Produção de camundongos transgênicos e knockouts Alunos: Danielle Ferman B. Cavalcanti André Miranda Introdução Fukamizu – 1993 “... organismos geneticamente modificados como aqueles cujo patrimônio genético foi manipulado artificialmente pela introdução, modificação ou deleção de uma seqüência de DNA no seu genoma...” Primeiras técnicas – década de 60 Introdução de fragmentos de DNA in vitro em células eucarióticas e procarióticas Atualmente: • Transgênicos por adição: animais que tiveram genes adicionados; • knockout: genes retirados; • knocking in e knockout condicional: genes modificados; Camundongos • São os mais utilizados (90%) • Similaridade genética com o homem • Primeiro mamífero a ter DNA manipulado “Camundongo Gigante” (1982) Transgênicos por adição – testes baseados em hormônios de crescimento Marcador Promotor Transgene Seqüência de secreção Seqüência do vetor CASSETE GENÉTICO Técnicas básicas de manipulação genética in vitro dos embriões Produção de camundongo transgênico Pipeta Produção de camundongo knockout