Caracterização morfológica e molecular de

Caracterização morfológica e molecular de cianobactérias isoladas de
ecossistema de manguezal da Ilha do Cardoso, SP.
Diego Bonaldo Genuário1, Caroline Souza Pamplona da Silva2, Talita
Signoreti Graziano1 e Marli de Fátima Fiore1
1
Universidade de São Paulo, CENA, Lab. Biologia Celular e Molecular, C.P.
96, 13400-970, Piracicaba-SP
amplificação por PCR do gene que codifica o
1. Objetivo
Os ecossistemas de manguezais inserem-se
no
“Domínio
Florestal
Atlântico”
e
compreendem parcela significativa do Estado
de São Paulo. No entanto, vários desses
ecossistemas
encontram-se
em
áreas
degradadas devido ao histórico intenso de
intervenção antrópica, acarretando diretamente
em perda de biodiversidade (Oliveira et al.,
2007). Estudos sobre a diversidade de
cianobactérias nesses ecossistemas são
bastante restritos e envolvem somente a
descrição taxonômica em amostras da
natureza, sem o monocultivo. Neste estudo são
apresentados resultados do isolamento e
monocultivo de dez cianobactérias do
ecossistema de manguezal da Ilha do Cardoso,
no município de Cananéia, litoral sul de São
Paulo e a caracterização morfológica e
molecular desses microrganismos.
2. Material e Métodos
Dez linhagens de cianobactérias (Leptolyngbya
sp. CENA134, Phormidium sp. CENA135,
Leptolyngbya sp. CENA137, Chlorogloea sp.
CENA140,
Chlorogloea
sp.
CENA141,
Cyanothece sp. CENA142, Leptolyngbya sp.
CENA144,
Leptolyngbya
sp.
CENA146,
Leptolyngbya sp. CENA147 e Cyanobium sp.
CENA 150) foram isoladas de diferentes locais
dos manguezais utilizando os meios de cultura
SWBG-11 e ASN-III. Os isolados são mantidos
em sala de crescimento sob iluminação
-2. -1
constante de 40 µmol fótons.m s
e
temperatura controlada de 24±1ºC.
A
identificação morfológica das linhagens foi
realizada em conjunto com o taxonomista Dr.
Jan H. Kaštovský (University of South Bohemia,
República Tcheca). Para a extração de DNA
genômico foi utilizado o protocolo descrito por
Fiore et al. (2000). A caracterização molecular
dessas linhagens foi realizada por meio da
RNAr 16S usando iniciadores específicos 27F1
e 1494Rc (Neilan et al., 1997), e posterior
sequenciamento e análise filogenética.
3. Resultados e discussão
Dois morfotipos isolados (Leptolyngbya sp.
CENA134,
Phormidium
sp.
CENA135)
apresentaram seqüências com identidade
menor que 95% na análise BLAST, indicando
que possivelmente representam espécies ainda
não seqüenciadas ou novos gêneros. Para os
demais morfotipos as identidades foram
superiores a 97%. Entretanto, as linhagens
CENA 140, 141, 142 e 150 não mostraram
congruência entre a análise morfológica e a
molecular. Na árvore filogenética as linhagens
de Leptolyngbya (CENA 134, 137, 144, 146 e
147) formaram um agrupamento monofilético,
assim como a linhagem de Cyanothece sp.
CENA142.
4. Conclusão
Este é o primeiro estudo sobre filogenia
molecular de cianobactérias isoladas de áreas
de manguezais no Brasil, onde dez seqüências
inéditas de RNAr 16S foram geradas. Os
resultados obtidos indicam a necessidade de
utilizar diferentes métodos de identificação,
bem como a revisão de alguns membros desse
grupo de bactérias, com o objetivo de subsidiar
a elaboração de sistemas de classificação mais
coerentes e abrangentes.
5. Referências Bibliográficas
Fiore, M.F. Et al. J. Microbiol. Methods, 39:159169, 2000
Neilan, B.A., et al. Int. J. of Syst. Bacteriol.,
47:693-697, 1997.
Oliveira, M.A.J.; et al. Química Nova, 30:519524, 2007.