15/3/2011 QBQ0105-BIOQUÍMICA & BIOLOGIA MOLECULAR (Enfermagem 2011) TITULAÇÃO DE AMINOÁCIDOS - Laboratório 1 Profa. Resp. Sayuri Miyamoto Monitores: Priscilla BMC Derogis Thiago CG Mattos São Paulo, 2011 Aula de hoje… Aprender a fazer um relatório; Compreender o efeito tamponante de ácidos fracos e estudar as propriedades ácido-base dos aminoácidos; Aprender técnicas básicas em laboratório. 1 15/3/2011 RELATÓRIO DE LABORATÓRIO UNIVERSIDADE DE SÃO PAULO INSTITUTO DE QUÍMICA CAPA INTRODUÇÃO OBJETIVOS MATERIAIS E MÉTODOS RESULTADOS E DISCUSSÃO CONCLUSÃO BIBLIOGRAFIA QBQ-0105 BIOQUÍMICA E BIOLOGIA MOLECULAR (Enfermagem) Professores: Profa. Dra. Sayuri Miyamoto Profa. Dra. Mari Cleide Sogayar Monitores: Priscilla BMC Derogis (Doutoranda) Thiago CG Mattos (Doutorando) 2011 TITULAÇÃO DE AMINOÁCIDOS O que é titulação? Consiste na adição gradual de uma base (ou ácido) a uma solução ácida (ou básica) até um pH básico (ácido). 2 15/3/2011 Qual é o resultado da titulação de um ácido forte? Base Ácido forte Qual é o resultado da titulação de um ácido fraco? Região de tamponamento 3 15/3/2011 Qual é o resultado da titulação de um aminoácido? Estrutura geral Ionização de Aminoácidos Meio aquoso Aminoácidos Agem como ácidos ou bases (anfóteros) Forma desprotonada Forma protonada OH H pKa>pH + H3N C R COOH OH H H3N C R COO H H2N pKa<pH C COO R A carga elétrica das Aas varia em função do pH do meio 4 15/3/2011 Curva de titulação Glicina pK1(α-COOH) = 2,35; pK2(α-NH3+) = 9,78; pI = 6,06 pK1 pK2 pH 1 14 Adicionando base Adicionando ácido As Cadeias Laterais Apolares Aromáticos Polares carregados positivamente Polares não carregados Polares carregados negativametne 5 15/3/2011 Curva de titulação dos AAs com cadeias laterais ionizáveis Glutamato pK1(α-COOH) = 2,10; pK2(α-NH3+) = 9,47; pKr(grupo R) = 4,07 Lisina pK1(α-COOH) = 2,16; pK2(α-NH3+) = 9,06; pKr(grupo R) = 10,46 Na aula de hoje… Montar as curvas de titulação de: Um ácido forte; Um ácido fraco; Dois aminoácidos. 6 15/3/2011 MICROPIPETADORES 7