51º Congresso Brasileiro de Genética Resumos do 51º Congresso Brasileiro de Genética • 7 a 10 de setembro de 2005 Hotel Monte Real • Águas de Lindóia • São Paulo • Brasil www.sbg.org.br - ISBN 85-89109-05-4 [email protected] Palavras-chave: Lippia lacunosa, Verbenaceae, micropropagação in vitro Maciel, RP; Marcato, RC, José, DP, Mazzoccoli, L, Santos, MO Laboratório de Genética, Departamento de Biologia, Universidade Federal de Juiz de Fora. Micropropagação de Lippia lacunosa e infecção por Agrobacterium rhizogenes O gênero Lippia pertence à família Verbenaceae e encontra-se distribuído nas Américas Central e do Sul e em algumas áreas da África Tropical. Muitas, das aproximadamente 200 espécies, pertencentes à este gênero são empregadas na medicina popular e na culinária. A espécie Lippia lacunosa Mart. & Shau. foi pouco estudada e se sabe muito pouco sobre ela. O presente trabalho tem como objetivo estabelecer um protocolo para micropropagação in vitro desta espécie, para posteriores estudos de transformação genética e conservação de germoplasma. Foram coletadas estacas de um acesso cultivado na estação experimental de botânica da Universidade Federal de Juiz de Fora (MG). As estacas foram desinfestadas por lavagens sucessivas em água corrente, água destilada, detergente 2% , etanol 70º GL, anti-fúngico (1g/L), hipoclorito de sódio 2% e água autoclavada. Numa capela de fluxo laminar, foram colocadas em meio de cultura Murashige e Skoog (MS) (Murashige & Skoog, 1962) com o regulador de crescimento ANA (Ácido naftalenoacético) em concentração de 0,5 mg/mL e, posteriormente colocados em sala de crescimento com fotoperíodo controlado. A partir do 14o dia começaram a emitir raízes e se desenvolveram rapidamente. A multibrotação foi induzida eliminando-se o meristema apical, para que fossem replicados e, nesse ponto foram emitidos em média 2,6 ramos laterais. Quando a citocinina (BAP – 6-benzilaminopurina) nas concentrações (0,5 mg/L, 1mg/L) ou combinada com ANA (0,5mg/L/0,5 mg/L) visando incrementar a brotação lateral, foi acrescentada, surgiram calos no lugar das raízes e não foram induzidos ramos laterais. Diferentes cepas selvagens de Agrobacterium rhizogenes (A4, 2659, 8196) crescidas overnight a 150 rpm em meio MYA estão sendo inoculas para induzir formação de raízes em cabeleira de modo a regenerar plantas modificadas a partir destas raízes. Foi observada a formação de calos e raízes adventícias, variando de 40 a 50 % no do ponto de inoculação das agrobatérias, demonstrando o potencial de transformação de L. lacunosa com Agrobacterium. Apoio financeiro: FAPEMIG. 452