Tecnologia do DNA recombinante, enzimas de restrição e - IQ-USP

Tecnologia do DNA recombinante, enzimas de restrição e aplicações
1. O que significa o termo DNA recombinante?
2. Conceitue os termos: enzima de restrição, plasmídeo, fago, vetores, genes
de resistência, sítio de clonagem, vetores de expressão, biblioteca, bancos,
projeto HUGO, proteínas recombinantes e terapia gênica
3. Descreva os passos básicos de um processo de clonagem.
4. Qual a diferença entre uma biblioteca genômica e uma biblioteca de cDNA?
5. Relacione algumas das aplicações da engenharia genética.
6. Defina terapia gênica e organismo transgênico.
7. As enzimas de restrição Hind III e Hae III, que reconhecem e clivam
respectivamente as sequências de DNA:
Hind III
Hae III


(5´) AAGCTT (3´)
(5´) GGCC (3´)
(3´) TTCGAA (5´)
(3´) CCGG (5´)


Estas enzimas foram utilizadas separadamente para clivar a molécula do
DNA dupla fita circular em cuja estrutura encontra-se a seqüência abaixo
GGGTCATCGAAGCTTTCAGCAGGCCTAGTTACTGAC
CCCAGTAGCTTCGAAAGTCGTCCGGATCAATGACTG
Quantos fragmentos dupla fita ou simples fita foram gerados com o uso de
cada uma destas enzimas? Explique.
8. Quais das sequências abaixo são possíveis sítios de reconhecimento de
uma enzima de restrição? Por quê?
(a)
5´-AGTC-3´
3´-TCAG-5´
(b)
5´-ATCG-3´
3´-TAGC-5´
(c)
5´-ACCT-3´
3´-TGGA-5´
(d)
5´-ACGT-3´
3´-TGCA-5´