título do resumo

AVALIAÇÃO DO EFEITO ANTINOCICEPTIVO DO DOADOR DE NITROXIL,
SAL DE ANGELI, EM MODELO DE DOR NEUROPÁTICA INDUZIDA PELA
CONSTRIÇÃO CRÔNICA DO NERVO CIÁTICO EM CAMUNDONGOS.
João Euripedes Calixto de Campos¹ (Bolsista Iniciação Científica UEL);
Waldiceu Aparecido Verri Junior1; Ana Carolina Rossaneis1
([email protected]).
Universidade Estadual
Biológicas/CCB
de
Londrina/
Departamento
de
Ciências
Área e sub-área do conhecimento: Ciências da Saúde – Farmácia.
Palavras-chave: nocicepção, neuropatia, doador nitroxil.
Resumo
Efeitos benéficos do nitroxil (HNO) têm sido demonstrados pelo uso de seu
doador, o sal de Angeli. Resultados prévios obtidos no nosso laboratório
demonstraram que o sal de Angeli reduz significativamente a hiperalgesia
inflamatória aguda induzida por substâncias algogênicas. Uma vez que os
fármacos disponíveis para o tratamento da dor neuropática apresentam baixa
eficácia e alta incidência de efeitos colaterais, torna-se de grande importância a
descoberta de novos alvos farmacológicos para o controle deste tipo de dor.
Este estudo propôs investigar o efeito do tratamento agudo e crônico com sal
de Angeli sobre o decurso temporal da hiperalgesia mecânica induzida por
constrição crônica do nervo ciático em camundongos. A dor neuropática foi
induzida por constrição do nervo ciático, e após 7 dias, os animais foram
tratados com sal de Angeli e a hiperalgesia mecânica foi avaliada pelo método
de pressão crescente na pata (Von Frey) 1, 3, 5, 7 e 24 horas após o
tratamento. A dose efetiva definida foi de 3mg / kg de sal de Angeli e foi
utilizada para o tratamento crônico. O tratamento diário com o doador de HNO
foi capaz de diminuir a hiperalgesia mecânica induzida pela constrição crônica
do nervo ciático.
Introdução e objetivo
As síndromes dolorosas crônicas resultantes de lesão primária ou disfunção de
estruturas do sistema nervoso periférico ou central são classificadas como “dor
neuropática”. O quadro de dor neuropática é caracterizado por percepções
sensoriais anormais, como dor espontânea (dor persistente independente de
estimulação externa, sendo descrita como dor em queimação ou choque),
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alodinia (estado em que estímulos normalmente inócuos, como o toque ou
alterações na temperatura ambiente, passam a ser percebidos como
dolorosos) e hiperalgesia (estado em que a sensibilidade a estímulos que
normalmente já são percebidos como dolorosos aumenta) (WOOLF e
MANNION, 1999).
Os efeitos biológicos desencadeados pelas diferentes espécies de
óxidos de nitrogênio têm sido objetos de intensa pesquisa. Muito desse
interesse provém da descoberta da geração endógena do óxido nítrico (NO),
sinalização intracelular via ativação da enzima guanilatociclase solúvel (GCs), e
o subsequente aumento na formação do segundo mensageiro
guanosinamonofosfato cíclico (GMPc) (MURAD, 2006; FUKUTO et al., 2009).
Além disso, estudos prévios realizados no laboratório de Dor e
Inflamação (Departamento de Ciências Patológicas) da Universidade Estadual
de Londrina demonstraram que o doador de nitroxil, sal de Angeli, reduziu a
hiperalgesia mecânica induzida por diferentes estímulos, como carragenina,
LPS, citocinas (TNF-α e IL-1β) e prostaglandina E2 (PGE2). Além de inibir a
produção de citocinas, como TNF-α e IL-1β, induzida pela carragenina, o efeito
antinociceptivo do sal de Angeli envolve ainda a ativação da via GMPc/ PKG/
canais de potássio ATP sensíveis (dados não publicados).
