Trabalho de Biotecnologia Desenvolvimento de transgênicos e Clonagem gênica Grupo: Fabio Lucélia Patrícia Gomes Desenvolvimento de Transgênicos Os últimos vinte anos têm sido pródigos em avanços da ciência e tecnologia vegetal, revertendo em crescente benefício para algumas etapas do processo produtivo, sem ainda claro benefício para componentes finais da cadeia, especificamente os consumidores. Empresas de biotecnologia iniciaram o processo de liberação de plantas geneticamente modificadas sem levar em consideração a percepção pública sobre o tema, conduzindo a reações adversas que variam desde aspectos técnicos, passando por questões ideológicas, chegando a aspectos de ordem filosófica. Afinal, estamos ou não participando de um mudança de paradigma no processo de produção agrícola? Quais os efeitos sobre as estratégias e abordagens de melhoramento genético, responsável direto pelo aumento de produtividade agrícola nos últimos 100 anos? Qualquer resposta a essas perguntas deve considerar fatores associados à espécie em questão, à extensão da característica genética modificada ou introduzida, ao domínio e custo da tecnologia, à existência de leis de proteção adequadas, à opção do produtor/consumidor em plantar/consumir essas variedades. ALIMENTOS TRANSGÊNICOS Alimentos Geneticamente Modificados (Alimentos Transgênicos): são alimentos criados em laboratórios com a utilização de genes (parte do código genético) de espécies diferentes de animais, vegetais ou micróbios. * Organismos Geneticamente Modificados: são os organismos que sofreram alteração no seu código genético por métodos ou meios que não ocorrem naturalmente. * Com o aprimoramento e desenvolvimento das técnicas de obtenção de organismos geneticamente modificados e o aumento da sua utilização, surgiram então, dois novos termos para o nosso vocabulário: biotecnologia e biossegurança. Pontos positivos dos alimentos transgênicos * Aumento da produção de alimentos * Melhoria do conteúdo nutricional, desenvolvimento de nutricênicos (alimentos que teriam fins terapêuticos); * Maior resistência e durabilidade na estocagem e armazenamento Pontos negativos dos alimentos transgênicos * Aumento das reações alérgicas; * As plantas que não sofreram modificação genética podem ser eliminadas pelo processo de seleção natural, pois, as transgênicas possuem maior resistência às pragas e pesticidas; * Aumento da resistência aos pesticidas e gerando maior consumo deste tipo de produto; * Apesar de eliminar pragas prejudiciais à plantação, o cultivo de plantas transgênicas pode, também, matar populações benéficas como abelhas, minhocas e outros animais e espécies de plantas. Rotulagem dos alimentos transgênicos Um outro tema abordado quando se discute os alimentos transgênicos é o da rotulagem dos produtos. Todo o cidadão tem o direito de saber o que irá consumir. Por isto, a descrição da composição do alimento e o gene que foi inserido no produto, devem ser informados. E tem que conter este símbolo abaixo. Vantagens dos alimentos transgênicos 1. O alimento pode ser enriquecido com um componente nutricional essencial. Um feijão geneticamente modificado por inserção de gene da castanha do Pará passa produzir metionina, um aminoácido essencial para a vida. Um arroz geneticamente modificado produz vitamina A. 2. O alimento pode ter a função de prevenir, reduzir ou evitar riscos de doenças, através de plantas geneticamente modificadas para produzir vacinas, ou iogurtes fermentados com microrganismos geneticamente modificados que estimulem o sistema imunológico. 3. A planta pode resistir ao ataque de insetos, seca ou geada. Isso garante estabilidade dos preços e custos de produção. Um microrganismo geneticamente modificado produz enzimas usadas na fabricação de queijos e pães o que reduz o preço deste ingrediente. Sem falar ainda que aumenta o grau de pureza e a especificidade do ingrediente e permite maior flexibilidade para as indústrias. 4. Aumento da produtividade agrícola através do desenvolvimento de lavouras mais produtivas e menos onerosas, cuja produção agrida menos o meio ambiente. Desvantagens dos alimentos transgênicos 1. O lugar em que o gene é inserido não pode ser controlado completamente, o que pode causar resultados inesperados uma vez que os genes de outras partes do organismo podem ser afetados. 