Unidade 4|Produção de alimentos e sustentabilidade 1- Microrganismos e indústria alimentar 1.1 Fermentação e actividade enzimática Professora Rosa Pinho|Biologia|12º Ano Fermentação e actividade enzimática 1 Qual é a importância dos microrganismos na indústria alimentar? Queijo Os microrganismos são essenciais na produção de alimentos Iogurte Vinagre Vinho Cerveja Professora Rosa Pinho|Biologia|12º Ano Fermentação e actividade enzimática 3 Desde a Antiguidade que o Homem recorre aos microrganismos. Considera-se que a produção de queijo (produzido a partir do leite de cabra coalhado) foi iniciada pelos árabes. As referências ao vinho remontam há 3000 anos, tornando-se um importante produto comercial desde a Antiguidade A produção de compotas e picles permite conservar os alimentos por longos períodos de tempo, pois os elevados teores de açúcar e ácidos inibem o crescimento da maioria dos organismos contaminante Professora Rosa Pinho|Biologia|12º Ano Fermentação e actividade enzimática A salga e a seca permitem desidratar os alimentos e inibir o crescimento de microrganismos 4 1.1 Fermentação e actividade enzimática Qual o interesse dos fenómenos fermentativos na produção de alimentos? Professora Rosa Pinho|Biologia|12º Ano Fermentação e actividade enzimática 5 Quais são os processos metabólicos que tornam os microrganismos úteis na indústria alimentar? Professora Rosa Pinho|Biologia|12º Ano Fermentação e actividade enzimática 6 Professora Rosa Pinho|Biologia|12º Ano Fermentação e actividade enzimática 7 O ácido pirúvico pode ser degradado em álcool etílico, com a formação de CO2. É essencial na produção de bebidas alcoólicas e pão, sendo realizado por leveduras. Professora Rosa Pinho|Biologia|12º Ano Fermentação e actividade enzimática 8 Algumas bactérias podem degradar o ácido pirúvico em ácido láctico, diminuindo o pH dos alimentos. É essencial na formação doiogurte Algumas bactérias podem degradar o álcool em ácido acético, diminuindo o pH dos alimentos. É essencial na formação do vinagre Professora Rosa Pinho|Biologia|12º Ano Fermentação e actividade enzimática 9 Respiração aeróbia Professora Rosa Pinho|Biologia|12º Ano Fermentação e actividade enzimática 10 Que relação existe entre a actividade enzimática e os microrganismos? As enzimas permitem aumentar a velocidade da reacção, sendo essenciais no metabolismo de todos os seres vivos. No entanto, mesmo na presença de enzimas, a velocidade atinge um valor máximo, que se torna constante Professora Rosa Pinho|Biologia|12º Ano Fermentação e actividade enzimática 11 Como actuam as enzimas nas reacções? O centro activo da enzima apenas reconhece os reagentes (substratos) específicos Ocorrem interacções entre os reagentes e o centro activo da enzima Após a reacção, os produtos libertam-se e a enzima fica livre para reagir com mais reagentes, não se gastando neste processo A – Reacção de síntese (anabolismo) Professora Rosa Pinho|Biologia|12º Ano Fermentação e actividade enzimática 12 B – Reacção de análise (catabolismo) As enzimas podem favorecer o estabelecimento de ligações químicas ou a sua ruptura. É a estrutura molecular do centro activo que define a afinidade das enzimas aos seus substratos. Este modelo de actuação enzimático designa-se por modelo de chave fechadura. Professora Rosa Pinho|Biologia|12º Ano Fermentação e actividade enzimática 13 Depois de actuar, a enzima fica livre, podendo ligar-se a novas moléculas de substrato Professora Rosa Pinho|Biologia|12º Ano Fermentação e actividade enzimática 14 Ocorre uma diminuição da concentração dos substratos (reagentes), que são consumidos. Pelo contrário, ocorre a produção de produtos a partir dos substratos. As enzimas formam um complexo com os substratos, que deixa de existir no final, quando a concentração de substratos é reduzida A concentração da enzima livre diminui, mas retoma aos valores iniciais no final da reacção. Professora Rosa Pinho|Biologia|12º Ano Fermentação e actividade enzimática 15 Muitas enzimas necessitam de outros compostos para actuarem Apoenzima – parte proteica Cofactores substância não proteica Inorgânico – iões metálicos Apoenzima + cofactor Orgânico – coenzimas, por ex. enzimas holoenzima Professora Rosa Pinho|Biologia|12º Ano Fermentação e actividade enzimática 16 Modelos de ligação enzima-substrato Modelo de Fischer ou de chave-fechadura Formação do produto –duas moléculas de glicose O centro activo tem uma estrutura permanente onde apenas