Ácido Periódico

PROCEDIMENTO DO ÁCIDO PERIÓDICO - SCHIFF (PAS)
Modificação da AFIP do procedimento de McManus
FIXAÇÃO: Formalina a 10%, neutra, tamponada.
SECÇÕES: Parafina, 6 micrômetros.
SOLUÇÕES
SOLUÇÃO DE ÁCIDO PERIÓDICO A 0,5%
Ácido periódico (H5IO6) ^ ................................... 0,5 grama.
Água destilada .........................até completar 100 mililitros.
^ BIOSSEGURANÇA: O ácido períódico é reagente oxidante e corrosivo. Evite ingerí-lo, inalá-lo e o contato com a pele,
mucosas e quaisquer partes do corpo.
SOLUÇÃO DE ÁCIDO CLORÍDRICO 1 N
Ácido clorídrico (HCl) ^, densidade 1,19 ........... 83,5 mililitros.
Água destilada .................................................. 916,5 mililitros.
^ BIOSSEGURANÇA: O ácido clorídrico é tóxico e corrosivo. Evite inalá-lo, ingeri-lo, o contato com a pele, mucosas, ou
quaisquer partes do corpo e com a roupa.
REAGENTE SCHIFF DE COLEMAN ^
Fucsina básica (C.I. 42510) .................................................... 1 grama.
Água destilada, aquecida a 60oC ................................... 200 mililitros.
Leve até o ponto de ebulição.
Deixe esfriar e, então, acrescente
Metabissulfito de potássio (K2S2O5).............................2 gramas.
Solução de ácido clorídrico 1N ..............................10 mililitros.
Deixe branquear por 24 horas e, então, acrescente,
Carvão ativado ..........................................................0,5 grama.
Agite por 1 minuto e, então, filtre com papel de filtro grosso. Repita a filtração até que
a solução fique incolor. Armazene no refrigerador.
^ BIOSSEGURANÇA: A fucsina básica é tóxica e irritante e o metabissulfito de potássio é tóxico . Evite inalá-los,
ingeri-los, e o contato com a pele, mucosas, e quaisquer partes do corpo.
SOLUÇÃO DE HEMATOXILINA DE MAYER
ou
SOLUÇÃO DE HEMATOXILINA DE HARRIS
PROCEDIMENTO
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
Desparafine e hidrate até água destilada.
Oxide na solução de ácido periódico por 5 minutos.
Enxágue em água destilada.
Coloque no reagente Schiff de Coleman e deixe por 15 minutos.
Lave em água morna de torneira por 10 minutos.
Contracore na solução de hematoxilina de Mayer por 15 minutos, ou na de Harris por 6
minutos.
Lave em água de torneira por 15 minutos.
PROPHET, E. B.; MILLS, B.; ARRINGTON, J.B. & SOBIN, L.H., eds.- Armed Forces Institute of Pathology. Laboratory Methods
in Histotechnology. Washington, D.C., American Registry of Pathology, 1994.
8.
9.
Desidrate e clarifique através de etanol 95%, etanol absoluto, e xileno; 2 trocas de 2 minutos em
cada.
Monte em meio resinoso.
RESULTADOS
Glicogênio, mucina, e algumas
membranas basais .................................. vermelho a púrpura.
Fungos ......................................................... vermelho a púrpura.
Núcleos ................................................................................ azul.
REFERÊNCIA
McMANUS, J.F.A. - Histological and histochemical uses of periodic acid. Stain Technol., 23: 99,
1948.
PROPHET, E. B.; MILLS, B.; ARRINGTON, J.B. & SOBIN, L.H., eds.- Armed Forces Institute of Pathology. Laboratory Methods
in Histotechnology. Washington, D.C., American Registry of Pathology, 1994.
MÉTODO DE DIGESTÃO PELA DIASTASE f
SOLUÇÕES:
SOLUÇÃO TAMPÃO FOSFATO, pH 6,0
Cloreto de Sódio (NaCl) ................................................. 8 gramas.
Fosfato de sódio, monobásico (NaH2PO4)^..................... 4 gramas.
Fosfato de sódio, dibásico (Na2HPO4)^ ....................... 6,5 gramas.
Água destilada ......................................................... 100 mililitros.
^BIOSSEGURANÇA:
Danosos à saúde se inalados, engolidos, ou em contato com a pele, podendo, inclusive, causar
irritação e sensibilização.
SOLUÇÃO DE DIGESTÃO PELA DIASTASE
Diastase do malte ......................................................... 0,1 grama.
Solução tampão fosfato, pH 6,0 .............................. 100 mililitros.
PROCEDIMENTO:
1.
2.
3.
4.
Desparafine e hidrate até água destilada.
Deixe na solução de digestão pela diastase, previamente aquecida a 37oC, por 1 hora.
Lave completamente em água corrente de torneira ou em várias trocas de água destilada.
Prossiga com o método para glicogênio, a saber o Ácido Periódico - Schiff.
RESULTADOS
A coloração atribuível ao glicogênio é eliminada.
f N.doT.: A diastase pode ser substituída pela saliva humana. Já vem tamponada e é de graça!
PROPHET, E. B.; MILLS, B.; ARRINGTON, J.B. & SOBIN, L.H., eds.- Armed Forces Institute of Pathology. Laboratory Methods
in Histotechnology. Washington, D.C., American Registry of Pathology, 1994.