Potencial de produção enzimática do fungo Penicillium crustosum

Potencial de produção enzimática do fungo Penicillium crustosum em cultivo sólido com
resíduos agroindustriais
Indianara Kawana Bueno1, Juliana Pagnocelli1, Daniele Boff1, Ana Carolina Feil Kmetzki1, Alexandre Maller1, Marina
Kadowaki1.
1
Universidade Estadual do Oeste do Paraná - Centro de Ciências Médicas e Farmacêutica - Cascavel, Paraná
*[email protected]
Palavras chaves: Fungos filamentosos, agro-resíduos, Penicillium
Materiais e Métodos
O fungo P. crustosum foi cultivado em meio sólido
contendo 1 g de flocos de soja, bagaço de cevada ou
casca de maracujá. Os cultivos foram desenvolvidos em
BOD a 28°C. Após 7 dias de cultivo, 30 mL de água
estéril foi adicionado em cada cultura e agitados (130
rpm) em incubadora a 20º por 30 minutos, em seguida
foi obtido extrato enzimático após filtração com auxilio
de bomba de vácuo. As atividades enzimáticas
(invertase, amilase, pectinase, celulase e xilanase) foram
determinadas pela quantificação dos açúcares redutores
produzidos pelo método de Miller (1959) utilizando
sacarose 0,2M, amido 1%, pectina cítrica 1%,
carboximetilcelulose 1% e xilano 1%. Todos os
substratos foram dissolvidos em tampão acetato de
sódio 50 mM pH 5,5. A reação enzimática foi realizada
misturando 500 µL de extrato enzimático com 500 µL
dos respectivos substratos em banho maria a 50 ºC, nos
tempos 10, 20 e 30 minutos para leitura dos açúcares
redutores. A unidade de atividade enzimática foi
definida como sendo a quantidade de enzima capaz de
liberar 1 micromol de açúcar redutor por minuto.
Resultados e discussão
Pode-se observar na figura 1 a xilanase (252,79 U/mL)
e amilase (149,89 U/mL) foram às enzimas com
acentuada produção enzimáticas induzidas por bagaço
de cevada. Além disso, flocos de soja também foi capaz
de induzir a produção de invertase (86,37 U/mL) e
pectinase (46,02 U/mL). Entretanto, nesse estudo a
casca de maracujá reprimiu a produção das cinco
enzimas estudadas (invertase, pectinase, amilase,
celulase e xilanase). De acordo com Silva et al (2005) a
xilanase (107 U/mL) do fungo Thermoascus
aurantiacus também foi induzida em cultivo sólido
porém na presença de sabugo de milho e grama verde.
280
Atividade Enzimática (U/mL)
Introdução
Mundialmente, as enzimas estão inseridas em setores
industriais de grande porte, como por exemplo,
medicamentos, alimentícios, bebidas, detergentes, papel
e celulose, têxtil, além de muitos outros setores
menores. Portanto, a busca por microrganismos com
capacidade de produção de enzimas de interesse
biotecnológico tem ganhado destaque nos últimos anos.
Dentro desse contexto, este estudo foi realizado com o
intuito de avaliar o potencial enzimático do Penicillium
crustosum em cultivo sólido utilizando resíduos
agroindustriais como fonte de carbono.
Invertase
Pectinase
Amilase
Celulase
Xilanase
260
240
140
120
100
80
60
40
20
0
1
Flocos de soja
2
3
Bagaço de cevada Casca de maracujá
Fontes de Carbono
Fig. 1 – Influência de fontes de carbono na produção enzimas
por
P. crustosum em cultivo sólido com resíduos
agroindustriais.
Conclusão
As enzimas xilanase, amilase do fungo P. crustosum
foram fortemente induzidas com bagaço de cevada
enquanto que a invertase e pectinase foram induzidas na
presença de flocos de soja. Com isso foi constatado que
o cultivo sólido utilizando resíduos agroindustriais é
promissor para produção de enzimas hidrolíticas de
interesse industrial.
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Referências
Miller GL (1959) Anal. Chem. 31:426-428.
Silva R, Lago ES, Merheb CW, Macchione MM, Park YK;
Gomes E (2005) Braz. J. Microbiol. 36:235-241