54º Congresso Brasileiro de Genética Resumos do 54º Congresso Brasileiro de Genética • 16 a 19 de setembro de 2008 Bahia Othon Palace Hotel • Salvador • BA • Brasil www.sbg.org.br - ISBN 978-85-89109-06-2 Caracterização molecular de cianobactérias isoladas de ecossistemas de manguezal e investigação da produção de compostos bioativos Silva, CSP1; Genuário, DB1; Silva-Stenico, EM1; Moraes, LAB2; Fiore, MF1 Lab. Ecologia Molecular de Cianobactérias, Centro de Energia Nuclear na Agricultura, Universidade de São Paulo 2 Departamento de Química, Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto, Universidade de São Paulo [email protected] 1 Palavras-chave: 16S RNAr, Peptídeo sintetase, Policetídeo sintase, MS, seqüenciamento Estudos sobre a diversidade de cianobactérias em manguezais brasileiros são bastante restritos e, em todos eles, a identificação taxonômica tem sido realizada apenas utilizando amostras ambientais e análise morfológica. O cultivo monoespecífico de cianobactérias de ecossistemas de manguezal no Brasil está no inicio e não existem estudos de caracterização molecular. As cianobactérias são consideradas um dos grupos de microrganismos mais promissores para produção de compostos com bioatividade. Os objetivos desse trabalho foram: (1) caracterizar morfologicamente e molecularmente, por meio do seqüenciamento do gene de 16S RNAr, 24 linhagens de cianobactérias isoladas de ecossistemas de manguezal do Estado de São Paulo; (2) selecionar entre os isolados, linhagens com potencial para produção de compostos bioativos, por meio da amplificação de regiões dos genes de peptídeos sintetase (PS) e de policetídeo sintase (PKS), enzimas envolvidas na produção desses compostos. Para confirmar o potencial das linhagens na produção de compostos bioativos e atestar a eficácia da utilização de primers degenerados nesta investigação, ensaios de bioatividade foram realizados. Oito extratos celulares das linhagens que apresentaram pelo menos um dos genes investigados (PS e/ou PKS) foram testados contra bactérias e fungos patogênicos. Cinco extratos celulares de quatro linhagens (Leptolyngbya sp. CENA134 e CENA137, Phormidium sp. CENA135 e Synechococcus sp. CENA136) foram analisados por espectometria de massas (MS). Os resultados obtidos mostraram que a identificação morfológica está de acordo com análises moleculares de somente algumas seqüências de nucleotídeos. Desta forma, para as linhagens com resultados divergentes, mais estudos devem ser conduzidos na tentativa de elucidar esta incerteza. O gene de PKS foi encontrado em todas as linhagens investigadas e o de PS em seis delas. O resultado de MS indicou a presença de uma potente toxina, a neosaxitoxina, sendo produzida por duas linhagens de Leptolyngbya sp. (CENA 134 e CENA 137). Este é o primeiro estudo sobre filogenia molecular para linhagens de cianobactérias isoladas de ecossistema de manguezal do Brasil, no qual 24 seqüências inéditas de 16S RNAr foram geradas. O uso de primers degenerados mostrou-se eficaz na investigação do potencial de cianobactérias para produção de compostos bioativos. Os resultados confirmaram o potencial desse grupo de microrganismos como fonte promissora na produção de novos compostos bioativos. Apoio financeiro: FAPESP. 67