Procedimentos metodológicos
Foram utilizados camundongos Swiss machos (25 a 30 g) provenientes do
Biotério Central da Universidade Estadual de Londrina (UEL). Os protocolos
experimentais a serem utilizados neste projeto foram submetidos e aprovados
pela Comissão de Ética no Uso de Animais da Universidade Estadual de
Londrina (CEUA-UEL OF. CIRC. 26299.2012.91)
O limiar nociceptivo de retirada à estímulo mecânico dos animais foi
avaliado de acordo com o método descrito primeiramente por von Frey. Em
cada momento, este procedimento foi repetido 3 vezes a intervalos de 30 s, e a
média dos valores obtidos foram consideradas como estímulo mecânico limiar.
O procedimento cirúrgico para indução da dor neuropática foi realizado
conforme previamente descrito por Bennett e Xie (1988) com algumas
modificações. Antes da cirurgia (limiares basais) e 7 dias após a cirurgia foi
avaliada a hiperalgesia mecânica conforme o método descrito no item anterior.
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Resultados e discussão
O efeito do sal de Angeli sobre a hiperalgesia mecânica (Gráfico A) foi avaliado
1, 3, 5, 7 e 24 horas após o tratamento, no 7º dia após a indução da dor
neuropática. Foram utilizadas as doses de 0,3; 1 e 3 mg/kg de sal de Angeli. A
dose de 0,3 mg/kg não produziu alteração significativa em nenhum dos tempos
avaliados, enquanto a dose de 1 mg/kg foi capaz de produzir efeito
antinociceptivo na 5º após o tratamento. A dose de 3 mg/kg foi capaz de inibir a
hiperalgesia mecânica a partir da 1º hora até a 7º hora após o tratamento.
Nenhuma dessas doses foi capaz de inibir a hiperalgesia na 24º hora pós
tratamento.
No 7º dia após a constrição do nervo ciático (Gráfico B), foi iniciado o
tratamento com 3 mg/kg de sal de Angeli por 7 dias consecutivos (7-14). As
medidas de hiperalgesia mecânica foram realizadas antes da cirurgia de
indução de neuropatia e todos dos dias 5 horas após o tratamento com 3 mg/kg
de sal de Angeli. O tratamento foi capaz de reduzir significativamente a
hiperalgesia mecânica em todos os dias avaliados no protocolo experimental.
Conclusão
Considerando os resultados apresentados, é possível afirmar que tanto o
tratamento agudo quando o crônico com a dose de 3 mg/kg de sal de Angeli
possui efeito analgésico sobre a dor neuropática induzida pelo modelo de
constrição do nervo ciático. Sendo assim, o sal de Angeli apresenta potencial
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farmacológico terapêutico no tratamento de dores crônicas, no entanto mais
estudos devem ser realizados para que sejam entendidos seus mecanismos de
ação e avaliar a segurança do tratamento.
Agradecimentos
Agradecimento especial a minha orientadora e colaborador, ao apoio financeiro
da Universidade Estadual de Londrina (UEL) e apoio da Fundação Araucária,
CNPQ e CAPES.
Referências
BENNETT, G.J.; XIE, Y.K.A peripheral mononeuropathy in rat that produces
disorders of pain sensation like those seen in man.Pain.v.33, p. 87-107,1988.
CUNHA, T.M., et al. An electronic pressure-meter nociception paw test for
mice.Brazilian Journal of Medical and Biological Research. v. 37, p. 401-407,
2004.
FUKUTO, J.M., et al. Nitroxyl (HNO) signaling. Free Radical Biology and
Medicine.v. 47, p.1318-1324, 2009.
MURAD, F. Nitric oxide and cyclic GMP in cell signaling and drug
development.The New England Journal of Medicine. v. 355, p.2003–2011,
2006.
WOOLF, C. J.; MANNION, R. J. Neuropathic pain: aetiology, symptoms,
mechanisms, and management. Lancet.v.353, p.1959-64, 1999.
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