EXAME BIOQUÍMICA E FISIOLOGIA MICROBIANA Mestrado Integrado em Eng.ª Biológica 17 de Julho de 2009 Duração máxima 2 horas 1. A metabolização da glucose para a obtenção de energia e poder redutor implica a sua internalização na célula. Descreva detalhadamente como ocorre este processo em E. coli. (1,5 valores) 2. As fermentações lácticas são exploradas industrialmente na preparação de vários produtos, entre eles o iogurte. Descreva detalhadamente uma das vias bioquímicas utilizadas para converter a glucose em ácido láctico, referindo a importância do passo catalisado pela enzima lactato desidrogenase. (1,5 valores) 3. O azoto é um elemento constituinte de muitas moléculas biológicas, sendo normalmente assimilado sob a forma de amónia. A biossíntese de aminoácidos implica a aminação de compostos intermediários do metabolismo. Que mecanismos usa E. coli para dispor intracelularmente de amónia para a biossíntese de aminoácidos? (2,0 valores) 4. Uma cultura de E. coli foi colocada num meio de cultura contendo apenas acetato como fonte de carbono e energia. No seu entender, é possível observar crescimento da cultura? Em caso afirmativo, quais as principais vias metabólicas utilizadas pelo microrganismo? (1,5 valores) 5. Descreva detalhadamente a composição e estrutura do peptidoglicano. Descreva os principais passos biossintéticos que permitem à célula sintetizar o peptidoglicano. (3,0 valores) 6. Quando a temperatura de crescimento de E. coli é subitamente alterada de 25 para 42 ºC, ocorre um fenómeno na célula conhecido por resposta ao choque térmico. a. Em que consiste a resposta ao choque térmico? Em que consistem as proteínas de choque térmico e quais as suas principais funções na célula? (1,5 valores) b. Descreva uma metodologia experimental que lhe permita identificar de forma inequívoca essas proteínas. (2,0 valores) 7. Tem sido reconhecido ultimamente a importância do papel desempenhado por pequenas moléculas de RNA na regulação do metabolismo microbiano, em particular em E. coli. Descreva as características gerais desses RNAs e o seu modo de actuação em procariotas. (2,0 valores) 8. Sob condições normais, as células procariotas expressam como factor sigma maioritário o factor σ70. No entanto, sob certas condições, outros factores sigma alternativos são usados pela célula. Indique que factores sigma alternativos são usados e descreva o papel de um deles. (2,0 valores). 9. O processo de estabelecimento da relação simbiótica entre bactérias do género Sinorhizobium e a respectiva planta hospedeira envolve a troca de sinais químicos entre os 2 organismos. Descreva as moléculas sinalizadoras envolvidas. (1,5 valores) 10. Descreva o que são os sistemas de 2 componentes e o modo como funcionam. (1,5 valores)