Engenharia Metabólica de Bactérias Lácticas Bactérias do Ácido Láctico (LAB) Relevância Industrial e Clínica Organismos comensais e/ou patogénicos Fermentações de produtos alimentares Lactococcus lactis Um organismo modelo para estudar metabolismo e regulação Metabolismo de açúcares simples Usado em fermentações alimentares há milhares de anos Grande número de ferramentas moleculares Objectivo fundamental Glucose ? Ácido láctico Elucidar redes metabólicas e a sua regulação em Lactococcus lactis Objectivo aplicado Redireccionar fluxos metabólicos para a produção de metabolitos com interesse económico/social Enriquecimento de produtos fermentados com edulcorantes (manitol e trealose) Melhoramento da resistência a stress ácido de estirpes lácteas (administração oral de vacinas e outros fármacos) Abordagens Globais para Engenharia Metabólica Transcriptómica NMR in vivo Proteómica Estirpes melhoradas Modelação matemática Manipulação genética Detecção em tempo real de compostos intracelulares em L. lactis Lactato Galactose Gal1P G1P PEP Etanol / Butanodiol 3-PGA 22 – 22.5 [1-13C]FBP [6-13C]FBP 9.5 - 10 8.5 - 9 7 – 7.5 5.5 - 6 3 – 3.5 2.5 - 3 100 80 60 40 Desvío químico (ppm) 20 Metabolismo da galactose em humanos GALE UDP-glc GALACTOSE UDP-gal Gal1P GALK Glc1P GALT GALACTOSEMIA Atraso mental Cataratas Icterícia Hipertrofia do fígado Falência renal Glc6P PGM Aumento do consumo de galactose Galactose galP b-Gal galM a-Gal galK UDP-gal Gal1P galE galT UDP-glc G1P pgm G6P Produtos de fermentação Aumento do consumo de galactose Galactose galP b-Gal galM a-Gal galK UDP-gal Gal1P galE galT UDP-glc G1P G6P pgm Produtos de fermentação Grupos no ITQB Colaboradores Fisiologia Celular & NMR Oscar Kuipers – Groningen, NL Fisiologia de LAB & NMR in vivo C. Shearman & M. Gasson – UK Biomatemática Eberhard Voit – USA Síntese Orgânica