1º Teste BIOQUIMICA E FISIOLOGIA MICROBIANA

1º Teste
BIOQUIMICA E FISIOLOGIA MICROBIANA
9 maio 2016
Duração máxima: 2 horas
1. Os procariontes, como é o caso de Escherichia coli, assimilam
monossacáridos usando um processo denominado translocação de grupo.
Descreva esse processo para o caso da glucose. (2,0 valores)
2. Após a internalização da glucose, esta pode ser metabolizada por diferentes
vias até à formação de piruvato numa primeira etapa e a CO2, ATP e poder
redutor (NADH) em condições de aerobiose.
a) Indique quais as possíveis diferentes vias a que se refere o texto acima,
descrevendo os passos específicos de cada uma dessas vias e comparando o
seu rendimento final em ATP e poder redutor. (1,5 valores).
b) Após conversão do piruvato em acetil-CoA pelo complexo piruvato
desidrogenase, este último sofre uma série de transformações numa via
conhecida por ciclo de Krebs ou dos ácidos tricarboxílicos. Descreva
sucintamente as transformações que ocorrem neste ciclo. (1,5 valores).
c) Para além do sentido catabólico, o ciclo de Krebs pode ter um sentido
catabólico. Discuta esta afirmação. (1,0 valores)
3. A assimilação de amónia pelos microrganismos é crítica para que possa
ocorrer a síntese de um grupo muito importante de moléculas.
a) Diga que compostos são e quais os seus precursores (0,5 valores)
b) Descreva como ocorre a assimilação da amónia por um microrganismo
como por exemplo E. coli quando o meio de cultura usado contém 0,05
mM de amónia. (1,5 valores)
4. A fermentação alcoólica pode ser efectuada quer por bactérias quer por
leveduras. Descreva ambas as vias, bem como o papel das enzimas
intervenientes. (1,0 valores)
5. Os organismos pertencentes ao domínio Bacteria possuem na sua constituição
peptidoglicano, um componente que não é encontrado em organismos de
qualquer organismo pertencente a um dos outros domínios da vida. A sua
biossíntese compreende várias etapas, desde os percursores até que sejam
incorporados na parede celular de bactérias. Descreva detalhadamente os
vários processos envolvidos na biossíntese do peptidoglicano. (2,5 valores)
6. A perceção e adaptação a variações ambientais envolvem em procariontes
sistemas de regulação conhecidos por sistemas de 2 componentes. Descreva a
constituição geral destes sistemas e o modo como funcionam de forma a
permitir que os microrganismos adaptem a sua fisiologia às mudanças
ambientais. Detalhe o funcionamento de um deles à sua escolha (2,0 valores)
7. Os sRNAs bacterianos são uma classe de RNAs que não codificam proteínas
mas que exercem importantes papéis na regulação pós-transcricional da
expressão génica. Descreva as suas características gerais e os mecanismos
envolvidos na sua acção. Dê 3 exemplos desses RNAs indicando os processos
por eles regulados. (1,5 valores)
8. Descreva o fenómeno de regulação por “quorum-sensing”, detalhando as
diferenças deste tipo de regulação entre bactérias Gram-positivas e Gramnegativas. (1,5 valores)
9. A secreção de proteínas pode ocorrer em bactérias por diversos mecanismos,
entre os quais o sistema geral de secreção de proteínas de E. coli. Descreva os
componentes e o modo de funcionamento deste sistema (1,5 valores)
10. A enzima glucose 6-fosfato desidrogenase é actualmente usada em várias
aplicações biomédicas, nomeadamente em biosensores. Por forma a purificar a
enzima a partir de um extrato bruto procedeu-se a várias cromatografias até
remoção de outras proteínas.
a) Como poderia proceder experimentalmente para confirmar que os
eluatos do último passo cromatográfico apenas possuíam a enzima de
interesse? (1,0 valores)
b) Como poderia procede para confirmar que a enzima mantinha a sua
actividade? (1,0 valores)