GRAM para microbiologia com fucsina básica como

GRAM para microbiologia
com fucsina básica como solução de contraste
04 – 100804
IVD Dispositivo médico-diagnóstico in vitro
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Código CND: W0104010899
número de testes executáveis ..... /
tempo de realização .................... 6 minutos
validade do produto ..................... 2 anos
temperatura de armazenamento . 15-25°C
equipamento complementar ........ não necessário
Fim previsto
Preparado para o processamento de amostras cito-histológicas a examinar em microscopia óptica.
Aplicação
Método para a diferenciação das bactérias Gram-positivas e Gram-negativas em esfregaços e aposições
de tecido.
Muitas vezes utilizado para determinar a adequação da amostra à cultura celular. Caracteriza-se pela
utilização de dois corantes em sucessão: violeta cristal e fucsina básica.
Princípio
As bactérias Gram-positivas e as leveduras retêm o violeta cristal e coram-se de azul. As bactérias
Gram-negativas, permeáveis à solução de descoloração, descoram e são evidenciadas com um corante
de contraste vermelho.
Método
1)
Deixe secar os esfregaços ao ar e, depois, fixe-os com uma das duas técnicas seguintes: a) rápidas passagens sob uma pequena chama 2, 3 vezes;
b) - imersão em metanol durante 1 ou 2 minutos
2) Cubra completamente o esfregaço com o reagente A (Solução de violeta cristal). Deixe actuar
durante 1 minuto.
3) Deixe escorrer e lave durante alguns instantes com poucas gotas do reagente B.
4) Cubra completamente o esfregaço com o reagente B (Solução iodo-iodetada). Deixe actuar durante
1-2 minutos.
5) Lave com água destilada
6) Cubra completamente o esfregaço com o reagente C (Solução de descoloração). Deixe actuar
durante 1 minuto.
7) Lave em água destilada
8) Cubra completamente o esfregaço com o reagente D (Solução de fucsina básica). Deixe actuar
durante 1 minuto.
9) Lave bem em água destilada.
10) Seque ao ar.
Resultados
Bactérias Gram-positivas, leveduras ......................................................................................... azul-roxo
Bactérias Gram-negativas .............................................................................................. vermelho-laranja
Reagentes
A)
B)
C)
D)
Advertências e
precauções
O produto destina-se a ser utilizado por pessoal técnico especializado.
O produto é classificado como perigoso.
Leia atentamente as informações indicadas no rótulo (símbolos de perigo, frases de risco e de
segurança) e consulte sempre a ficha de segurança, onde é possível obter informações relativas aos
riscos apresentados pelo preparado, medidas de precaução a adoptar durante o uso e medidas de
primeiros socorros e em caso de derrame acidental. Não utilize caso a embalagem primária esteja
danificada.
Solução de violeta cristal ....................................................................................................... 500 ml
Solução iodo-iodetada ........................................................................................................... 500 ml
Solução de descoloração..................................................................................................2 x 500 ml
Solução de fucsina básica ..................................................................................................... 500 ml
Empresa fabricante: Bio-Optica Milano s.p.a.
Bio Optica Milano s.p.a.
via San Faustino 58 • I - 20134 Milano
tel. +39 02212713.1 • fax +39 022153000
www.bio-optica.it
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Conservação
Conserve o preparado à temperatura ambiente. Mantenha as embalagens devidamente fechadas.
Estabilidade
Após a primeira abertura, o reagente deve considerar-se válido até à data de validade indicada, desde
que seja correctamente conservado.
Eliminação
Resíduo perigoso; entregue-o a empresas especializadas e autorizadas, segundo a legislação vigente.
Bibliografia
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Bartholomew JW.Variables influencing results, and the precisedefinition of steps in gram staining as
a means of standardizing the results obtained.Stain technol. 1962;37:139-155.
Mangels JI, Cox ME, Lindley. Methanol fixation. An alternative to heat fixation of smears .Diag.
Microbiol. Infect. 1984; 2:129-137
Data de publicação: Novembro 2015
Empresa fabricante: Bio-Optica Milano s.p.a.
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