“Vigilância Laboratorial do Zika Vírus no Estado de São Paulo
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“Vigilância Laboratorial do Zika Vírus no Estado de São Paulo” Renato Pereira de Souza, PhD Pesquisador Científico – NDTV/CV/IAL Zika vírus Flavivírus – Flaviviridae Grande Diversidade Impacto Considerável à Saúde Pública Ramo das Encefalites– WNV, JEV, ROCV. Clado do Spondweni A metodologia empregada é de alta sensibilidade e especificidade. Nominalmente o protocolo Lanciotti et al, 2008 tem a capacidade de detecção a partir de 25 cópias de RNA/Reação, sendo altamente específico mesmo quando desafiado com outros flavivírus. O protocolo Faye et al, 2013 relata uma sensibilidade de 0,05 PFU/reação e também apresentou alta especificidade, comprovada por sua não reatividade à outros 31 flavivírus. Doador de Sangue, 52 anos, Sexo masculino - Sumaré (SP) Sem Histórico de Viagem NDTV/IAL: 20/03 Receptor, Sexo masculino, 55 anos NDTV: 27/03 NDTV: 17/04 No Laboratório… NS1 ELISA Biorad® - IAL Campinas DENV fourplex real-time RT-PCR (Johnson et al., 2005) MAC-ELISA IgM (in-house) Tentativa de Isolamento em células C6/36 seguida por Ensaio de Imunofluorescência Indireta(IFA) usando anticorpo policlonal para Flavivírus e Anticorpo monoclonal para DENV. Resultados Blood Donor Receptor This sample was retrieved from HC/UNICAMP and was sent later to NDTV Receptor IFA Anti-flavivírus Positive IFA Anti-DENV Negative RT-PCR SLEV RT-PCR WNV Zika Virus RT-PCR Positive (Lanciotti et al., 2008) RT-PCR YFV Envelope sequenced Applied Biosystems 377 DNA sequencer PATOLOGIA IAL Modelo Animal – Efeitos Neurológicos HIPOCAMPO Inoculação IC. 6dias Inoculação SC. 13 dias Controle negativo. 13 dias REDE ZIKA ZIKV X DENV? Is it going to adapt and became an endemic viruses? DIAGNOSTICS? “SPILL BACK”? CHIKUNGUNYA? GUILLAIN BARRÉ MICROCEPHALY OBRIGADO!
