Reagentes não marcados

Métodos Imunológicos
que utilizam reagentes
não marcados
Precipitação
1897
Rudolf Kraus
1868-1932
Precipitação Quantitativa
1935
Michael Heidelberger
1888-1991
Curva de Heidelberger
Precipitado Formado
Anticorpo livre
Antígeno livre
-
+
-
+
Zona de excesso
Zona de
Zona de excesso
Ac
equivalência
Ag
Quantidade de antígeno adicionado
Imunodifusão
Pode ser utilizada para a detecção e quantificação
de antígenos ou anticorpos.
É baseada na difusão de uma molécula de Ac ou
Ag em uma base de ágar, com formação de um
precipitado.
Imunodifusão dupla
Resposta: amostra contém anti1
Ag 1 + Ag 3
Ag 1
amostra
Resposta: Anticorpos anti-1,
anti-2 e anti-4
Ag 2 + Ag 4
Ag 1
amostra
Imunodifusão radial
Imunodifusão radial
O tamanho do halo formado é diretamente proporcional à
quantidade de Ag ou Ac na amostra.
Aglutinação
Agrupamento de partículas
1897
Max Von Gruber
Georges Fernand Isidore Widal
1853-1927
1862-1929
Aglutinação – classificação
• Aglutinação Direta
 Observa-se a aglutinação das hemácias
Exemplo: tipagem sanguínea ABO e Rh
• Aglutinação Indireta
 Observa-se a aglutinação de partículas tratadas
com antígenos ou anticorpos
Exemplo: partículas de látex revestidas de
anticorpos anti-rotavírus
negativo
positivo
Teste para sífilis - RPR
negativo
positivo
positivo
Rapid Test Reagin - RPR
Hemaglutinação
PERFIL DE SEDIMENTAÇÃO
Aglut.
+
Aglut.
-
Aglut.
+
Aglut.
-
Como Ocorre?
Hemaglutinação Direta
Negativo
Positivo
Teste de inibição da
Hemaglutinação Direta
Negativo
Positivo
Teste de inibição da Hemaglutinação
Direta
Hemaglutinação Indireta
Negativo
Positivo
Teste de Hemaglutinação
Indireta
• Trypanosoma cruzi
• Treponema pallidum
• Toxoplasma gondii
Qualitativo
Quantitativo
1:8
Título = 32UI/mL
1:2
Vírus
1:2
1:2
1:2
1:2
Diluição Seriada
8
Mistura com
hemácias
Visão Lateral
Visão de
cima
16
32
64
128
256
1
2
3
4
5
6
7
8
Neg.
Pos.
1/1024
1/512
1/256
1/128
1/64
1/32
1/16
1/8
1/4
Paciente
1/2
Hemaglutinação Passiva ou indireta
“Quantitativo”
Título UI/mL
64
8
512
<02
32
> 1024
32
04
Hemaglutinação Passiva ou Indireta