2. Os genes são transferidos entre espécies que não se relacionam, como genes de animais em vegetais, de bactérias em plantas e até de humanos em animais. A engenharia genética não respeita as fronteiras da natureza – fronteiras que existem para proteger a singularidade de cada espécie e assegurar a integridade genética das futuras gerações. 3. A uniformidade genética leva a uma maior vulnerabilidade do cultivo porque a invasão de pestes, doenças e ervas daninha sempre é maior em áreas que plantam o mesmo tipo de cultivo. Quanto maior for a variedade (genética) no sistema da agricultura, mais este sistema estará adaptado para enfrentar pestes, doenças e mudanças climáticas que tendem a afetar apenas algumas variedades. 4. Organismos antes cultivados para serem usados na alimentação estão sendo modificados para produzirem produtos farmacêuticos e químicos. Essas plantas modificadas poderiam fazer uma polinização cruzada com espécies semelhantes e, deste modo, contaminar plantas utilizadas exclusivamente na alimentação. 5. Os alimentos transgênicos poderiam aumentar as alergias. Muitas pessoas são alérgicas a determinados alimentos em virtude das proteínas que elas produzem. Há evidencias de que os cultivos transgênicos podem proporcionar um potencial aumento de alergias em relação a cultivos convencionais. Transgênicos à venda Batata frita contendo Bt 176 contendo soja RR tipo Viena contendo soja RR contendo soja RR Clonagem Gênica Clonagem gênica: isolamento, amplificação e purificação de um gene ou de genes, a partir do material genético de um dado organismo. Clonagem Gênica Gerar grande número de cópias de um determinado DNA alvo • Inserção de fragmentos de DNA em vetores • Replicação de vetores contendo o inserto • Recuperar (purificar) os fragmentos dos vetores • Clivagem do vetor e do DNA com enzimas de restrição • Ligação do vetor ao inserto • Replicação do vetor em células competentes • Purificação do inserto 1 2 3 4 Para Que???? Desenvolvimento de modelos para: Estudo da estrutura/função de genes Estudo da estrutura/função de proteínas • Produção de proteínas recombinantes(importância médica) • Bioreatores • Produção de organismos transgênicos • Melhoramento Genético • Clonagem terapêutica • Clonagem reprodutiva Principais passos da clonagem de genes 1. O vetor funciona como um veículo que transporta o gene para o interior da célula hospedeira, normalmente uma bactéria. 2. Dentro da célula hospedeira o vetor multiplica- se, produzindo numerosas cópias idênticas não só de si próprio, mas também do gene que transporta. 3. Quando a célula hospedeira se divide, a sua descendência recebe cópias das moléculas de ADN recombinante. 4. Apó s um grande número de divisões celulares, é produzido uma colônia ou clone, de células hospedeiras idênticas. 5. Cada célula no clone contém uma ou mais cópias da molécula de ADN recombinante. O gene transportado pela molécula recombinante é agora conhecido como sendo clonado. Vetores: veículos de clonagem que permitem que os fragmentos de DNA a serem clonados sejam introduzidos e propagados em uma célula hospedeira adequada. Célula hospedeira: células de fácil manipulação, crescimento rápido e constituição genética bem conhecida (ex: bactérias, leveduras, células de cultura de tecidos de mamíferos e insetos). Vetores em Biologia Molecular O que eles precisam ter? A - Origem de replicação garantindo que este consiga se replicar dentro da célula B - Marcadores selecionáveis permitindo que todas as células que contenham o vetor consigam ser identificadas C - Um ou mais sítios únicos de restrição nos quais um fragmento de DNA possa ser inserido Exemplo de Vetor de Clonagem Vetor de expressão Vetor construído para servir de ferramenta em estudos de expressão gênica. Polipeptídeo traduzido de um gene quimérico: dois ou poucos genes são unidos de forma que suas seqüências codantes são ligadas no mesmo frame de leitura; a construção gênica é transcrita e traduzida como um único gene, produzindo uma única proteína quimérica.