Protocolo desta aula

P3. Titulação de um ácido fraco monoprótico e de um
aminoácido
1. Introdução
A compreensão de como os sistemas biológicos estabilizam o pH dentro das
suas células é fundamental, uma vez que os processos bioquímicos que
permitem a sua manutenção são largamente influenciados por este factor. A
estabilização do pH, o qual é uma medida da concentração de protões em
solução, é conseguida por sistemas tampão. Cada sistema tampão tem um
intervalo de valores de pH dentro do qual é efectivo. Este intervalo centra-se à
volta do valor pKa do grupo funcional do sistema tampão.
Nestas condições, usando a equação de Henderson-Hasselbach:
pH = pKa + log ([A-] / [HA])
Se pH = pKa, então log ([A-] / [HA]) = 0, ou seja [A-] = [HA] (cf. Fig. 1).
Nestas aulas pretende-se demonstrar que moléculas orgânicas como o acetato
de sódio e os aminoácidos podem funcionar como sistemas tampão
extracelularmente. Estes resultados serão extrapolados para sistemas vivos.
pH
Moles de NaOH por moles de ácido
Figura 1 - Titulação de um ácido fraco e determinação da zona tampão e pKa.
a. Titulação de ácido acético glacial
1.
2.
3.
4.
Adicionar 20 ml de ácido acético glacial a um copo de 100 mL
Diluir este ácido 1:10 e 1:100
Colocar o eléctrodo do medidor de pH na solução
Adicionar 100 µL-1000 µL de 2 N NaOH até o pH ≈ 7,
dependendo da velocidade de variação do pH
5. Desenhar a curva de titulação e determinar o pKa do ácido
acético
b. Titulação de glicina
1.
2.
3.
4.
Prepare uma solução de 25 mL de 0,1 M glicina num copo de 100 mL
Diluir o aminoácido 1:2 e 1:50
Colocar o eléctrodo do medidor de pH na solução
Adicionar 100 µL-1000 µL de 2 N NaOH ou 2 N HCl até o pH
≈ 12-13 ou pH ≈ 1-2, respectivamente, dependendo da
velocidade de variação do pH
5. Desenhar a curva de titulação e determinar o(s) pKa da glicina
Compare as duas curvas de titulação e explique-as à luz dos seus
conhecimentos da equação de Henderson-Hasselbach.
Material:
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Ácido acético glacial
1 copo de 100 mL por grupo
Medidor de pH
Pontas amarelas
Pontas azuis
Micropipetas
2 N NaOH glicina em pó
Computador para desenhar as curvas de calibração
Agitador magnético (aparelho e "mosca")
Balança
Espátulas para pesar a glicina
Uma proveta por grupo para medir o ácido acético glacial e fazer as
diluições
Água destilada