62º Congresso Nacional de Botânica Botânica e Desenvolvimento Sustentável 07 a 12 de Agosto de 2011 Frotaleza, Ceará, Brasil SELEÇÃO DE POLIMORFISMO DE LOCOS MICROSSATÉLITES VISANDO AO DESENVOLVIMENTO DE MAPAS GENÉTICOS EM FEIJÃO-CAUPI FLÁVIA TADEU DE ARAÚJO Co-autores: MITALLE KAREN DA SILVA MATOS , ALBERTO VINICIUS CASIMIRO ONOFRE , LIDIANE L. BARBOSA AMORIM , NATHÁLIA GABRIELLE DE ARAÚJO LEITE e ANA MARIA BENKO-ISEPPON Tipo de Apresentação: Pôster RESUMO SELEÇÃO DE POLIMORFISMO DE LOCOS MICROSSATÉLITES VISANDO AO DESENVOLVIMENTO DE MAPAS GENÉTICOS EM FEIJÃO-CAUPI ([1]) Flávia Tadeu de ARAÚJO ([2]) Mitalle Karen da Silva MATOS (2) Alberto Vinicius Casimiro ONOFRE (2) Lidiane L. Barbosa AMORIM (2) Nathália Gabrielle de Araújo LEITE (2,3) Ana Maria BENKO-ISEPPON (2) O feijão-caupi [Vigna unguiculata (L.) Walp] é uma planta promissora para estudos genéticos por ser autógama e possuir genoma de tamanho relativamente pequeno. Os marcadores microssatélites (SSR) estão facilitando a identificação de regiões genômicas associadas às características agronômicas de interesse através do mapeamento genético. Neste contexto, o objetivo deste trabalho foi identificar marcadores SSR promissores para o uso no mapeamento de genes de resistência ao caruncho (Calosobruchus maculatus) e ao vírus do mosaico severo (Cowpea severe mosaic virus). Para esse estudo, duas populações estão sendo conduzidas, sendo o cruzamento BR 14-Mulato x IT85F-2687 contrastantes para resistência a vírus, e o cruzamento Patativa x Pageú, contrastante para resistência ao caruncho. Foram utilizados 16 marcadores SSR obtidos da literatura a partir de sequências ESTs (eSSR) e do banco de dados cowpea genespace (GSS), sendo avaliados quanto ao polimorfismo entre os genitores dos dois cruzamentos. As reações de PCR foram realizadas em um volume final de 20 μL, contendo 10 ng DNA genômico, 2,5 μM MgCl2, 200 μM dNTP-mix, 2,5 μM de cada primer, 1 U de Taq DNA polimerase, de acordo com o programa: 36 ciclos de 94ºC por 20 s, 30 s a 52ºC para anelamento, 40 s a 72ºC de extensão. Os produtos das reações foram submetidos à eletroforese em géis de 62º Congresso Nacional de Botânica Botânica e Desenvolvimento Sustentável 07 a 12 de Agosto de 2011 Frotaleza, Ceará, Brasil poliacrilamida 6% não desnaturante, corados com nitrato de prata. Dos 16 locos SSR avaliados 13 foram polimórficos amplificando um total de 81 alelos. O número de alelos por loco variou de um (CLM0110 e CLM0567) até onze (CLM0935), com uma média de cinco alelos por loco. Os marcadores com motivos de trinucleotídeos foram mais polimóficos, com destaque para o CLM0400 (TCA)8 e CLM0935 (ATC)8. A informação de polimorfismo gerada nos parentais demonstra a viabilidade do uso dos SSRs para o desenvolvimento dos mapas genéticos incluindo características de interesse para o melhoramento do feijão-caupi no Brasil. Palavras-chave: DNA repetitivo, Vigna unguiculata, estresse biótico. ([1]) Financiamento CAPES, FACEPE, CNPq, RENORBIO/FINEP/BNB, Embrapa arroz e feijão (2) Universidade Federal de Pernambuco - UFPE, Laboratório de Genética e Biotecnologia Vegetal, Recife, PE, Brasil. E-mail: [email protected] (3) Instituto Agronômico de Pernambuco, IPA, Recife, PE, Brasil.