MARINAIDE_PEREIRA_NAEGELE - FCFAR

MARINAIDE PEREIRA NAEGELE
Título: ESTUDO DO POLIMORFISMO DA REGIÃO ITS-2 DO DNA
RIBOSSOMAL DE Rhodnius pictipes (Stal, 1872) e Rhodnius
domesticus (Neiva & Pinto, 1923) (HEMIPTERA, REDUVIIDAE). 2004.
80p.
Data da defesa: 10/08/2004
RESUMO:
Algumas espécies de Triatominae são muito semelhantes na coloração e
nas características morfológicas, particularmente as do gênero Rhodnius,
por esse motivo existe dificuldade em identificá-las com segurança.
Muitas técnicas de biologia molecular têm sido empregadas para auxiliar
a identificação e a sistemática dos Triatominae. Neste trabalho, as
espécies Rhodnius domesticus e Rhodnius pictipes foram estudadas
comparativamente com Rhodnius prolixus e Rhodnius stali usando a
técnica de Fragmentos Polimórficos gerados por enzimas de Restrição
baseados na Reação de Polimerase em Cadeia (PCR-RFLP). O DNA
genômico de cada uma das espécies foi extraído das
pernas e a região ITS-2 do DNA ribossomal foi amplificada, gerando uma
banda de 1200pb. Essas bandas foram digeridas separadamente com
onze
enzimas
de
restrição e os fragmentos gerados pelas endonucleases foram separados
por eletroforese em gel de agarose 2,5%. Dentre as enzimas
empregadas, MboI e RsaI foram capazes de distinguir dois grupos de
Rhodnius,
agrupando R. domesticus e R. prolixus em um grupo e R. pictipes e R.
stali em outro. HaeIII e HinfI apresentaram sítios de restrição nas quatro
espécies, porém todas as espécies apresentaram o mesmo
“fingerprinting” para cada uma das enzimas. AccI, EcoRI, EcoRV, HindIII
e
NotI
não
apresentaram
sítios
de restrição para as espécies estudadas. BstUI e HhaI identificaram três
das quatro espécies estudadas: BstUI diferenciou R. domesticus, R.
pictipes
e
R.
prolixus, enquanto que HhaI distinguiu R. domesticus, R. pictipes e R.
stali. Com a análise dos “fingerprintings” gerados por essas duas
enzimas é possível a identificação das quatro espécies estudadas com
clareza.