Coleta de sangue para exames da coagulação

Informativo Digital . Nº 4 . Abril/2015
Coleta de sangue para exames da coagulação
Variáveis pré-analíticas podem afetar os resultados
As amostras para testes em plasma pobre em
de exames. Os ensaios da coagulação são sensíveis às
plaqueta (PPP) devem ter contagem plaquetária
condições de coleta, transporte, centrifugação,
inferior a 10.000 plaquetas/mm3 e devem ser
estocagem e processamento da amostra. Além disso,
centrifugadas por aproximadamente 3.500 rpm por 15
informações fornecidas no ato da coleta são
minutos à temperatura ambiente (TA – não exceder
importantes para análise dos resultados, tais como
25°C). Em alguns casos, a centrifugação refrigerada
condição
pode
clinica
do
paciente,
medicações,
ser
usada
(4°C).
Alguns
procedimentos
anticoagulantes e antiagregantes plaquetários em
requerem dupla centrifugação, ou seja, o PPP da
uso.
primeira centrifugação é transferido para outro tubo
Para a coleta de exames da coagulação, o mais
plástico e centrifugada pela segunda vez, sendo que a
indicado são materiais que contenham vácuo,
porção inferior não deve ser utilizada porque contém
diminuindo a manipulação das amostras. O tubo deve
plaquetas remanescentes da primeira centrifugação.
conter citrato de sódio a 3,2% e deve ser o segundo
Amostras não centrifugadas ou centrifugadas para os
na
testes
ordem
de
coleta,
posterior,
apenas
da
de
coagulação
(TTPA,
TT,
fibrinogênio,
hemocultura, se houver. O torniquete não deve
inibidores e fatores, etc) podem permanecer à TA por
permanecer por mais que um minuto, pois pode
até 4 horas.
haver
estase
localizada
e
hemoconcentração
A agitação excessiva (transporte de carro ou
alterando os resultados. Deve-se respeitar o volume a
motocicleta) pode contribuir para ativação da
ser coletado, garantindo a proporção adequada entre
coagulação.
a amostra e o anticoagulante (9 partes de sangue
A seguir, estão dispostas orientações para os
total para 1 de anticoagulante). Se a proporção não
exames de coagulação mais solicitados na prática
for
médica:
respeitada,
resultados
inadequados
podem
ocorrer. Após a coleta, as amostras devem ser
 Para o tempo de protrombina (TP), o sangue total
homogeneizadas por inversão de 5 a 10 vezes, para
é estável à TA por 4 horas, e o plasma, à TA ou na
garantir o contato da amostra com o anticoagulante.
geladeira por 24 horas, podendo ser congelado por 2
Deve-se cuidar para que a compressão do local da
semanas.
punção. Amostra com hematócrito maior que 55%
 O teste de tromboplastina parcial ativado (TTPA)
pode ocasionar falsos prolongamentos no TP, TTPA e
deve ser priorizado. Como o fator VIII é termolábil, a
fatores de coagulação. A correção pode ser feita com
amostra armazenada em condições não padronizadas
a fórmula: C = 1,85 x 10-3 (100 – HT) x V, onde C =
pode degradar-se rapidamente, levando a resultado
volume de citrato em mL, V = volume de sangue total
falsamente alterado. Níveis elevados de fator VIII
em mL e Ht = hematócrito em %.
podem encurtar o resultado do TTPA.
Na centrifugação inadequada, com plaqueta acima de
10.000/mm3, ocorre liberação do fator plaquetário 4
Inibidor do fator VIII pode levar a resultado falso-
(FP4), levando a neutralização da heparina. Portanto,
positivo.
deve-se separar o plasma em até uma hora. O plasma
O plasma deve ser descongelado, sendo transferido
pode ser estocado em geladeira até 4 horas e
imediatamente a banho-maria (37°C) por 2 a 5
congelado até 2 semanas.
minutos e homogeneizados por inversão. No
 Para o tempo de trombina (TT), o sangue total é
descongelamento a baixa temperatura, pode haver
estável em geladeira por até 4 horas e congelado por
formação de crioprecipitado com redução de fator
até 2 semanas.
VIII, VWF e fibrinogênio. Repetidos ciclos de
 Para o fibrinogênio, o sangue total é estável por 4
congelamento e descongelamento podem afetar os
horas, o plasma é estável à TA por até 2 horas, em
níveis dos fatores.
geladeira até 4 horas e congelado até 2 semanas.
 O plasma rico em plaquetas (PRP) usado para
Anticoagulantes, heparina em concentração maior
testes de função plaquetária é preparado por
que 0,6 UI/mL, hirudina e argatroban podem diminuir
centrifugação do sangue anticoagulado à TA a 1.000
a dosagem do fibrinogênio pelo método de Clauss,
rpm por 10 minutos, o sobrenadante é removido e
assim como produtos da degradação da fibrina.
deixado à TA em tubo plástico tampado; essa
Amostras para triagem e dosagem dos fatores VII, VIII
execução não pode passar de 2 horas. Algumas
e VWF devem ser mantidas à TA para evitar a
drogas podem interferir com testes de agregação
ativação por baixa temperatura.
plaquetária
 Para dosagem de fatores, deve-se evitar a
clopidogrel, imidazol, antibióticos, antidepressivos,
contaminação por heparina que como hirudin e
betabloqueadores, derivados da Ginka. Alimentos
argatroban podem agir como inibidores, resultando
como o alho, dieta rica em gordura (lipemia) e
em
fatores.
cafeína, também podem interferir. Em pacientes com
Anticoagulante oral, tipo varfarina, diminui os fatores
alta contagem de plaquetas é necessário ajustar a
II, VII, IX e X, além das proteínas C e S. Após a
concentração
centrifugação, o plasma separado pode ficar à TA por
plaquetas/mm3 com PPP. Amostras com menos de
até 2 horas, geladeira por até 4 horas e congelado a -
200.000 plaquetas/mm3 têm possível diminuição na
80°C, já que os fatores são estáveis a esta
resposta, podendo ser usada metodologia com
temperatura por 6 meses. Os fatores VIII e V
sangue total por impedância. O sangue total pode ser
degradam se o processo de descongelamento for
mantido à TA. O PRP deve ficar em tubo plástico e
demorado.
tampado, evitando contato com oxigênio para evitar
 Para a pesquisa de anticoagulante lúpico, deve-se
alteração do pH até a execução do teste.
proceder
Referência
falsa
diminuição
à
dupla
dos
níveis
centrifugação
de
antes
do
congelamento. O plasma pode ser estocado em
geladeira por até 4 horas ou congelado a -80°C por
até 6 meses.
como:
entre
aspirina,
antiinflamatórios,
200.000
e
400.000
Brasil. Recomendações da Sociedade Brasileira de Patologia Clínica e
Medicina Laboratorial SBPC/ML: Coleta e Preparo da Amostra
Biológica. 1ª Ed. Editora Manole - Barueri – 2014
Assessoria Científica Lab Rede