Produção de Calos Embriogênicos em Explantes Foliares de

PRODUÇÃO DE CALOS EMBRIOGÊNICOS EM EXPLANTES FOLIARES DE PLANTAS MATRIZES DE
CAFEEIRO.
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A.A Custódio; J. Pala; Bolsistas Consórcio Pesquisa Café; E.Q. Silva, A.C.R.S. Paiva; Pesquisadores Fundação
Procafé; 3B.R. Silva; 3Bolsista FAPEMIG; 4V.R. Paulino; 4Bosista CNPq; 5C.H.S. Carvalho; 5Pesquisador Embrapa Café,
([email protected]).
A propagação vegetativa via embriogênese somática permite a multiplicação em larga escala de
híbridos e de genótipos superiores que ainda estão segregando para características de interesse. Esta
técnica aplicada ao melhoramento genético de café arábica possibilita selecionar plantas matrizes em
cerca de 10 anos. Uma das primeiras etapas do processo de produção de mudas clonais é a avaliação do
potencial de produção de calos embriogênicos dos genótipos a serem multiplicados. Nesse contexto, este
trabalho avaliou o potencial de produção de calos embriogênicos friáveis a partir de explantes foliares de
17 plantas matrizes de café arábica com resistência à ferrugem e ao bicho-mineiro selecionadas pela
Fundação Procafé. Utilizaram-se dois meios de cultura para a indução de calos embriogênicos.
Inicialmente os explantes foliares de, aproximadamente, 1cm 2 são plaqueados com a face adaxial em
contato com um meio de cultura, denominado de MI, e cultivados durante um mês. O meio MI é formado
por sais MS/2, vitaminas MS, caseína hidrolisada (100 mg.L-1), extrato de malte (400 mg.L-1), 2,4-D (20
µM), IBA (9,84 µM), 2iP (20 µM), sacarose (20 g.L-1) e Phytagel (2,4 g.L-1). Após um mês em meio MI
os explantes foram transferidos para meio SM, (Teixeira et al., 2004), no qual as concentrações de 2,4-D
e 2iP são reduzidas para 10 µM. Os explantes foliares foram inoculados em placas de Petri, contendo
nove explantes e usadas 30 placas de Petri por genótipo, totalizando 270 explantes foliares por genótipo.
A avaliação da produção de calos embriogênicos foi realizada seis meses após a inoculação determinadose a porcentagem de explantes com calos embriogênicos.
Tabela 1. Percentagem de Calos Embriogênicos em explantes de diferentes genótipos de cafeeiro.
Genótipo
CL 3
Data de plaqueamento
13/2/2009
14/2/2009
16/3/2009
16/4/2009
30/4/2009
30/4/2009
5/5/2009
12/6/2009
15/7/2009
16/7/2009
14/8/2009
18/9/2009
15/10/2009
30/10/2009
13/11/2009
30/12/2009
12/1/2010
26/2/2010
15/4/2010
15/4/2010
Média
Cl Siriema Manhuaçu
20/2/2009
26/6/2009
Média
Cl 5
27/2/2009
27/2/2009
5/3/2009
4/6/2009
15/5/2009
2/7/2009
Média
8/10
14/12/2009
10/3/2010
Média
19/7
15/12/2009
10/3/2010
Média
6/38
16/12/2009
10/3/2010
Explantes com calos embriogênicos
(%)
91,99
68,04
89,18
94,14
66,90
92,80
64,10
91,24
8,85
3,60
26,40
11,70
4,80
2,20
0,00
8,30
25,00
12,80
61,64
63,65
44,37
31,98
52,18
42,08
66,52
60,85
76,10
52,03
65,24
38,93
59,95
6,48
20,90
13,69
0,00
1,38
0,69
2,55
16,78
Média
14/32
16/12/2009
10/3/2010
Média
13/36
16/12/2009
10/3/2010
Média
12/6
16/12/2009
10/3/2010
Média
Cl 6
7/14
10/1
5/14
10/6
19/3
14/8
11/13
Média geral
20/7/2009
11/12/2009
11/12/2009
14/12/2009
14/12/2009
15/12/2009
10/3/2010
11/12/2009
9,66
1,13
0,62
0,87
2,69
37,14
19,91
5,35
8,86
7,10
0,40
33,30
57,14
43,17
44,27
0,00
0,00
20,00
34,03
Resultados
A percentagem de explantes com calos embriogênicos variou de 0,0% no genótipo 14/8 a
59,95% no clone 05 indicando que esta característica é dependente do genótipo (Tabela 1). Os
genótipos 3 e 5, com médias de 44,37% e 59,95%, tem sido utilizados como referência em nosso
laboratório pois, consistentemente apresentam alta taxa de formação de calos. Verificou-se também
que a formação de calos variou dentro de cada genótipo em função da época de coleta dos explantes.
Por exemplo, para o clone 03 as maiores percentagens de formação de calos foram observadas no
primeiro semestre de 2009, durante os meses de fevereiro a junho de 2009, decrescendo a partir de
julho. Provavelmente, o estado fisiológico da planta matriz no momento da coleta de folhas, afetado
principalmente pelo período de frutificação e ou pela disponibilidade de água, influenciaram na
produção de calos embriogênicos. Os genótipos 19/3, 14/8, 14/32, 6/38, 19/7, 8/10, 6 e 12/6,
comparativamente aos demais, produziram poucos calos havendo necessidade de otimizar o protocolo
ou as condições de cultivo da planta matriz.
A percentagem média de calos embriogênicos obtidos (34,03%) é considerada satisfatória, pois permite
a um único operador produzir grande quantidade de calos embriogênicos necessários à produção de
mudas clonais em escala comercial.