A MICROBIOLOGIA DOS ALIMENTOS Dra. Waléria Guerreiro Lima Microbiologia dos Alimentos Definição: mikros + bios + logos – Estudo da vida diminuta Estuda a influência dos micro-organismos nas características dos produtos alimentícios de consumo humano ou animal. Inclui: fungos, bactérias, vírus, algas, protozoários... Organismos vivos ou agentes que na maioria dos casos não são visualizados a olho nu. Classificação dos Micro-organismos Micro-organismos que alteram os alimentos: São causadores de alterações químicas prejudiciais, resultando na “deterioração microbiana”. Resulta em alterações de cor, odor, sabor, textura e aspecto do alimento. Classificação dos Micro-organismos Micro-organismos transformadores do alimento: Modificam as características originais do alimento de forma à transformá-lo em um novo alimento. Esse processo é chamado de FERMENTAÇÃO Classificação dos Micro-organismos Micro-organismos patogênicos As características das doenças que esses micro-organismos causam dependem de uma serie de fatores inerentes ao alimento, ao microrganismo em questão e ao individuo a ser afetado. Os microrganismos patogênicos podem chegar ao alimento por varias vias, sempre refletindo condições precárias de higiene durante a produção, armazenamento, distribuição ou manuseio em nível doméstico. A "Pré-história" da Microbiologia Leis judaicas: código de saúde pública Livro dos Números (1000 a.C.): isolamento de pessoas com infecções como lepra e gonorréia e de cadáveres. Deuteronômio (600 a.C.) (14, 3-21): proibição do consumo de certas carnes: porco, mariscos, animais encontrados mortos Uso de bebidas fermentadas data de épocas imemoriáveis: Egito e Grécia antigos A "Pré-história" da Microbiologia Povos antigos já tinham ideias sobre doenças e putrefação Índia (1300 a. C.): proibição do casamento de pessoas com tuberculose Bhagavata Purana (500 a. C.): descrição dos sintomas da peste bubônica A descoberta dos micro-organismos Robert Hook (1635-1703) - Inglaterra Antony van Leeuwenhoek (1632-1723) - Delft, Holanda A descoberta dos micro-organismos Observações relatadas à Sociedade Real de Londres O Fogo Sagrado A Grande Fome da Batata A Grande Fome de 1845 Irlanda A Grande Fome da batata na Irlanda Memorial às vítimas da fome em Dublin. Retrato de Bridget O'Donnell e suas duas crianças durante a fome em 1849. TEORIA DA GERAÇÃO ESPONTÂNEA - ABIOGÊNESE Carne podre = Gerava Moscas Cheiros dos pântanos = Gerava Sapos Roupa suja = Gerava Ratos Intestinos = Geravam vermes Pasteur (1822-1895) Teoria microbiana das fermentações Povos antigos usavam a fermentação para a produção de: Vinhos: Grécia Kiu (cerveja de arroz): China (2300 a.C.) Sakê (vinho de arroz fermentado): 500 a.C. Shoyu (molho de soja) Koumiss: leite fermentado de camela Teoria microbiana das fermentações 1850: Pasteur resolve problemas da indústria francesa de vinhos e estabelece a primeira teoria microbiana da fermentação PASTEURIZAÇÃO Teoria microbiana das doenças Fracastoro (XIV): seres pequenos causadores de doenças Plenciz (séc. XVII): diferentes doenças eram causadas por diferentes microrganismos (parasitismo) Robert Koch (1843-1910): rival de Pasteur na descoberta do agente do carbúnculo (antraz): descobriu a bactéria Bacillus anthracis em 1876 Primeiro pesquisador a provar que um germe era causador da doença, fazendo o mesmo mais tarde com a tuberculose Desenvolvimento de técnicas Técnicas de isolamento: necessidade de separar diferentes espécies de microrganismos para estudos Alemães: conceito de meio de cultura: colônias em batatas, isolamento meios: caldos, leite, frutas, etc. Robert Koch: ágar-ágar e a cultura pura Julius Petri: placa para cultura Paul Erlich: coloração das células Joseph Lister: fenol como primeiro desinfetante, técnicas assépticas POSTULADOS DE KOCH 1. O organismo patogênico suspeito deve estar presente em todos os casos da doença e ausente em animais sadios; 2. O organismo suspeito deve ser cultivado em cultura pura; 3. Células de uma cultura pura do organismo suspeito devem causar a doença em um animal sadio; 4. O organismo deve ser reisolado e demonstrar-se idêntico ao original. A idade de ouro (1875-1915) Ecologia Microbiana: Sergei Winogradski e Martinus Beijerinck Bactérias autotróficas