análise do processo de antecipação genética na síndrome do x

ANÁLISE DO PROCESSO DE ANTECIPAÇÃO GENÉTICA NA SÍNDROME DO X
FRÁGIL POR MEIO DE SOUTHERN BLOT NÃO RADIOATIVO. Freitas AC1,2,
Brunner O1, Schwartz CE3, Lindsey CJ4, Souza DH5, Moretti-Ferreira D5, Stocco dos
Santos RC1. 1Lab.Genética-Instituto Butantan; 2UNITAU; 3Greenwood Genetic Center
for Molecular Studies-Greenwood-USA; 4Depto de Biofísica - UNIFESP; 5SAG-Depto
de Genética - I. Biociências,UNESP, Botucatu,SP. [email protected]
A Síndrome do X frágil é caracterizada pelo retardo mental, alterações comportamentais
e algumas características dismórficas variáveis. Em 1991, foi identificado o gene
responsável pela Síndrome, o FMR1, localizado na posição Xq27.3. A principal mutação
responsável pela Síndrome é a expansão de uma repetição não traduzida de 3
nucleotídeos (CGG) no exon 1 do gene FMR1, levando a níveis reduzidos ou inexistentes
da proteína codificada por este gene, a FMRP. Baseado nestas informações foi
desenvolvido um diagnóstico molecular para esta Síndrome utilizando as técnicas de
Southern blot e PCR. Em ambas as técnicas o uso de sondas marcadas radioativamente é
de uso comum. Entretanto, o uso de material radioativo é dependente de instalações
apropriadas e de pessoal especializado, sendo desinteressante para diagnóstico de rotina.
Neste trabalho nós reavaliamos um núcleo familiar onde há um casamento
consanguíneo.Este núcleo foi analisado em 1996 por meio de análise citogenética e
Southern blot, usando um fragmento de 5,1 Kb contendo a repetição CGG marcado
radioativamente como sonda. Neste núcleo, o processo da antecipação genética,
característico desta Síndrome, foi acompanhado por meio de um ”Southern blot” usando
uma sonda comercial para detecção do X frágil marcada com digoxigenina (DIG). Os
resultados obtidos permitiram a comparação entre os dados citogenéticos e a análise por
Southern blot com marcação radioativa e não radioativa, assim como uma avaliação das
alterações sofridas pela região afetada ao longo das sucessivas gerações. Órgão
Financiador : UNITAU,Fundação Butantan