Apresentação do PowerPoint - Associação Brasileira da Batata

Evidências adicionais sustentam
observações anteriores(1) de que o
“Vírus do enrolamento das folhas da batata”
(Potato leafroll virus-PLRV)
pode ser transmitido pela
mosca branca (Bemisia tabaci)
(1)Souza-Dias et al., 2005. Fitopatologia bras. Agosto(suplem):907
V SEMINARIO BRASILEIRO DA BATATA – ABBA
– UBERLANDIA-MG (19-20/10/2010)
José Alberto Caram de Souza-Dias (Eng. Agr. PhD)
Centro de Pesquisa e Desenvolvimento de Fitossanidade
Campinas, SP ([email protected])
Primeiro relato feito em 2005, com da trabalhos
feitos na região do Sudoeste Paulista
(Colaboradores:)
Sawasaki, Haiko E2; Lourenção, André L.3;
Silva, Marcia S.4; Elson Yamamoto5; Eder
Mariotto6; Sergio de Salvo7;
1e3APTA/IA/CPD-Fitossanidade,Campinas,SP;
[email protected];
2CGC-Molecular; 4PG-IAC/APTA; 5Grupo
SP; 6Coop. Agr. Capão Bonito, SP;
Apoio FundAg.
Ioshida, Buri7Bayer Cropscience;
Folha de batata infestada por mosca branca (Bemisia tabaci). Notar presença de apenas
2 afídeos. Se mosca branca se tornar eficiente vetora de viroses para batata, alta e rápida
disseminações poderão ocorrer em batatais plantados com “zero” de viroses na batatasemente.
Plantas de batata com sintoma de infecção primária
(estação corrente) do PLRV, em campo sem pulgão
mas alta infestação de mosca branca.
Buri-SP 2003-5.
Luteoviridae, Polerovirus, Potato leafrool virus – PLRV
PLRV PLRV+
Cv. Atlantic
Ausência de pulgões > alta% mosaico (Potyvirus)
PVY(N) ou PVY(NTN)
Sadia ?
Tubérculos de Batata cv Monalisa = PVYntn / vários afídeos vetores
Batatal (cv. Vivaldi) região Capão Bonito-SP:
> 30% PLRV primário na ausência de afídeos; mas alta
infestação de Bemisia tabaci.
Bemisia tabaci em folha de planta de batata: Altas infestações
e incidência do PLRV; ausência de afídeos.
Buri-SP; Capão Bonito, SP /2004-2005
Geminivirus: ToYVSV ou ToSRV, sintomas de “mosaico deformante”. Perpetuação
pelo tubérculo/batata-semente (foto esquerda); e em tomateiro (fotos à esquerda).
Geminivirus em
planta de batata
Planta normal
Geminivirus em plantas de tomate
Tomato golden mosaic virus – ToGMV = Mosaico
dourado do tomateiro: geminivirus / mosca branca
Ovos e
forma
jovem
Particulas
de
Geminivirus
(ToYVSV,
Adulto (Bemisia taba
Batata & Tomate
são parentes, da mesma família (solanaceas) mas não
podem ficar perta = fitossanitariamente falando
Viroses da batata emergentes no Brasil:
Região de Sumaré-SP = B atatal ao lado de tomatal > Alta infestação de Bemisia tabaci
em tomateiros infectados com geminivirus, potencializa geminiviroses no batatal
Diferentes
Afídios = Pulgões
espécies podem ser vetoras = transmissores do
PVY
Afídeo=pulgão
Myzus
persicae,
Vetor de maior
eficiência, e
práticamente única
espécie vetora do
PLRV;
na natureza,
a nível mundial,
citam-se outras
poucas espécies
A.solani; M.
euphorbiae.
Myzus persicae
A. solani
ATENÇÂO:
Pulgão (afídeos)
têm preferência
por plantas
amareladas,
infectadas ou não
pelo PLRV
„Jaette Bintje‟ = PLRV primário e secundário: >
60%; ausência de afídeos, mas alta incidência de
mosca branca (Bemisia tabaci)
PLRV = até meados da década de 1990, era comum disseminação em
campo de 0% inicial a >20% no final (rápida taxa de degenerescência da
batata-semente básica importada ou nacional). Primeira década de 2000:
> casos de +40% PLRV na
“ausência de pulgão”.