Fixação do N2 bactérias Bactérias fotossintetizantes A idade de ouro (1875-1915) Imunologia: primeiras vacinas Indústria: drogas, antibióticos, alimentos Virologia: Iwanovski/Stanley Impacto dos microrganismos nas atividades dos seres humanos ABORDAGENS DA MICROBIOLOGIA CIÊNCIA BIOLÓGICA BÁSICA – oferece ferramentas de pesquisa mais acessíveis ao estudo dos processos biológicos na natureza; CIÊNCIA BIOLÓGICA APLICADA – lida com problemas práticos da medicina, agricultura e indústria. IMPACTO DOS MICRORGANISMOS SOBRE OS SERES HUMANOS IMPACTO DOS MICRORGANISMOS SOBRE OS SERES HUMANOS Alimentos ► meio adequado para o crescimento microbiano - deterioração (“prontos para consumo” - aumento dos custos) - disseminação de infecções - intoxicações - produção de alimentos - conservação de alimentos Composição microbiana dos alimentos • Microbiota própria • Adquirida com o processo/manuseio ► Frutos: Leveduras na casca das uvas - fermentação para fabricação do vinho pH 2,3-5,0 - baixa incidência de bactérias ► Carnes: Corte e manuseio - bactérias proteolíticas, lipolíticas, fungos e ocasionalmente patógenos (Clostridium perfringens, Staphylococcus aureus) ► Leite: Microbiota característica do ambiente Bactérias do ácido lático, leveduras, coliformes, Pseudomonas Patógenos: Staphylococcus (mastite), Mycobacterium, Brucella, Salmonella, Coxiella Microrganismos e a deterioração de alimentos Deterioração: ► Qualquer alteração na aparência, odor, sabor decorrentes da atividade metabólica dos microrganismos O tipo de deterioração depende: - tipo de alimento - microrganismo envolvido (bactérias entéricas raramente deterioram frutos) - número de microrganismos presentes Principais processos de deterioração de alimentos ► Ranço: Alimentos ricos em gordura Microrganismos lipolíticos, principalmente bactérias Quebra das gorduras ácidos graxos glicerol ► Putrefação: Alimentos ricos em proteínas (p.ex. carnes) Bactérias proteolíticas Proteínas putrescina, cadaverina, H2S, NH3 ► Azedamento (fermentação) e coagulação: Leite Bactérias do ácido lático Lactose ácido lático + outros ácidos Controle dos microrganismos em alimentos Inibir o crescimento microbiano ► preservar a qualidade • O crescimento segue o padrão geral: fase lag, exponencial ... • Depende de condições como temperatura e valor nutritivo do alimento • Somente quando a concentração atingir certo nível a deterioração pode ser observada Processos de preservação Frio ► Forma mais comum de conservação Refrigeração (4 a 10 ºC): inibição das reações enzimáticas, levando à paralisação do crescimento microbiano - Crescem os psicrotolerantes Congelamento (-20 ºC): água congelada não está disponível para o metabolismo. Formação de cristais de gelo que danificam a membrana - Pode haver crescimento em bolsas de água não congelada Calor ► Pasteurização 63 ºC por 30 min (LTLT: low temperature long time) 72 ºC por 15 s (HTST: high temperature short time) O tempo e temperatura, estão definidos para eliminação da Coxiella burnetti (patógeno mais resistente – 61,6 °C) ► Esterilização UHT (ultra-high temperature): 150 ºC por até 3 s sistemas contínuos elimina o gosto de leite cozido Redução da atividade água (Aw) ►Secagem: sol, câmaras secagem, liofilização alimentos perdem água, provocando a inibição do crescimento ►Adição de solutos (elevação da pressão osmótica) - adição de açúcar: doces, geléias, - secagem: leite condensado, frutas secas - adição de sal: carnes e peixes - defumação Acidificação ► Diminuição do pH do alimento A maioria dos organismos deteriorantes não crescem em menos de pH 5. O ácido pode ser adicionado ou produzido no processo - ácido acético: picles - ácido lático: leite fermentado, iogurte, chucrute Nos alimentos fermentados, as bactérias não se desenvolvem bem em pH abaixo de 4 – processo autolimitante. Enlatamento Um pouco de história: Em 1795 o governo de Napoleão Bonaparte ofereceu um prêmio de 12 mil francos a quem inventasse um novo método de preservação de alimentos para o exército. - Nicholas Appert funda em 1802 a primeira fábrica de conservas e recebeu o prêmio de Napoleão. ►Altas temperaturas aplicadas a alimentos hermeticamente fechados em latas - Temperatura inadequada: problemas com os termofílicos anaeróbios - Deteriorações