Análise dos genes SMN e NAIP em pacientes com suspeita clínica

55º Congresso Brasileiro de Genética
Resumos do 55º Congresso Brasileiro de Genética • 30 de agosto a 02 de setembro de 2009
Centro de Convenções do Hotel Monte Real Resort • Águas de Lindóia • SP • Brasil
www.sbg.org.br - ISBN 978-85-89109-06-2
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Análise dos genes SMN e NAIP em pacientes com
suspeita clínica de Atrofia Muscular Espinhal
Santos, FL1; Ramos, VG1; Araújo, APQC2; Cabello, PH1.
Laboratório de Genética Humana – Fundação Oswaldo Cruz (FIOCRUZ).
Instituto de Pediatria e Puericultura Martagão Gesteira – Universidade Federal do Rio de Janeiro (UFRJ).
[email protected]
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Palavras-chave: Nested PCR, SMN, NAIP, neurônio motor, diagnóstico molecular.
A Atrofia Muscular Espinhal (AME) é uma doença caracterizada pela degeneração de células do corno anterior
da medula espinhal. É a segunda mais comum desordem autossômica recessiva fatal depois da Fibrose Cística
(1:6000 nascidos vivos) afetando aproximadamente 1 em 10.000 nascimentos. O diagnóstico é baseado na fraqueza
proximal e simétrica com atrofia muscular.A classificação mais usada para as AMEs é a de Dubowitz (1978), que
as divide em Tipo I (Werdnig-Hoffmann), Tipo II ( forma intermediária) e Tipo III (Kugelberg-Welander). Com
o avanço da genética molecular, o gene das AMEs (I, II e III) foi localizado no braço longo do cromossomo 5,
quase simultaneamente, por três grupos independentes de pesquisadores. Em 1995 identificaram um gene que
denominaram SMN (gene de sobrevivência do neurônio motor) e simultaneamente identificaram um outro gene
NAIP (gene da proteína inibitória de apoptose neuronal). Os dois grupos de pesquisadores encontraram deleções
nestes genes em pacientes afetados pela AME, porém com uma freqüência bem maior no gene SMN. Esses
achados foram extremamente importantes e vários grupos, no mundo inteiro, começaram estudar esses genes
em pacientes. Entretanto, o mecanismo que leva à degeneração neuronal permanece desconhecido. Portanto
estudos de correlação genótipo-fenótipo são fundamentais para melhorar a compreensão acerca dos mecanismos
moleculares responsáveis pelas AMEs. O presente estudo tem o objetivo principal de diagnosticar pacientes com
suspeita clínica de Atrofia Muscular Espinhal, utilizando técnicas da biologia molecular, através da pesquisa de
deleção nos éxons 7 e 8 do gene SMN e éxons 5 e 6 do gene NAIP. As amostras dos pacientes com suspeita clínica
de AME são provenientes do Instituto de Puericultura e Pediatria Martagão Gesteira da Universidade Federal do
Rio de Janeiro. O DNA foi obtido através do protocolo adaptado de Lahiri & Nuremberg, a partir de uma alíquota
de sangue periférico. Para os éxons 7 e 8 do gene SMN, foi utilizado Nested PCR, seguido de digestão enzimática e
análise em gel de poliacrilamida 12%. Para os éxons 5 e 6 do gene NAIP, o produto da PCR foi analisado em gel de
agarose 2%. Dos 86 pacientes analisados, 26 apresentaram deleções compatíveis com a Atrofia Muscular Espinhal.
Destes, 3 foram diagnosticados clinicamente com AME I, 9 com AME II e 14 com AME III. A maioria dos pacientes
por nós estudados nasceu de primeira gestação, o que reforça ainda mais a importância do diagnóstico correto
para o aconselhamento genético nas futuras gestações do casal.
Apoio Financeiro: FAPERJ e CNPq.