UROCULTURA: Sedimento: centrifugar 10 ml de urina – verificar presença de leucócitos PMN e células bacterianas. Amostras não infectadas: geralmente pouco ou nenhum leucócito / bactéria. Amostras de mulheres: presença de muitas células epiteliais escamosas, misturadas ou não com bactérias, indica contaminação da microbiota vaginal – colher nova amostra. ITU: crescimento ≥ 105 UFC/ml – monocrescimento de enterobactérias. GRAM Quantificação – 1 bactéria por campo (1.000x) indica provável presença de mais de 105 UFC/mL Técnica: – colocar 10 μL de urina não centrifugada e bem homogeneizada sobre uma lâmina – deixar secar – fixar e corar pelo Gram PLACAS: – Alça de 1μl • Crescimento X 1.000 = UFC/ml – Alça de 10μl • Crescimento X 100 = UFC/ml – Micropipeta de 5μl • Crescimento X 200 = UFC/ml De uma maneira geral, utilizar a seguinte convenção: – acima de 100.000 UFC/mL = indício de infecção – de 10.000 a 90.000 UFC/mL = suspeita de infecção – de zero a 9.000 UFC/mL = sem significado clínico Contagem de colônias > 105 UFC/mL Para um provável patógeno: – Identificação e TSA – Indivíduos assintomáticos: nova coleta Para um provável contaminante: – Fazer identificação (diferenciar Staphylococcus saprophyticus de outros Staphylococcus, Streptococcus agalactie de Streptococcus viridans). – Sugerir nova coleta e não realizar antibiograma. Dois prováveis patógenos com um diagnóstico ITU crônica ou recorrente: – Identificar quanto à espécie – Realizar o antibiograma Dois prováveis patógenos com sintomas de ITU: – Identificar quanto à espécie – Realizar o antibiograma – Solicitar nova amostra para confirmação Mais que dois microrganismos: – Reportar: “Múltiplos microrganismos presentes; provável contaminação, sugerimos repetir a cultura” A presença de 2 microrganismos, sendo um com contagem inferior a 10% em relação ao outro: considerar cultivo monomicrobiano. Contagem de colônias ≤105 UFC/mL Um provável patógeno com contagem 105 UFC/mL: – Para pacientes sob antibioticoterapia, grávidas, recém-nascidos e infecção urinária de repetição, realizar identificação e antibiograma. Um potencial patógeno presente com contagem > 102 UFC/mL em mulheres sintomáticas: – Fazer identificação e antibiograma Um potencial patógeno presente com contagem > 103 UFC/mL em homens sintomáticos: – Fazer identificação e antibiograma Sem informação clínica: – Descreva o microrganismo presente entre 104 e 105 UFC/mL, com base na morfologia – Entre em contato com o paciente e/ou médico. Solicite informações e/ou a coleta de nova amostra – Caso o contato não seja possível, mantenha a cultura a temperatura ambiente por três dias para possível retomada de identificação, se requerido pelo médico do paciente. Um provável contaminante com contagem 105 UFC/mL: – Leucócitos normais: descritivamente identifique o isolado, comentando que pode se tratar de microrganismo pertencente à microbiota normal; Não realizar o antibiograma – Leucócitos aumentados: solicite nova amostra Dois ou mais microrganismos presentes com < 104 UFC/mL: – Relatar: “Múltiplos microrganismos presentes; provável contaminação, sugerimos repetir a cultura”. PUNÇÃO SUPRAPÚBICA Um microrganismo presente: – Fazer identificação e antibiograma. Dois ou mais microrganismos presentes: – Identifique quanto à espécie – Entre em contato com o paciente e/ou médico. Solicite informações e/ou a coleta de nova amostra. Caso o contato não seja possível, mantenha a cultura a temperatura ambiente por três dias para possível retomada de identificação, se requerido pelo médico do paciente. Sem crescimento (para semeadura de 10 μL): – Examine em até 48 horas de incubação – Reporte “Sem crescimento após 48 h. Teste com sensibilidade de > 100 UFC/mL” COPROCULTURA Exame macro e microscópico das amostras - Observar presença de muco - Realizar pesquisa de leucócitos em todas as amostras (Panótico ou AF) - Ver também se existem hemácias na amostra Exame bacterioscópico das amostras (coloração de Gram) - Observar presença de equilíbrio na flora (CGP e BGN) - Observar a quantidade de leveduras e pseudohifas - Observar presença de muco. Meios de enriquecimento seletivo prévio: - Caldo GN – Hajna (4 a 6 horas) melhor escolha para até 6 horas de estufa. Neste período inibe o crescimento da flora normal e deixa os verdadeiros patógenos crescerem bem, já que estão em menor quantidade. - Caldo Selenito-cistina (24 hs) Plaqueamento de rotina: - Combinação de meios de cultura: - SS + XLD - HE + XLD - HE + MacConkey - SS + MacConkey - XLD + MacConkey SOROTIPAGEM - Realizar para: - Escherichia coli enteropatogênica clássica (EPEC) - crianças até 5 anos - Escherichia coli enterotoxigênica (ETEC) - todas as idades - Escherichia coli enterohemorrágica (EHEC) - todas as idades (no Brasil – raro) - Escherichia coli enteroinvasiva (EIEC) - + frequente > 2 anos, adultos - Salmonella (polivalente + antígeno Vi + predominantes) - Shigella (polivalente + isoladas se necessário) Culturas especiais nas fezes Campylobacter Yersinia HEMOCULTURA Endocardite Infecciosa: Hemocultura Devem ser colhidas pelo menos 3 amostras de 10mL de sangue em sítios de punção diferentes. Na EI aguda deve ser colhido com 15 minutos de intervalo e na subaguda acima de 6 horas. Com uso prévio de antibiótico são necessárias mais 3 amostras (total de 6). Hemoculturas negativas: - Fagocitose e destruição dos microrganismos pelos leucócitos PMN e monócitos – impedem o acúmulo de bactérias extracelulares viáveis - Bactéria com parede celular defeituosa após exposição a antimicrobianos – perda da capacidade de se desenvolver e multiplicar-se em meios artificiais. CATETER Microorganismos encontrados nas infecções relacionadas a cateter: - 40% Staphylococcus - 30% bacilos Gram negativos - 12% Candida - 12% Enterococcus