mais comuns em enlatados: - azedamento: Bacillus stearothermophillus, B. coagulans, Lactobacillus spp. produção de gás: leveduras, lactobacilos, clostrídios - Irradiação Radiação ionizante: raios gama (cobalto 60) ▪ sem radiação residual e sem afetar a qualidade Atualmente, nos EUA, aves e hambúrgueres estão sendo irradiados para controlar a E. coli 0157:H7 e outros patógenos entéricos 44 KGrays na esterilização de produtos cárneos servidos em vôos espaciais (NASA) 4,4 KGrays para hambúgueres normais Aditivos Diversos produtos químicos são considerados como seguros. Alguns são utilizados há anos, sem evidência de toxicidade, outros já são mais controvertidos. * inorgânicos: - Óxido de etileno, NO3-, NO2* orgânicos: - ácido ascórbico: laticínios, sucos - benzoato de sódio: refrigerantes - propionato de cálcio: pães Em combinação com o ácido ascórbico (Vitamina C), o benzoato de sódio pode formar o benzeno, que é cancerígeno. Doenças de origem microbiana veiculadas por alimentos Categorias de doenças: * infecções - microrganismo ativo presente nos tecidos - ingestão do patógeno através do alimento contaminado (muitos desses agentes também são transmitidos pela água) * intoxicações - microrganismo ativo ausente nos tecidos - ingestão da toxina bioativa pré-formada 6.1 Infecções a. Gastroenterites Bacillus cereus: toxina liberada no trato intestinal Infecção que atinge o sistema gastrointestinal ocasionando diarréias, cólicas intestinais e vômitos. - decréscimo na absorção de fluidos - aumento da secreção de fluidos do sangue para o intestino Vegetais crus, carnes, leite e derivados, farinhas contendo esporos b. Salmoneloses Salmonella thyphimurium: espécie mais comum, presente no intestino dos animais e esgotos. S. typhi: febre tifóide Carnes, salsichas, aves, ovos, leite e laticínios, produtos à base de ovos crús Contaminação: manuseio por indivíduos portadores, água contaminada Maria Tifóide "I can cook" c. Escherichia coli patogênicas Escherichia coli enterotóxica (linhagens ETEC), produtora de enterotoxinas potentes - verotoxina:diarréia hemorrágica e insuficiência renal. Linhagem E. coli O157:H7 produz grande quantidade da toxina Alimentos crús ou mal cozidos, particularmente carnes moídas processadas em grande escala, água. d. Campilobacteriose Campylobacter jejuni e C. fetus Bastonetes Gram negativos, microaerófilos, principais responsáveis por diarréias bacterianas em crianças - C. fetus: abortos em bovinos e ovinos Aves, porco, mariscos crús - todas as carcaças de frango e peru contêm C. jejuni d. Listeriose Listeria monocytogenes – presente em todos os ambientes - Bastonetes ácido tolerantes, psicrotolerantes e halotolerantes - Pessoas imonocomprometidas: septicemia, meningite, encefalite, infecção uterina Carne, laticínios, produtos frescos Contaminação: solo, água e. Hepatite A Picornavírus (RNA vírus) - Inflamação e necrose do fígado Frutos do mar coletados em águas poluídas, leite Contaminação: contaminação fecal da água ou alimento intra- 6.2 Intoxicações a. Intoxicação por estafilococos Staphylococcus aureus – intoxicação bastante comum (gastroenterites) Cremes, doces recheados, carnes, pudins, saladas com maionese Contaminação do alimento: pelo manipulador, seguida pela multiplicação da bactéria no alimento não refrigerado e produção de enterotoxinas (7 tipos) termoestáveis. b. Intoxicação por clostrídios Clostridium perfringens: bactéria anaeróbia, produtora de endósporos Carnes, aves e peixes, crús ou cozidos Toxinas: enterotoxina produzida quando a bactéria esporula no intestino, após ser ingerida com o alimento. Sintomas: alteração da permeabilidade das células epiteliais do intestino, produzindo sintomas de gastroenterites. Clostridium botulinum: bactéria anaeróbia, produtora de endósporos (botulus, do latim, salsicha) Carnes, vegetais enlatados, peixes fermentados, alimentos embutidos, batatas Toxinas: exotoxina (proteína sensível ao calor, 80 ºC/10 min) geralmente fatal. - 1 g mataria 30 bilhões de ratos. assadas, ... Emprego biotecnológico dos microorganismos • Acelerar a decomposição de resíduos orgânicos (esgotos, compostagem) • Degradar produtos tóxicos ao ambiente • Controlar insetos e doenças • Transgenia de plantas e animais Obrigada! [email protected]