharomyces cerevisiae Fermentação A fermentação é realizada por microrganismos. Quem são os microrganismos? Microrganismos Bactérias Fungos filamentosos Fungos filamentosos Vírus Levedura (unicelular) Levedura Efeito dos fatores ambientais O crescimento dos microrganismos é afetado pelas condições: Físicas e químicas do ambiente Influencia + ou - Temperatura do caldo A temperatura ideal para fermentação situa-se entre 28º e 30º. Temperaturas atividade do fermento. Temperatura crescimento de bactérias indesejáveis, prejudicando as leveduras. Temperatura Temperatura Temperatura Temperatura reações químicas na célula. A cada 10ºC Velocidade 2X Desnaturação – deformação da enzima Temperatura ótima Microrganismos Psicrófilos:menor que 0º C Psicrotolerantes - 20 e 40°C vivem a 0ºC Mesófilos: 20 a 40°C, T. ótimo 37°C, microrganismos vivem em animais de sangue quente. Termófilos e Hipertermófilos:45 e ≥ 80°C, Acidez do caldo pH do caldo 4,0 e 5,0 - desejável pH do caldo que varia de 5,0 a 6,0 acidez pH Crescimento microbiano Divisão celular Divisão celular Aumento da massa Taxa de crescimento Intervalo de tempo Tempo de geração – variável 1 hora 20´ Fatores genéticos, nutricionais, estado fisiológico da cultura. Contagem de viáveis Contagem de células viáveis Massa de células Peso seco: Filtração Secagem Pesagem Filtração Estufa de secagem Pesagem Turbidimetria Espectrofotômetro Vantagem Rápida e fácil execução, não destroem a amostra. Espectrofotômetro Espectrofotômetro Curva de crescimento Mais luz menos crescimento Massa microbiana Sem destruir a amostra Análises químicas Concentração de proteínas Concentração de Nitrogênio NMP NMP Curva de crescimento Lag Período variável Não há crescimento significativo Preparação Duplicação de organelas DNA Fatores que interferem Choque térmico Produtos químicos Composição pobre Log ou exponencial Crescimento muito grande Exponencial 2 – 4 – 8 – 16 Avaliação do crescimento Estacionária O nº de células nascem = morrem Não há crescimento aparente Declínio Acúmulo de células mortas Produtos tóxicos Lise celular Falta de alimentos Aumento da [ ] de álcool Crescimento contínuo As células são mantidas na fase log ou estacionária. Fermentadores ou quimiostatos. Crescimento em equilíbrio dinâmico. Controle da densidade populacional e da taxa de crescimento. Tensão de O2 Microrganismos classificados como: aeróbios, anaeróbios facultativos, anaeróbios estritos, anaeróbios aerotolerantes e microaerófilos Tensão de O2 Água Essencial Pressão do vapor da água, variando de 0 a 1. Absorver água ou eliminar Bomba de orgânicos K e síntese de compostos Brix - Sólidos Solúveis Totais A fermentação ideal de 15º brix. Caldo apresenta brix 14º a 22º. Brix > 15 diluir Estabilidade Brix > 15 Fermentações mais lentas Incompletas, Dificuldade de multiplicação do fermento. Fermentação incompleta ocorrem incrustações Aroma e gosto indesejáveis Furfural Brix < 15 Fermentação rápida Diminui o rendimento industrial Pressão osmótica Fator extremamente importante Grupo das bactérias Archaea. Requerem altas concentrações de sais para seu desenvolvimento. OBRIGADO Que Deus abençoe VOCÊS