Informativo Eletrônico Laboratório Unidade Médica Rua Luiz Simon, 75 - Largo do Riachuelo - Jacareí, SP Informativo Digital . Nº 4. Abril/2015 Coleta de sangue para exames da coagulação Variáveis pré-analíticas podem afetar os resultados As amostras para testes em plasma pobre em de exames. Os ensaios da coagulação são sensíveis às plaqueta (PPP) devem ter contagem plaquetária condições de coleta, transporte, centrifugação, inferior a 10.000 plaquetas/mm3 e devem ser estocagem e processamento da amostra. Além disso, centrifugadas por aproximadamente 3.500 rpm por 15 informações fornecidas no ato da coleta são minutos à temperatura ambiente (TA – não exceder importantes para análise dos resultados, tais como 25°C). Em alguns casos, a centrifugação refrigerada condição pode clinica do paciente, medicações, ser usada (4°C). Alguns procedimentos anticoagulantes e antiagregantes plaquetários em requerem dupla centrifugação, ou seja, o PPP da uso. primeira centrifugação é transferido para outro tubo Para a coleta de exames da coagulação, o mais plástico e centrifugada pela segunda vez, sendo que a indicado são materiais que contenham vácuo, porção inferior não deve ser utilizada porque contém diminuindo a manipulação das amostras. O tubo deve plaquetas remanescentes da primeira centrifugação. conter citrato de sódio a 3,2% e deve ser o segundo Amostras não centrifugadas ou centrifugadas para os na testes ordem de coleta, posterior, apenas da de coagulação (TTPA, TT, fibrinogênio, hemocultura, se houver. O torniquete não deve inibidores e fatores, etc) podem permanecer à TA por permanecer por mais que um minuto, pois pode até 4 horas. haver estase localizada e hemoconcentração A agitação excessiva (transporte de carro ou alterando os resultados. Deve-se respeitar o volume a motocicleta) pode contribuir para ativação da ser coletado, garantindo a proporção adequada entre coagulação. a amostra e o anticoagulante (9 partes de sangue A seguir, estão dispostas orientações para os total para 1 de anticoagulante). Se a proporção não exames de coagulação mais solicitados na prática for médica: respeitada, resultados inadequados podem ocorrer. Após a coleta, as amostras devem ser Para o tempo de protrombina (TP), o sangue total homogeneizadas por inversão de 5 a 10 vezes, para é estável à TA por 4 horas, e o plasma, à TA ou na garantir o contato da amostra com o anticoagulante. geladeira por 24 horas, podendo ser congelado por 2 Deve-se cuidar para que a compressão do local da semanas. punção. Amostra com hematócrito maior que 55% O teste de tromboplastina parcial ativado (TTPA) pode ocasionar falsos prolongamentos no TP, TTPA e deve ser priorizado. Como o fator VIII é termolábil, a fatores de coagulação. A correção pode ser feita com amostra armazenada em condições não padronizadas -3 a fórmula: C = 1,85 x 10 (100 – HT) x V, onde C = pode degradar-se rapidamente, levando a resultado volume de citrato em mL, V = volume de sangue total falsamente alterado. Níveis elevados de fator VIII em mL e Ht = hematócrito em %. podem encurtar o resultado do TTPA. Na centrifugação inadequada, com plaqueta acima de Fonte: EXPEDIENTE Laboratório Unidade Médica www.unidademedica.com.br Diretor Geral - Dr. João Pasqualin Neto Informativo Eletrônico Laboratório Unidade Médica Rua Luiz Simon, 75 - Largo do Riachuelo - Jacareí, SP 10.000/mm3, ocorre liberação do fator plaquetário 4 Inibidor do fator VIII pode levar a resultado falso- (FP4), levando a neutralização da heparina. Portanto, positivo. deve-se separar o plasma em até uma hora. O plasma O plasma deve ser descongelado, sendo transferido pode ser estocado em geladeira até 4 horas e imediatamente a banho-maria (37°C) por 2 a 5 congelado até 2 semanas. minutos e homogeneizados por inversão. No Para o tempo de trombina (TT), o sangue total é descongelamento a baixa temperatura, pode haver estável em geladeira por até 4 horas e congelado por formação de crioprecipitado com redução de fator até 2 semanas. VIII, VWF e fibrinogênio. Repetidos ciclos de Para o fibrinogênio, o sangue total é estável por 4 horas, o plasma é estável à TA por até 2 horas, em congelamento e descongelamento podem afetar os níveis dos fatores. geladeira até 4 horas e congelado até 2 semanas. O plasma rico em plaquetas (PRP) usado para Anticoagulantes, heparina em concentração maior testes de função plaquetária é preparado por que 0,6 UI/mL, hirudina e argatroban podem diminuir centrifugação do sangue anticoagulado à TA a 1.000 a dosagem do fibrinogênio pelo método de Clauss, rpm por 10 minutos, o sobrenadante é removido e assim como produtos da degradação da fibrina. deixado à TA em tubo plástico tampado; essa Amostras para triagem e dosagem dos fatores VII, VIII execução não pode passar de 2 horas. Algumas e VWF devem ser mantidas à TA para evitar a drogas podem interferir com testes de agregação ativação por baixa temperatura. plaquetária como: aspirina, antiinflamatórios, Para dosagem de fatores, deve-se evitar a clopidogrel, imidazol, antibióticos, antidepressivos, contaminação por heparina que como hirudin e betabloqueadores, derivados da Ginka. Alimentos argatroban podem agir como inibidores, resultando como o alho, dieta rica em gordura (lipemia) e em fatores. cafeína, também podem interferir. Em pacientes com Anticoagulante oral, tipo varfarina, diminui os fatores alta contagem de plaquetas é necessário ajustar a II, VII, IX e X, além das proteínas C e S. Após a concentração centrifugação, o plasma separado pode ficar à TA por plaquetas/mm3 com PPP. Amostras com menos de até 2 horas, geladeira por até 4 horas e congelado a - 200.000 plaquetas/mm3 têm possível diminuição na 80°C, já que os fatores são estáveis a esta resposta, podendo ser usada metodologia com temperatura por 6 meses. Os fatores VIII e V sangue total por impedância. O sangue total pode ser degradam se o processo de descongelamento for mantido à TA. O PRP deve ficar em tubo plástico e demorado. tampado, evitando contato com oxigênio para evitar falsa diminuição dos níveis de Para a pesquisa de anticoagulante lúpico, deve-se proceder à dupla centrifugação antes do congelamento. O plasma pode ser estocado em geladeira por até 4 horas ou congelado a -80°C por até 6 meses. entre 200.000 e 400.000 alteração do pH até a execução do teste. Referência Brasil. Recomendações da Sociedade Brasileira de Patologia Clínica e Medicina Laboratorial SBPC/ML: Coleta e Preparo da Amostra Biológica. 1ª Ed. Editora Manole - Barueri – 2014 Assessoria Científica Lab Rede Fonte: EXPEDIENTE Laboratório Unidade Médica www.unidademedica.com.br Diretor Geral - Dr. João Pasqualin Neto