= Aumento da Temperatura Ambiente & Aplicações de
Eficientes Inseticidas Sistêmicos
PLRV > Epidemiologia = espécies hospedeiras
alternativas (datura estramonio = figueira do diabo)
PLRV > Epidemiologia = espécies
hospedeiras alternativas (tomateiro, com
sintomas de amarelo baixeiro = confundido
com Crinivirus)
PLRV em planta teste de Datura stramonium, exposta dentro de telado de
produção de tomate. Suspeita-se de transmissão por mosca branca (Bemisia
tabaci), a qual atingiu alta infestação; não tendo sido constado afídeos durante
todo o ciclo. Plantas de tomate ´apresentavam sintomas de amarelo baixeiro,
tendo sido confirmada a presença de PLRV (via ELISA)
Datura stramonium: Sintomas
da infecção pelo PLRV
Tomate: Folha baixeira com
sintoma de amarelo internerval,
associado ao PLRV
Sintoma = Crinivirus tb transmitido
por mosca branca
Tomato chlorosis crinivirus
“um novo virus do tomateiro transmitido por mosca branca”
Why
Tomato chlorosis crinivirus came to our attention because it has been
reported as a new tomato virus transmitted by whiteflies in USA since 1989.
Where Colorado, Connecticut, Florida, Louisiana (US). Identified in 2000 in
Spain (probably present since 1997 - it also occurs in Islas Baleares and Canarias)
and in Algarve in Portugal (symptoms were first seen in 1998). In 2001, reported in
Puerto Rico. Found during winter 2000/2001 in glasshouse tomato crops in Italy
(Sardegna, Sicilia and Puglia); but so far on a limited number of samples. First
found in Morocco in 2000, in Souss Valley. Reported in South Africa and Taiwan.
Found in 2001 in Greece (including Crete). In France, isolated outbreaks were
found in 2002, and are currently under eradication.
On which plants Glasshouse tomatoes. Natural infections on Capsicum annunum
have been found in Spain. It can also infect ornamentals (e.g. Zinnia). In Algarve,
two common weed species Datura stramonium and Solanum nigrum were identified
as natural hosts of the virus.
Damage Irregular chlorotic mottling, interveinal yellow areas on leaves. Similar
symptoms as Tomato infectious chlorosis crinivirus.
Possible identity Crinivirus transmitted by T. vaporariorum, Bemisia tabaci
biotypes A and B, and T. abutilonea.
Revista Cultivar 8(55):23-28, 2009
Revista Cultivar
DANOS :
indiretos = transmissão de vírus, de diferentes famílias,
particularmente espécies da Família Geminiviridae,
genero: Begomovirus, tais como: Mosaico das malvaceas;
da euforbiaceas; deformante da Batata (ToYVSV;
ToSRV); topo crespo do tomateiro (ToYLCV); dourado do
feijoeiro (BGMV); etc.
Mosaico deformante da batata = 1987 em batata-semente
vinda do Rio Grande do Sul, cv. Achat
Sr. Alvaro Santos Costa e Jorge Vega identificaram ser
geminivirus transmitido por mosca branca.
Praticamente sumiu a partir da década de 1990.
Geminivirus (ToYVSV ou ToSRV-Sintomas 2nd = via tubsemente
Sintomas
iniciais em
batata do
Geminivirus
(ToYVSV?)
em tomate,
após 23 dias
da enxertia
de haste.
Datura stramonium
Sintomas de
deformação, bolhas e
clorose de folhas novas,
aos 23 dias após
inoculação por enxertia
de haste de tomate com
sintoma de riscas
amarelas de nervura,
amarelecimento apical
associado à alta
infestação de mosca
branca: Confirmado
Begomovirus
(ToYVSV?)
B. tabaci vetora do PLRV ???
Coleta e transferência dessa praga de batatais com > 30%
PLRV(1o.) e livre de afídeos para testes de transmissão em
insetários (teste arena).
PLRV (primário)
Bemisia tabaci
Procedimentos usudos para
identificação de Fitoviroses
(Extraido livro Dr. Luiz Salazar 1996)
PLRV / DAS-ELISA on a random potato tubers sampling from
an aphid-free but B. tabaci heavily infested potato field (Buri-SP)
Ck+
ck-
buffer
Teste arena para estudo de transmissão do
PLRV por B. tabaci
(Insetário do APTA-IAC/ CPD-Fitossanidade/Virologia)
Plantas indicadoras do PLRV: Batata cv. Bintje, Mondial, Monalisa;
Tomate ; Datura stramonium e D. metel
Plantas de batata cv. Bintje em teste arena para
Bemisia tabaci x PLRV
Batata ´Bintje ´ com sintoma
e DAS-ELISA +
Perpetuação do PLRV via
batata filha de infectada
Datura stramonium com PLRV via
enxertia de haste (´Bintje´PLRV+/B.
tabaci): Fonte de inóculo em teste arena
com B.tabaci
Sintomas de PLRV (1o.)
