FACULDADE DE MEDICINA DE RIBEIRÃO PRETO Departamento de Clínica Médica REUNIÃO CIENTÍFICA 2015 Número 29 11/11/2015 Horário: 11h00 Local: Sala 640 – Departamento de Clínica Médica Título: Desenvolvimento e aplicação de RT-PCR em tempo real para Vesiculovirusbrasileiros Pós-Graduanda: Aline Lavado Tolardo Orientador: Prof. Dr. Luiz Tadeu Moraes Figueiredo _____________________________________________________________________________________ Os Vesiculovirus são um gênero de vírus de RNA da família Rhabdoviridaeque inclui os sorotipos Carajás, Cocal, Marabá, Piry, Alagoas e Indiana. Estes são causadores de estomatite vesicular em ruminantes e doença febril humana no Brasil. As vesiculoviroses e suas epidemiologias são pouco conhecidas em seres humanos. Ainda, os Vesiculovirus (VSV) são pouco diagnosticados no homem e em animais pela escassez de métodos laboratoriais diagnósticos. Por isso, objetivamos neste trabalho desenvolver e testar uma RT-PCR em tempo real, pelo método SYBR Green, visando à detecção de VSV brasileiros. Primers que amplificam parte do gene da proteína G dos VSV foram utilizados no teste o qual mostrou-se capaz de detectar genomas dos VSV Piry, Indiana, Alagoas e Carajás. O método foi usado para testar amostras séricas de pacientes com doença febril aguda, de bovinos, de equinos e de macerados de artrópodos. A RT-PCR em tempo real mostrou-se 100 vezes mais sensível que a RT-PCR convencional para Vesiculovirus e também, permitiu detectar até 10 cópias de RNA do vírus Piry. Ainda, com esta técnica,foi possível diagnosticar e quantificar o VSV Alagoas nas amostras séricas de bovinos e de equinos. Portanto, esta RT-PCR em tempo real para VSVdeverá ser muito útil no diagnóstico e também, em futuras pesquisas, que permitirão ampliar o conhecimento epidemiológico sobre os Vesiculovirus. Palavras Chaves: Vesiculovirus, RT-PCR em tempo real, diagnóstico