EXAME BIOQUÍMICA E FISIOLOGIA MICROBIANA Mestrado

EXAME
BIOQUÍMICA E FISIOLOGIA MICROBIANA
Mestrado Integrado em Eng.ª Biológica
Época extraordinária 31 de Julho de 2014
Duração máxima 2 horas
1. Na preparação do meio de cultura para Escherichia coli, foi usada como fonte
única de carbono lactose em vez de glucose. Sabendo que a estirpe a cultivar
não apresenta mutações, irá ocorrer crescimento? Que processos e vias
metabólicas usará Escherichia coli para converter a lactose em frutose 1,6difosfato, por forma a poder utilizá-la como fonte de carbono e energia? (2,0
valores)
2. O azoto é um elemento que entra na constituição de várias moléculas
biológicas, como é o caso dos aminoácidos. A fonte mais comum de azoto
biologicamente assimilável por bactérias é sob a forma de amónia. Descreva o
processo de aquisição de amónia pelas células por forma a ser incorporada nos
aminoácidos. (2,0 valores)
3. A fermentação lática é usada industrialmente para a produção de iogurtes, entre
outros laticínios. Esta fermentação pode ocorrer por várias vias distintas.
Compare as diversas vias de acordo com o rendimento final em energia e
metabolitos. Para uma via à sua escolha, descreva os principais passos desde
o piruvato até aos produtos finais da fermentação, evidenciando o papel
desempenhado pelas enzimas-chave da via. (2,0 valores)
4. Uma estirpe de E. coli foi inoculada em meio de cultura contendo acetato como
única fonte de carbono e energia. É possível observar crescimento? Que vias
são utilizadas por E. coli nestas condições por forma a sintetizar o percursor do
peptidoglicano UDP-N-acetilglucosamina. (2,5 valores)
5. Descreva detalhadamente a composição e os passos envolvidos na biossíntese
do peptidoglicano de bactérias Gram-negativas. (2,5 valores)
6.
A regulação da expressão génica em bactérias envolve vários mecanismos,
entre os quais a regulação por quorum-sensing. Descreva como funciona este
mecanismo de regulação da expressão génica e quais as moléculas envolvidas
em bactérias gram-positivas e negativas. (2,0 valores)
7. Descreva o que entende por pequenos RNAs não codificantes sem bactérias,
bem como o seu modo de actuação ao nível da regulação pós-transcrição. (1,5
valores)
8. Em procariontes, a monitorização das alterações ambientais é feita por
sistemas de regulação de 2 componentes. Descreva, de uma forma geral, como
funcionam esses sistemas, dando um exemplo concreto de um desses sistemas
(1,5 valores)
9. A exposição de uma cultura de E. coli a uma mudança brusca de temperatura
levou à identificação de um conjunto de proteínas que eram sintetizadas
exclusivamente sob essas condições. Discuta de que proteínas se trata, como
poderia inequivocamente identificá-las experimentalmente, qual o seu papel na
fisiologia da célula, bem como o modo como os mecanismos moleculares
envolvidos na activação da sua síntese. (2,0 valores)
10. Por forma a maximizar um processo industrial, uma cultura bacteriana foi sujeita
a condições que se suspeita terem originado stresse oxidativo nas células.
Como poderia comprovar experimentalmente a situação recorrendo a algum
equipamento básico de laboratório ? (2,0 valores)