pode ajustar-se um tipo de substrato. Este modelo está em sintonia com a especificidade absoluta Professora Rosa Pinho|Biologia|12º Ano Fermentação e actividade enzimática 17 Modelo de Koshland ou do encaixe induzido Substrato Produtos Enzima Substrato aproxima-se do centro activo O substrato, ao ligar-se à enzima, induz alteração na estrutura da molécula, de modo que os aminoácidos do centro activo se “moldam”, formando um centro activo complementar. O centro activo adquire a sua estrutura inicial Este modelo explica a actividade de certas enzimas sobre substratos ligeiramente diferentes. Professora Rosa Pinho|Biologia|12º Ano Fermentação e actividade enzimática 18 Como é que as células, nomeadamente os microrganismos, regulam a actividade das enzimas? Existem compostos que se ligam à enzima, afectando a sua funcionalidade: Indutores Inibidores Indução A ligação do indutor provoca modificações no centro activo, permitindo a actuação enzimática Professora Rosa Pinho|Biologia|12º Ano Fermentação e actividade enzimática 19 Inibição enzimática Inibição irreversível inibidor O inibidor combina-se permanentemente com a enzima, através de ligações covalentes, tornando-a inactiva ou provocando a sua destruição. enzima Muitos venenos são inibidores irreversíveis, como é o caso do DDT, do cianeto, do mercúrio … Professora Rosa Pinho|Biologia|12º Ano Fermentação e actividade enzimática 20 Inibição reversível O inibidor liga-se temporariamente à enzima, através de ligações fracas. Quando se dissocia, a enzima torna-se activa e funcional. Inibição competitiva Inibição não competitiva O inibidor liga-se ao centro activo, competindo com o substrato, e diminuindo a actividade da enzima. O inibidor liga-se ao centro alostérico provocando uma alteração do centro activo e a enzima deixa de ser activa. Professora Rosa Pinho|Biologia|12º Ano Fermentação e actividade enzimática 21 Como regular a actividade de enzimas organizadas em vias metabólicas? O produto de uma reacção enzimática é o substrato da reacção seguinte. Numa via metabólica, uma série de enzimas participam na conversão de um substrato a um produto final. Professora Rosa Pinho|Biologia|12º Ano Fermentação e actividade enzimática 22 Controlo das vias metabólicas Quando a concentração do produto final é elevada , este liga-se ao centro alostérico da primeira enzima da cadeia, bloqueando toda a sequência. Quando a concentração do produto resultante dessa via, começa a diminuir, as moléculas libertam-se do centro alostérico, permitindo que a enzima se torne de novo activa, iniciando a actividade catalítica. Professora Rosa Pinho|Biologia|12º Ano Fermentação e actividade enzimática 23 Qual é a importância de conhecer os factores que afectam a actividade enzimática? As enzimas são essenciais no metabolismo de todos os organismos É necessário conhecer os factores que afectam a actividade das enzimas, principalmente dos microrganismos associados à produção, conservação e tratamento dos alimentos. Permitirá melhorar as condições de actuação dos microrganismos, de modo a melhorar a produção de alimentos. Professora Rosa Pinho|Biologia|12º Ano Fermentação e actividade enzimática 24 Temperatura A maioria das enzimas, nomeadamente as humanas, actuam para valores de temperaturas próximos de 37ºC Para temperaturas elevadas ocorre a desnaturação definitiva das enzimas. Só actuam para intervalos de temperatura muito específicos, sendo importantes na produção de alimentos. Professora Rosa Pinho|Biologia|12º Ano Fermentação e actividade enzimática 25 pH O pH influencia a carga dos aminoácidos que compõem a enzima. Como a carga é importante na estrutura tridimensional dos centros activos, influenciará a actividade das enzimas Só actuam para intervalos de pH muito específicos, sendo importantes na produção de alimentos. Professora Rosa Pinho|Biologia|12º Ano Fermentação e actividade enzimática 26 Factores que afectam a actividade enzimática Concentração da enzima O aumento do teor de enzimas permite aumentar a velocidade de conversão dos produtos Concentração do substrato Para concentrações elevadas, todos os centro activos ficam saturados, com estabilização da velocidade máxima. Com o aumento da concentração de substrato verifica-se um aumento da velocidade. Professora Rosa Pinho|Biologia|12º Ano Fermentação e actividade enzimática 27 Classificação e nomenclatura das enzimas Professora Rosa Pinho|Biologia|12º Ano Fermentação e actividade enzimática 28