MARINAIDE_PEREIRA_NAEGELE - FCFAR
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MARINAIDE PEREIRA NAEGELE Título: ESTUDO DO POLIMORFISMO DA REGIÃO ITS-2 DO DNA RIBOSSOMAL DE Rhodnius pictipes (Stal, 1872) e Rhodnius domesticus (Neiva & Pinto, 1923) (HEMIPTERA, REDUVIIDAE). 2004. 80p. Data da defesa: 10/08/2004 RESUMO: Algumas espécies de Triatominae são muito semelhantes na coloração e nas características morfológicas, particularmente as do gênero Rhodnius, por esse motivo existe dificuldade em identificá-las com segurança. Muitas técnicas de biologia molecular têm sido empregadas para auxiliar a identificação e a sistemática dos Triatominae. Neste trabalho, as espécies Rhodnius domesticus e Rhodnius pictipes foram estudadas comparativamente com Rhodnius prolixus e Rhodnius stali usando a técnica de Fragmentos Polimórficos gerados por enzimas de Restrição baseados na Reação de Polimerase em Cadeia (PCR-RFLP). O DNA genômico de cada uma das espécies foi extraído das pernas e a região ITS-2 do DNA ribossomal foi amplificada, gerando uma banda de 1200pb. Essas bandas foram digeridas separadamente com onze enzimas de restrição e os fragmentos gerados pelas endonucleases foram separados por eletroforese em gel de agarose 2,5%. Dentre as enzimas empregadas, MboI e RsaI foram capazes de distinguir dois grupos de Rhodnius, agrupando R. domesticus e R. prolixus em um grupo e R. pictipes e R. stali em outro. HaeIII e HinfI apresentaram sítios de restrição nas quatro espécies, porém todas as espécies apresentaram o mesmo “fingerprinting” para cada uma das enzimas. AccI, EcoRI, EcoRV, HindIII e NotI não apresentaram sítios de restrição para as espécies estudadas. BstUI e HhaI identificaram três das quatro espécies estudadas: BstUI diferenciou R. domesticus, R. pictipes e R. prolixus, enquanto que HhaI distinguiu R. domesticus, R. pictipes e R. stali. Com a análise dos “fingerprintings” gerados por essas duas enzimas é possível a identificação das quatro espécies estudadas com clareza.