Datura stramonium
inoculada por enxertia com haste batata
sintomatica para PLRV ao lado esquerdo da
planta controle não inoculada
Sequencias de dois fragmentos amplificados por PCR
com primers DP3-UP4 (Souza-Dias et al., 1999.
Am.J.Potato R., 76:17-24)
GGNGGGTGGGGGNAAATNTGGNANGG
AACCTCCGCCGGNTGACNTATCCGAA
TGCTGGGTTCNNAAAACNGCGGTTNA
TCNTNCATGAGGTCGCNTGCAAGTTG
TANTTTCGGGANTNAACATCATNATA
GCNACCCTAATGACTGCCTACANGTC
TGAGTGGCACACGAGCGTGCCCCCAA
TAACTTCCCTNCCCCGAGAGAGCCCC
CNCGCTNANCCTAGATCTTCCCGGCG
ACATCGAAAAGCTGCTAGCTNACTTT
TTCCTCCAAGAANNCGATNTTAGTTG
GAAAAGTTGNNGCTGNCAAACNCCTT
CCACCNGTGGTTATTCAAAAANAAAA
ANGCNGCTGCTGCNACTATTATAGCG
CGNGGNATTTTCNANAAA
TTAAGCGCTTGAAAAAANANANNAAGNT
TTTTTTNGTCTNGNCNAGNNAGGGATCN
AATNGTNCNTCNTCCCAATTTCACCAAT
ACNNCGGCNTNGCGGANANAAGNCAGCA
NCAGTTGTTGAATCGCCGGACAACTCNA
GGCNTGAGGTGGGCTGCCGTTGGGTGGG
ANAGANCTTCGTGGCCCACGTGCTCTAC
CATCCAGCTGGAANCATCAGGAGNCTAC
TATCTGAAGTTTNCCCCNANCCCCNAGT
TGCAGNCACATCATGTTGNCCCCCCNNT
TTTTTCCCAAACCANCATCNGACTACNN
TCCATCACANAGAGTGTTGAATCGAGGG
TGTCTTTCCTGCGTGTTGTAGCGGGGTT
TCCCCCGGTGGGNTTTNNNNNATCGN
Gen Bank accession numbers for
PLRV sequences
AY138970.1
AF453390.1
X77324.1
D00530.1
X74789.1
AF453389.1
X77323.1
D13954.1
AF453394.1
AF453388.1
X77321.1
D1353.1
AF453392.1
X77326.1
Y0749.1
AF453391.1
X77325.1
AF2714.1
Kit/ADGEN para detecção de Tomato yellow leaf curl virus
(geminivirus - grupo), apresentando reação (amarelos) para
amostra de batata com PLRV
Ck+
ToYVSV
CkToYVSV
Amostras folhas
de batata com
sintoma PLRV
(de campo)
Amostras folhas de
batata com sintoma
PLRV (de campo)
Tampão
Morfologia do PVY
(alongado, 730 x 11nm)
MORFOLOGIA DAS PARTÍCULAS VIRAIS:
Redondo com 23-28 nm (diâmetro)
GEMINIVIRUS (ToYVSV,
ToSRV, BGMV, etc)
(fotos de:African cassava mosaic virus particles
Thomas Frischmuth, Margit Ringel and Cornelia Kocher, Journal of
General Virology (2001), 82, 673–676).
Luteovirus (PLRV,
BYDV, ScYLV, ToYTV,
etc)
(Foto de: Virus enrolamento folha da batata – APS)
Literaturas sobre a relação de transmissão do PLRV x Pulgão x Bacteria
endosimbiotica (Buchnera GroEL)
Endosymbiotic bacteria associated with circulative transmission of potato leafroll virus by Myzus persicae.
J Gen Virol. 1994 Oct; 75 ( Pt 10)():2559-65.
[J Gen Virol. 1994]
See more articles cited in this paragraph
In vitro interactions of the aphid endosymbiotic SymL chaperonin with barley yellow dwarf virus.
J Virol. 1997 Jan; 71(1):569-77.
[J Virol. 1997]
The N-terminal region of the luteovirus readthrough domain determines virus binding to Buchnera GroEL and is
essential for virus persistence in the aphid.
J Virol. 1997 Oct; 71(10):7258-65.
[J Virol. 1997]
Endosymbiotic bacteria associated with circulative transmission of potato leafroll virus by Myzus persicae.
