Fisiologia molecular da absorção de água e açúcar no intestino de

Fisiologia molecular da absorção de água e açúcar no intestino de
Dysdercus peruvianus
Alegria, T.G.P.1, Bifano, T.D.2, Terra, W.R.2
Instituto de Biociências, Universidade de São Paulo, SP
2
Instituto de Química, Universidade de São Paulo, SP
1
100
300
250
200
150
50
100
50
2. Material e Métodos
0
0
Fêmeas mantidas em jejum receberam,
primeiramente, soluções contendo água,
glicose, glicerol e corante não absorvível.
Após determinados intervalos de tempo as
mesmas foram dissecadas e as soluções
presentes
em
seus
intestinos
foram
analisadas. A quantidade de glicose foi
determinada pelo método de Dahlqvist
2
(1968) e a absorção de água através da
medida de absorbância do corante (sendo a
sua intensidade proporcional à absorção de
água).
Posteriormente,
o
mesmo
procedimento foi realizado com adição de
inibidores de transportadores de glicose e
sais (Na2SO4 e K2SO4). Em paralelo, uma
seqüência referente a um transportador de
glicose (do tipo uniportador), obtida partir do
sequenciamento ao acaso de clones
derivados da biblioteca de intestino de D.
peruvianus, foi amplificada a partir de reações
de PCR utilizando-se iniciadores referentes
ao vetor utilizado.
3. Resultados e discussão
20
40
60
80
100
120
C onteúdo relativo de água
A absorção de compostos hidrofílicos, através
da membrana celular requer um mecanismo
especial
(transportadores).
Estes
transportadores
são
proteínas
transmembrânicas que capturam a molécula a
ser transportada no meio extracelular e, após
mudanças
conformacionais
adequadas,
1
liberam a molécula no meio intracelular. Este
projeto tem como objetivo descrever o
mecanismo de absorção de glicose e água no
intestino de D. peruvianus, através da
identificação e caracterização das moléculas
envolvidas.
A curva de absorção de glicose e água por
tempo é apresentada na Fig.1, na qual o
símbolo (●) representa a razão glicose/corante e o
símbolo (‫ )ס‬conteúdo relativo de água. Já
referente a seqüência encontrada, esta
resulta em maior similaridade (Blastx) com
transportador de glicose, do tipo uniportador.
Glicose/corante
1. Objetivos
0
140
Tempo (minuto)
Controle
Sulfato de Sódio
Floretina
Sulfato de potássio
Citocalasina B
Floridizina
Fig.1.Absorção de água e glicose no intestino de D.
peruvianus.
Conclusões
Os dados obtidos nos permitem concluir que
existe a ocorrência de dois tipos de
transportadores de glicose no intestino de D.
peruvianus, do tipo uniportador e simportador,
+
sendo que o último realiza o simporte de K
+
ao invés de Na , juntamente com a glicose.
Referências
[1] Terra, W. R., Ferreira, C., 2003. Digestive
System . Encyclopedia of Insects, ed V. H.
Resh, R. T. Cardé, pp. 310 - 323. Academic
Press.
[2] Dahlqvist, A, 1968. Assay of intestinal
disacharidases. Analyt. Biochem., 22, 99
107.