P.A.S. Periodic Acid Schiff Hotchkiss - MC Manus 04 – 130802/L IVD Dispositivo médico-diagnóstico in vitro Código CND: W01030799 número de testes executáveis ..... / tempo de realização .................... 50 minutos validade do produto ..................... 1 ano temperatura de armazenamento .. 2-8°C equipamento complementar ......... não necessário Fim previsto Preparado para o processamento de amostras cito-histológicas a examinar em microscopia óptica. Aplicação Para a demonstração dos componentes tissulares, normais ou patológicos, distinguidos de grupos glicólicos ou amino-hidroxílicos adjacentes em secções histológicas (método1) e em esfregaços hemáticos e citológicos (método 2). Princípio A especificidade deste método baseia-se na oxidação electiva, mediante ácido periódico, dos grupos: 1,2- glicol; amino primário (ou 1-hidroxi-2-amino); amino secundário (ou 1-hidroxi-2-alquilamino) e 1hidroxi-2-cetona; (ocorre ainda a oxidação de alguns derivados metoxílicos e de alfa-cetonas que, porém, não são transformados em aldeídos). Durante esta oxidação ocorre a ruptura da ligação entre os átomos de carbono situados na posição 1,2 com a consequente formação de grupos aldeídicos. Na reacção seguinte, os dois grupos aldeídicos estreitamente contíguos são transformados pela fucsina sulfurosa do reagente de Schiff num composto colorido insolúvel, semelhante, mas não igual, à fucsina básica. As condições necessárias para que estas reacções possam ocorrer são: - que os grupos hidroxi estejam livres; - que os compostos que se formam após a oxidação não possam ser difundidos no tecido; - que os grupos aldeídicos destes compostos sejam em quantidade suficiente para poderem ser detectados histoquimicamente. Assim, pode constatar-se que apenas macromoléculas como os polissacarídeos e as mucinas cumprem estes requisitos. A escolha do ácido periódico como oxidante deve-se ao facto de que bloqueia a reacção de oxidação no estádio aldeídico. Os mucopolissacarídeos ácidos, à excepção da heparina monossulfúrica, não reagem, pois a presença do grupo -SO3H bloqueia os grupos glicólicos reactivos. Empresa fabricante: Bio-Optica Milano s.p.a. Bio Optica Milano s.p.a. via San Faustino 58 • I - 20134 Milano tel. +39 02212713.1 • fax +39 022153000 www.bio-optica.it Página 1 de 3 Método 1) 2) Método para secções histológicas: Desparafine e hidrate a secção com água destilada. Mergulhe a secção no reagente A: deixe actuar durante 10 minutos. Lave em água destilada. Mergulhe a secção no reagente B: deixe actuar durante 20 minutos. Lave em água destilada. Mergulhe a secção na solução C: deixe actuar durante 2 minutos.Deixe escorrer a lâmina e, sem lavar, mergulha a secção no reagente D: deixe actuar durante 2 minutos. Lave em água destilada. Mergulhe a secção no reagente E: deixe actuar durante 3 minutos. Vire em água de nascente corrente durante 5 minutos. Desidrate na série ascendente dos alcoóis, xileno e bálsamo. Método para esfregaços hemáticos e citológicos: Ponha os esfregaços secos ao ar em água destilada. Mergulhe os esfregados no reagente A: deixe actuar durante 10 minutos. Lave em água destilada. Mergulhe os esfregados no reagente B: deixe actuar durante 20 minutos. Lave em água destilada. Mergulhe os esfregados na solução C: deixe actuar durante 2 minutos. Deixe escorrer a lâmina e, sem lavar, mergulhe os esfregados no reagente D: deixe actuar durante 2 minutos. Lave em água destilada. Mergulhe os esfregados no reagente E: deixe actuar durante 3 minutos. Vire em água de nascente corrente durante 5 minutos. Desidrate na série ascendente dos alcoóis, xileno e bálsamo. Resultados Substâncias P.A.S. positivas .................................................................................... Vermelho magenta Núcleos ..................................................................................................................................... ……Azul Reagentes A) B) C) D) E) Advertências e precauções O produto destina-se a ser utilizado por pessoal técnico especializado. O produto é classificado como perigoso. Leia atentamente as informações indicadas no rótulo (símbolos de perigo, frases de risco e de segurança) e consulte sempre a ficha de segurança, onde é possível obter informações relativas aos riscos apresentados pelo preparado, medidas de precaução a adoptar durante o uso e medidas de primeiros socorros e em caso de derrame acidental. Não utilize caso a embalagem primária esteja danificada. Conservação Conserve o preparado a 2 - 8°C. Mantenha as embalagens devidamente fechadas. Estabilidade Após a primeira abertura, o reagente deve considerar-se válido até à data de validade indicada, desde que seja correctamente conservado. Eliminação Resíduo perigoso; entregue-o a empresas especializadas e autorizadas, segundo a legislação vigente. Bibliografia • • • Solução de ácido periódico .................................................................................................. 1000 ml Reagente de Schiff .............................................................................................................. 1000 ml Solução de metabissulfito de potássio ................................................................................. 1000 ml Solução fixadora .................................................................................................................. 1000 ml Hemalum de Mayer ............................................................................................................. 1000 ml Cook HC. Human tissue mucins. Lab. Aid Series - Baker Editor London Hotchkiss RD. A microchemical reaction resulting in the standing of polysaccaride structures in fixed tissue preparations. Arch Bioch 1948; 16: 131. Mc Manus JFA Periodic acid routine applied to kidney Amer J Path 1948; 24:643. Data de publicação: Agosto 2016 Empresa fabricante: Bio-Optica Milano s.p.a. Bio Optica Milano s.p.a. via San Faustino 58 • I - 20134 Milano tel. +39 02212713.1 • fax +39 022153000 www.bio-optica.it Página 2 de 3 Empresa fabricante: Bio-Optica Milano s.p.a. Bio Optica Milano s.p.a. via San Faustino 58 • I - 20134 Milano tel. +39 02212713.1 • fax +39 022153000 www.bio-optica.it Página 3 de 3