J Gen Virol. 1994 Oct; 75 ( Pt 10)():2559-65.
[J Gen Virol. 1994]
See more articles cited in this paragraph
The N-terminal region of the luteovirus readthrough domain determines virus binding to Buchnera GroEL and is
essential for virus persistence in the aphid.
J Virol. 1997 Oct; 71(10):7258-65.
[J Virol. 1997]
Microbiol Mol Biol Rev. 1999 March; 63(1): 128–148.
PMCID: PMC98959
Copyright © 1999, American Society for Microbiology
Mechanisms of Arthropod Transmission of Plant and Animal
Viruses
Stewart M. Gray1,2* and Nanditta Banerjee2
“Geminivirus transmission.
Geminiviruses …within the begomovirus genera are all
transmitted by whiteflies … . The coat protein has been shown
to be the sole determinant of transmission of some whitefly-borne
viruses (113), a property that was recently mapped to the N
terminus of the coat protein of abutilon mosaic begomovirus
(166). The coat protein was also shown to be the sole
determinant of whether a geminivirus is transmitted
by a whitefly or a leafhopper (16). However, the coat
protein does not solely determine the transmission phenotype of
all geminiviruses. “
Microbiol Mol Biol Rev. 1999 March; 63(1): 128–148.
PMCID: PMC98959
Copyright © 1999, American Society for Microbiology
Mechanisms of Arthropod Transmission of Plant and Animal Viruses
Stewart M. Gray1,2* and Nanditta Banerjee2
“The transmission of all geminiviruses has been classified
as circulative and nonpropagative. Virus has been observed
in the gut epithelial cells and associated with salivary
glands of whitefly vectors, and it is assumed to follow a
similar circulative strategy as the aphid-transmitted
luteoviruses, although no detailed ultrastructural studies
have been published (30). Whiteflies also possess
endosymbionts (31), but it is not known if they produce a
symbionin homologue, nor has the ability of geminiviruses
to bind any of the characterized symbionin homologues
been reported.”
Microbiol Mol Biol Rev. 1999 March; 63(1): 128–148.
PMCID: PMC98959
Copyright © 1999, American Society for Microbiology
Mechanisms of Arthropod Transmission of Plant and Animal Viruses
Stewart M. Gray1,2* and Nanditta Banerjee2
• “The luteoviruses and
geminiviruses are phloem
restricted and must be
inoculated directly into phloem
tissues to cause an infection.
…Aphids, whiteflies,
leafhoppers, and planthoppers,
the vectors of these viruses, are
all phloem feeders. It takes time
for the insects to reach the
phloem, and they will feed on
the phloem only if the plant is a
host of the insect.”
• “How, then, are luteoviruses
or PEMV able to survive for
extended periods in the
aphid hemolymph, an
environment shown to be
hostile to insect pathogens
and parasites? …
Aphids harbor
endosymbiotic bacteria
of the genus Buchnera
in specialized cells located
in the abdomen, called
mycetocytes (126)”
Ausência de vazio sanitário favorece disseminação de
viroses por mosca branca
Vestígios de alta infestação da B. tabaci em folhas de
batatal dessecado (Paraquat), próximo a batatal jovem
com início de infestação. PLRV em observação.
Avaliação de Suscetibilidade de cvs. Agata, Cupido, Asterix, Itararé, Monalisa,
Mondial e Atlantic dentro de telado comercial de tomate cv. IKRAN, onde há alta
pressão de disseminação do geminivirus : ToYVSV
(Elias Fausto, SP, início 16-10-2010)
Datura stramonium: Infecção por mosca branca (Bemisia tabaci), em período de
exposição durante todo o cilo da batata (cv. Bintje ou Agata). Demonstrou ser
excelente indicadora para monitoramento de viroses transmitidas por insetos em
batatal para semente
Sintomas de amarelo e deformação
Foliar = mais avançada a infecção
Sintomas de clorose = inicial
Datura stramonium = ToSRV
(geminivirus) em exposição no
batatal cv. Bintje – Paranapanema,
SP
Exposição de Espécies de Datura (D. metel nesta
foto) como indicadora de viroses dentro de telado
Folha de batata infestada por mosca branca (Bemisia tabaci). Notar presença de apenas
2 afídeos. Se mosca branca se tornar eficiente vetora de viroses para batata, alta e rápida
disseminações poderão ocorrer em batatais plantados com “zero” de viroses na batatasemente.
Muito Obrigado !
Agradecimento a todos os produtores e à ABBA
pelo apoio aos meus trabalhos de pesquisa