Coloração de Ziehl-Neelsen (BAAR) INTRODUÇÃO Através desta coloração, podemos visualizar as micobactérias, que possuem na sua parede celular uma grande concentração de lipídeos, devido à presença de ceras e ácidos graxos (ácidos micólicos), o que dificulta a sua visualização através das colorações tradicionais. UTILIZAÇÃO 1) Diagnóstico bacterioscópico de micobactérias 1.1) Colheita do material clínico: - Tuberculose: escarro; urina; leite; biópsia (de acordo com a localização). OBS: O escarro deve ser colhido pela manhã por causa do grande acúmulo, e deve conter o mínimo de saliva possível. Devem ser colhidas três amostras por paciente, em recipiente descartável. - Hanseníase: raspado de lesão; secreção nasal; gota de sangue do lóbulo da orelha. 1.2) Aplicação: - Busca de casos (início rápido da quimioterapia) - Eficiência da quimioterapia OBS: Este método de coloração possui baixa sensibilidade (mínimo de 10 bac/ml) e grande especificidade. Para veterinária: Mycobacterium bovis – Tuberculose bovina. Também pode ser transmitida ao homem, através do leite não pasteurizado. Patogenia: Bacilos ingeridos → mucosa da orofaringe e trato digestivo → nódulos mesentéricos → outros tecidos. EXECUÇÃO A coloração de Ziehl-Neelsen é realizada utilizando os seguintes métodos: a) lâmina fixada pelo calor; b) cobrir o esfregaço com fucsina fenicada; c) aquecer em chama até emitir vapores. A partir disto, iniciar a contagem de cinco minutos; d) lavar a lâmina em água, suavemente; e) colocar álcool-ácido clorídrico, até que não se desprenda mais corante (cerca de dois minutos); f) lavar a lâmina com água; g) cobrir o esfregaço com azul-de-metileno (durante trinta segundos); h) lavar a lâmina com água; i) deixar secar e observar ao microscópio com a objetiva de imersão. RESULTADOS Bactérias álcool ácido resistentes (BAAR): vermelho Bactérias não-álcool ácido resistentes (BNAAR): azul Soluções em ordem de aplicação Fucsina de Ziehl Álcool-ácido clorídrico Azul-de-metileno BAAR BNAAR Bactérias coradas em vermelho A fucsina se fixa nos lipídeos complexos e não abandona a célula, que permanece vermelha Bactérias coradas em vermelho A fucsina não se fixa nos componentes da parede celular e abandona a célula, que permanece sem corante em seu interior A célula adquire o corante, tornando-se azul A célula não é afetada e permanece vermelha DIAGNÓSTICO Ausência de BAAR em 100 campos < 1 BAAR em 100 campos 1-10 BAAR em 50 campos > 10 BAAR em 20 campos + ++ +++