e isoproterenol + AVE 0991
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Efeitos Morfofuncionais do AVE 0991 em Corações Isolados de Ratos Tratados com Isoproterenol Aluna: Thauana Luiza de Oliveira Orientador: Prof. Dr. Anderson José Ferreira PAD-Morfologia Laboratório de Biologia do Desenvolvimento Introdução RENIN-ANGIOTENSIN SYSTEM Angiotensinogen Renin Angiotensin I ACE Chymase ACE 2 PEP, NEP Angiotensin II Angiotensin III AMP Angiotensin IV ACE, NEP Angiotensin-(1-7) ACE2, PEP, PCP AMP Angiotensin-(1-9) ACE Angiotensin-(1-5) AVE 0991 Agonista não-peptídico do receptor Mas da ANG-(1-7); Estimula liberação de NO pelas células endoteliais de aorta bovina e compete com a 125I-ANG-(1-7) pela ligação ao receptor Mas (Wiemer et al., 2002); AVE 0991 Efeito similar ao da ANG-(1-7) em camundongos que receberam sobrecarga hídrica e liberação de NO por células CHO que expressam o receptor Mas (Pinheiro et al., 2004); Estimula a liberação de NO e promove vasodilatação dependente do endotélio em segmentos de aorta de camundongos, e essas ações são completamente abolidas por antagonistas do receptor Mas ou por sua deleção (Lemos et al., 2005). Isoproterenol Um modelo de hipertrofia e insuficiência cardíaca Agonista β-adrenérgico nãoseletivo: vasodilatação periférica e aumento da freqüência cardíaca; Aumento do consumo de oxigênio predispõe o coração a danos isquêmicos (Grimm et al., 1998); Edema, infiltrado celular e fibrose: déficit de contratilidade (Beznak et al., 1963); Acentuada necrose dos cardiomiócitos: insuficiência cardíaca (Grimm et al., 1998). Objetivos Objetivo geral : • Estudar os efeitos morfofuncionais do AVE 0991 em corações isolados de ratos tratados com isoproterenol. Objetivos específicos : • Determinar os efeitos do agonista do receptor Mas da ANG-(1-7), AVE 0991, na função cardíaca de ratos tratados com isoproterenol. • Avaliar o papel do NO na ação do AVE 0991 na função cardíaca de ratos tratados com o isoproterenol. • Analisar qualitativamente o colágeno perivascular e intersticial em ventrículo esquerdo de corações de ratos controle, tratados com isoproterenol e com isoproterenol + AVE 0991 utilizando -se a coloração Picro Sírius; • Analisar qualitativamente o colágeno perivascular e intersticial em ventrículo esquerdo de corações de ratos controle, tratados com isoproterenol e com isoproterenol + AVE 0991 utilizando-se a coloração Tricrômico de Masson; Metodologia Salina Água Isoproterenol AVE 0991 0,1 ml/Kg 0,5 ml i.p. gavagem Grupo 1 n=9 Grupo 2 n=5 Grupo 3 n=5 X 2,0 mg/Kg i.p. 1,0 mg/Kg gavagem X X X X X Grupo 4 n=8 Grupo 5 n=5 Salina Água Isoproterenol 0,1 ml/ Kg i.p. 0,5 ml gavagem 2,0 mg/Kg i.p. X X AVE 0991 1,0 mg/Kg gavagem L-NAME 10 mg/Kg gavagem X X X X Sistema de Perfusão Registros • • • • Tensão máxima e tensão mínima dT/dt máxima e dT/dt mínima Pressão de Perfusão Freqüência Cardíaca Transdutor de Pressão Transdutor de Força Resultados EFEITOS FUNCIONAIS DO AVE 0991 EM CORAÇÕES ISOLADOS DE RATOS TRATADOS COM ISOPROTERENOL Tensão Máxima gramas (g) 15 10 *** 5 *# *** 0 0 10 20 min Controle Isoproterenol AVE 0991 Isoproterenol + AVE 0991 30 40 * p<0,05, **p<0,001 e ***p<0,0001 (comparado ao controle); # p<0,001 (comparado ao isoproterenol). Tensão Mínima gramas (g) 1.2 *** ** 0.8 0.4 0 10 20 min 30 Controle Isoproterenol AVE 0991 Isoproterenol + AVE 0991 40 **p<0,001 e ***p<0,0001 (comparado ao controle) dT/dt Máxima 250 gramas/seg 200 *** 150 *# *** 100 50 0 0 10 20 30 min Controle Isoproterenol AVE 0991 Isoproterenol + AVE 0991 40 * p<0,05 e ***p<0,0001 (comparado ao controle); # p<0,001 (comparado ao isoproterenol) dT/dt Mínima 250 gramas/seg 200 *** 150 *# *** 100 50 0 0 10 20 min Controle Isoproterenol AVE 0991 Isoproterenol + AVE 0991 30 40 * p<0,05 e ***p<0,0001 (comparado ao controle); # p<0,001 (comparado ao isoproterenol) Pressão de Perfusão 100 mm Hg 75 ** ** # 50 25 0 0 5 10 15 20 25 min Controle Isoproterenol AVE 0991 Isoproterenol + AVE 0991 30 35 * p<0,001 ,**p<0,0001 (comparado ao controle); # p<0,05 (comparado ao isoproterenol) Freqüência Cardíaca 250 # 200 bpm * 150 100 0 10 20 min 30 Controle Isoproterenol AVE 0991 Isoproterenol + AVE 0991 40 * p<0,0001 (Controle comparado ao isoproterenol) e # p<0,05 (Controle comparado ao Isoproterenol + AVE 0991) PAPEL DO ÓXIDO NÍTRICO NOS EFEITOS FUNCIONAIS AVE 0991 EM CORAÇÕES ISOLADOS DE RATOS TRATADOS COM ISOPROTERENOL Tensão Máxima gramas (g) 15 *** * ** *** 10 5 0 0 10 20 30 min Controle L-NAME Isoproterenol Isoproterenol+AVE0991 Isoproterenol+AVE0991+L-NAME 40 ***p<0,0001 (comparado ao controle); **p<0,001 (comparado ao isoproterenol), *p<0,01 (comparado ao isoproterenol + AVE 0991) Tensão Mínima 1.1 gramas (g) 1.0 *** 0.9 0.8 # 0.7 0.6 0 10 20 30 min Controle L-NAME Isoproterenol Isoproterenol+AVE0991 Isoproterenol+AVE0991+L-NAME 40 ***p<0,0001 (comparado ao controle) e #p<0,05 (comparado ao isoproterenol + AVE 0991) dT/dt Máxima 250 gramas/seg 200 *** # * *** 150 100 50 0 0 10 20 30 min Controle L-NAME Isoproterenol Isoproterenol+AVE0991 Isoproterenol+AVE0991+L-NAME 40 ***p<0,0001 (comparado ao controle); *p<0,001 (comparado ao isoproterenol); #p<0,001 (comparado ao isoproterenol + AVE 0991) dT/dt Mínima gramas/seg 200 *** ## 150 * 100 *** 50 0 10 20 30 min Controle L-NAME Isoproterenol Isoproterenol+AVE0991 Isoproterenol+AVE0991+L-NAME 40 ***p<0,0001 (comparado ao controle); *p<0,001 (comparado ao isoproterenol) e ##p<0,0001 (comparado ao isoproterenol + AVE 0991) Pressão de Perfusão 120 mmHg 95 *** 70 # ** * 45 20 0 10 20 30 min Controle L-NAME Isoproterenol Isoproterenol+AVE0991 Isoproterenol+AVE0991+L-NAME 40 ***p<0,0001 e **p<0,001 (comparado ao controle); *p<0,05 (comparado ao isoproterenol); #p<0,0001(comparad o ao isoproterenol + AVE 0991) Freqüência Cardíaca 240 bpm 220 * *** 200 180 0 10 20 30 40 min Controle L-NAME Isoproterenol Isoproterenol+AVE0991 Isoproterenol+AVE0991+L-NAME ***p<0,0001 e * p<0,05 (comparado ao controle) ANÁLISE QUALITATIVA DO COLÁGENO PERIVASCULAR EM VENTRÍCULO ESQUERDO DE CORAÇÕES DE RATOS B A C Fotomicrografias evidenciando colágeno perivascular de ventrículo esquerdo de ratos controle (A), isoproterenol (B) e isoproterenol + AVE 0991 (C). Coloração: Picro Sírius. Aumento de 40x. B A C Fotomicrografias evidenciando colágeno perivascular de ventrículo esquerdo de ratos controle (A), isoproterenol (B) e isoproterenol + AVE 0991(C). Coloração: Tricrômico de Masson. Aumento de 10x. ANÁLISE QUALITATIVA DO COLÁGENO INTERSTICIAL EM VENTRÍCULO ESQUERDO DE CORAÇÕES DE RATOS B A C Fotomicrografias evidenciando colágeno intersticial do ventrículo esquerdo de rato controle (A), isoproterenol (B) e isoproterenol + AVE 0991 (C). Coloração: Tricrômico de Masson. Aumento de 40x. Conclusões O AVE 0991 apresentou efeito cardioprotetor, atenuando a insuficiência cardíaca induzida pelo isoproterenol. Essa ação foi independente do NO. O efeito vascular do AVE 0991 em vasos de corações de ratos tratados com isoproterenol foi dependente da liberação de NO. O AVE 0991 exerceu atividade anti-fibrótica em corações de ratos tratados com o isoproterenol. Muito Obrigada!
